馬玉娥占秀安*朱巧明劉偉龍夏 磊

(1.浙江大學(xué)飼料科學(xué)研究所，杭州 310029;2.浙江欣欣飼料股份有限公司，嘉興 314005)

色氨酸是維持動(dòng)物生長的必需氨基酸，但是動(dòng)物體內(nèi)不能合成，而植物性飼料中的色氨酸通常不能滿足畜禽需要，很容易造成色氨酸缺乏。色氨酸是維持雞的代謝和生產(chǎn)性能不可缺少的必需氨基酸。Goihl［1］研究發(fā)現(xiàn)，在低蛋白質(zhì)水平的玉米－豆粕型飼糧中，色氨酸容易缺乏，需額外添加。隨著色氨酸工業(yè)合成成本的降低，在飼糧中添加色氨酸將會(huì)成為必然，所以對(duì)動(dòng)物飼糧中色氨酸適宜添加量進(jìn)行研究具有重要意義。國內(nèi)外已經(jīng)有許多學(xué)者在色氨酸對(duì)豬［2］、肉雞［3］和蛋雞［4］生產(chǎn)性能的影響方面做了一些研究，但目前有關(guān)色氨酸在肉種雞方面的研究尚未見報(bào)道。為此，本試驗(yàn)研究了飼糧不同色氨酸水平對(duì)肉種雞生產(chǎn)性能、抗氧化功能和血清生化指標(biāo)的影響，旨在探討肉種雞飼糧色氨酸的適宜水平，為生產(chǎn)應(yīng)用提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

L－色氨酸(純度≥98.5%)，購自日本味之素公司。試驗(yàn)動(dòng)物為嶺南黃父母代肉種雞。試驗(yàn)飼糧參考我國行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 33—2004黃羽肉種雞營養(yǎng)需要，配制成粉狀飼料，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)采用單因素4水平試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選取28周齡黃羽肉種雞360只，隨機(jī)分為4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30只，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧(色氨酸水平為0.16%)，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0.02%、0.04%和0.06%的色氨酸。預(yù)試期2周，正試期8周。試驗(yàn)雞飼養(yǎng)于3層重疊式籠中，每籠飼養(yǎng)2只，進(jìn)行常規(guī)飼養(yǎng)管理。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

1.3 樣品采集與保存

試驗(yàn)期間每天分重復(fù)收集種蛋，各重復(fù)隨機(jī)選取種蛋50枚，共600枚，于10～15℃保存，并按每5 d一批分重復(fù)進(jìn)行孵化。肉種雞飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每組隨機(jī)選取10只肉種雞，心臟采血制備血清，置于－80℃冰箱中保存。

1.4 指標(biāo)測定與方法

1.4.1 生產(chǎn)性能及繁殖性能指標(biāo)測定

以重復(fù)為單位統(tǒng)計(jì)每天產(chǎn)蛋個(gè)數(shù)、總蛋重以及周耗料量，計(jì)算累計(jì)1～8周產(chǎn)蛋率、料蛋比和平均蛋重。在孵化期間對(duì)入孵種蛋進(jìn)行生物學(xué)檢查，記錄無精蛋數(shù)，待到孵化完成后記錄死精蛋數(shù)和出雛數(shù)，并對(duì)出生雛雞進(jìn)行稱重，從而計(jì)算累計(jì)受精率、孵化率、出雛率和雛雞均重。

受精率(%)=100×受精蛋數(shù)/入孵蛋數(shù);

孵化率(%)=100×出雛數(shù)/受精蛋數(shù);

出雛率(%)=100×出雛數(shù)/入孵蛋數(shù)。

1.4.2 血清抗氧化指標(biāo)測定

谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、還原性谷胱甘肽(GSH)含量、總抗氧化能力(T-AOC)均用南京建成生物工程研究所的試劑盒測定，試劑配制和操作步驟按說明書進(jìn)行。

1.4.3 血清生化指標(biāo)的測定

血清尿酸(UA)、總蛋白(TP)和白蛋白(ALB)含量采用試劑盒法進(jìn)行測定，操作步驟按照試劑盒說明書進(jìn)行，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.4.4 血清酶活性的測定

血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性采用試劑盒法進(jìn)行測定，操作步驟按照試劑盒說明書進(jìn)行，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.5 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0軟件的單因素方差分析進(jìn)行顯著性分析，差異顯著則進(jìn)行Duncan氏多重比較分析，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果

2.1 飼糧色氨酸水平對(duì)肉種雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可見，在基礎(chǔ)飼糧中添加不同水平的色氨酸能夠顯著提高肉種雞的平均日采食量(P＜0.05)，分別提高了 4.32%、3.40% 和 2.99%，但對(duì)肉種雞的其他生產(chǎn)性能無顯著影響(P＞0.05)。各組間平均蛋重有上升的趨勢，而料蛋比有下降的趨勢，但差異均不顯著(P＞0.05)。

2.2 飼糧色氨酸水平對(duì)肉種雞繁殖性能的影響

由表3 可見，飼糧中0.18%、0.20%和0.22%水平的色氨酸使肉種雞種蛋受精率分別提高了7.85%、3.94% 和 6.07%(P ＜0.05);使種蛋孵化率分別提高了 5.07%、5.61% 和 5.95%(P ＜0.05);使種蛋出雛率分別提高了13.32% 、9.38%和12.37%(P ＜0.05)。其中，0.18%色氨酸水平組種蛋的受精率和出雛率達(dá)到最高水平。在雛雞均重方面，0.18%色氨酸水平組較對(duì)照組顯著提高了3.99%(P ＜0.05)，其他各組間無顯著差異(P ＞0.05)。

表2 飼糧色氨酸水平對(duì)肉種雞生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effects of dietary tryptophan levels on performance of broiler breeders

表3 飼糧色氨酸水平對(duì)肉種雞繁殖性能的影響Table 3 Effects of dietary tryptophan levels on reproductive performance of broiler breeders

2.3 飼糧色氨酸水平對(duì)肉種雞血清ALB、TP和UA含量的影響

由表4可見，飼糧中0.18%水平的色氨酸可以顯著提高血清ALB和TP的含量(P＜0.05)，較對(duì)照組分別提高了4.02%和13.40%;UA含量雖然下降，但未達(dá)到顯著水平(P＞0.05)。與對(duì)照組相比，其余色氨酸水平組肉種雞血清ALB、TP和UA含量均無顯著差異(P＞0.05)。

表4 飼糧色氨酸水平對(duì)肉種雞血清白蛋白、總蛋白和尿酸含量的影響Table 4 Effects of dietary tryptophan levels on ALB，TP and UA contents in serum of broiler breeders

2.4 飼糧色氨酸水平對(duì)肉種雞血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表5可見，除血清GSH-Px活性外，其余血清抗氧化指標(biāo)組間差異不顯著(P＞0.05)，0.18%色氨酸水平組的血清GSH-Px活性顯著高于其他各組(P ＜0.05)，分別提高了 12.58%、33.66% 和16.72%。

2.5 飼糧色氨酸水平對(duì)肉種雞血清GOT和GPT活性的影響

由表6可見，基礎(chǔ)飼糧中添加色氨酸對(duì)肉種雞血清GOT和GPT活性沒有顯著影響(P＞0.05)。

表5 飼糧色氨酸水平對(duì)肉種雞血清抗氧化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of dietary tryptophan levels on antioxidant indices in serum of broiler breeders

表6 飼糧色氨酸水平對(duì)肉種雞血清GOT和GPT活性的影響Table 6 Effects of dietary tryptophan levels on GOT and GPT activities in serum of broiler breeders U/mg prot

3 討論

3.1 飼糧色氨酸水平對(duì)肉種雞生產(chǎn)性能的影響

本研究表明，飼糧添加色氨酸能顯著提高肉種雞的種蛋受精率、孵化率、出雛率和雛雞均重，但對(duì)產(chǎn)蛋率、平均蛋重和料蛋比均無顯著影響。試驗(yàn)中并沒有出現(xiàn)因色氨酸水平的提高而引起的生產(chǎn)性能顯著提高，由此提示，飼糧中0.16%色氨酸水平已滿足肉種雞生產(chǎn)需求，而0.18%色氨酸水平能夠最大程度地提高肉種雞的繁殖性能。有關(guān)色氨酸對(duì)肉種雞繁殖性能影響的研究，國內(nèi)外尚未見報(bào)道。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，基礎(chǔ)飼糧中添加色氨酸，可以提高肉種雞的繁殖性能。一方面，色氨酸的主要代謝產(chǎn)物5－羥色胺(5-HT)是促進(jìn)促性腺激素釋放和提高繁殖性能的重要因子［5］。飼糧中色氨酸水平上升后，肉種雞體內(nèi)的5-HT水平也會(huì)有所提高，從而提高肉種雞的繁殖性能;另一方面，有關(guān)資料表明，家禽精液中的不飽和脂肪酸有利于維持生物膜的流動(dòng)性，有助于維持精子的運(yùn)動(dòng)能力，提高精細(xì)胞的活力，但易受到自由基和有機(jī)過氧化物的氧化損壞，進(jìn)而破壞生物膜的完整性，導(dǎo)致其物質(zhì)運(yùn)輸受到影響，精細(xì)胞的活力最終下降［6］。本試驗(yàn)中色氨酸通過褪黑(MT)素提高機(jī)體抗氧化功能，并能較好地向蛋內(nèi)轉(zhuǎn)移沉積，進(jìn)而對(duì)精子和胚胎發(fā)育產(chǎn)生抗氧化保護(hù)作用，從而提高種蛋的受精率、孵化率和出雛率。具體機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究探討。

動(dòng)物的采食量可決定其養(yǎng)分?jǐn)z入量，從而影響動(dòng)物的生產(chǎn)性能，色氨酸通過5-HT調(diào)節(jié)動(dòng)物的采食量［7］。5-HT可增加動(dòng)物的飽食感，當(dāng)它超過生理水平時(shí)可抑制動(dòng)物的采食［8］。本試驗(yàn)研究表明，肉種雞的平均日采食量隨著色氨酸水平的提高呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。這說明在適當(dāng)水平下添加色氨酸對(duì)肉種雞有促進(jìn)采食作用。

國外許多研究表明，色氨酸缺乏會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物生產(chǎn)性能下降，補(bǔ)充合成色氨酸可顯著改善其生產(chǎn)性能［9－11］。本試驗(yàn)中添加色氨酸后，肉種雞的生產(chǎn)性能有所提高，但提高不明顯。余東游等［12］試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，高色氨酸水平組(0.24%、0.28%和0.32%)的蛋雞生產(chǎn)性能并沒有提高，這可能與飼糧色氨酸水平過高影響其他大分子中性氨基酸的吸收利用有關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果與其類似，具體機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。

3.2 飼糧色氨酸水平對(duì)肉種雞血清ALB、TP和UA含量的影響

機(jī)體蛋白質(zhì)的沉積取決于蛋白質(zhì)合成代謝和分解代謝的速度。血清TP和ALB是反映肝臟蛋白合成能力的重要指標(biāo)，而血清UA是反映蛋白質(zhì)分解代謝的一個(gè)重要指標(biāo)。色氨酸是一種特殊的氨基酸，不僅參與調(diào)控蛋白質(zhì)的合成，還參與蛋白質(zhì)的組成，但主要用于體蛋白質(zhì)的沉積。席鵬彬等［13］研究報(bào)道，基礎(chǔ)飼糧中添加色氨酸可提高黃羽肉雞體蛋白質(zhì)沉積，公、母雞體蛋白質(zhì)沉積量分別提高 21.0% ～31.8% 和 5.4% ～27.9%，且公、母雞均以0.17%色氨酸組的蛋白質(zhì)沉積量最大，說明補(bǔ)充色氨酸有利于黃羽肉雞體蛋白質(zhì)的沉積。本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，0.18%色氨酸水平組的血清ALB和TP的含量顯著提高，UA含量降低，而高色氨酸水平組(0.20%、0.22%)血清ALB、TP和UA的含量變化不明顯，說明飼糧中添加適量的色氨酸能改善飼糧氨基酸平衡，使體內(nèi)蛋白質(zhì)合成速度大于分解速度，從而提高了肉種雞體內(nèi)蛋白質(zhì)的沉積。這與吳維輝［14］和 Corzo等［15］在白羽肉雞以及余東游等［12］在蛋雞上的研究結(jié)果相似。

3.3 飼糧色氨酸水平對(duì)肉種雞血清抗氧化指標(biāo)的影響

機(jī)體的抗氧化防御體系與健康存在著密切的關(guān)系，體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)包括酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)，其中GSH、GSH-Px、T-AOC、SOD等是酶系統(tǒng)的重要組成成分，其活性以及含量的高低反映機(jī)體抗氧化能力的強(qiáng)弱，進(jìn)一步反映了機(jī)體的健康狀況。關(guān)于色氨酸作用于動(dòng)物抗氧化性能的報(bào)道極少。

MT在日夜節(jié)律的控制中起重要作用，還可通過自身直接和激活體內(nèi)的抗氧化酶體系間接起到抗氧化作用［7］。MT作為色氨酸的代謝產(chǎn)物，主要通過提供電子清除活性氧，還可通過其受體影響細(xì)胞及組織內(nèi)的一些氧化和抗氧化酶類，如能增強(qiáng)SOD、GSH-Px等的活性，達(dá)到清除自由基的作用。MT主要清除羥自由基［16］，還可清除過氧化自由基。Surai等［17］報(bào)道，GSH-Px在禽內(nèi)的抗氧化防御體系中起著重要的作用。本研究結(jié)果表明，0.18%的色氨酸水平能使血清GSH-Px活性、SOD活性、GSH含量和T-AOC升高，其中GSH-Px活性升高顯著，同時(shí)MDA含量呈下降趨勢，表明了0.18%的色氨酸水平可增強(qiáng)肉種雞的抗氧化能力。

3.4 飼糧色氨酸水平對(duì)肉種雞血清GOT和GPT活性的影響

伍喜林等［18］研究表明，仔豬飼糧中不同色氨酸水平對(duì)血清轉(zhuǎn)氨酶活性并無顯著影響。本試驗(yàn)中，各組的血清GOT和GPT活性沒有明顯變化，這與伍喜林等的研究結(jié)果一致。GOT和GPT是氨基酸合成過程中2種關(guān)鍵酶，其活性高低反映了體蛋白質(zhì)氨基酸合成與分解狀況。正常情況下，血清中這2種酶活性較低，組織中以心臟和肝臟的活性最高。當(dāng)組織受損時(shí)，大量的轉(zhuǎn)氨酶進(jìn)入血清，引起血清中轉(zhuǎn)氨酶活性升高，因此，可以根據(jù)血清中這2種酶活性的變化來判斷組織器官的功能。本試驗(yàn)結(jié)果表明了試驗(yàn)所涉及的4個(gè)色氨酸水平均沒對(duì)心臟和肝臟造成損害作用，這對(duì)色氨酸在肉種雞實(shí)際生產(chǎn)中的應(yīng)用具有指導(dǎo)意義。

4 結(jié)論

①在28周齡黃羽肉種雞飼糧中添加色氨酸能顯著提高種雞的繁殖性能，對(duì)生產(chǎn)性能沒有顯著影響。

②在本試驗(yàn)條件下，綜合考慮各項(xiàng)指標(biāo)，肉種雞玉米－豆粕型飼糧中色氨酸適宜水平為0.18%。

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