魏光河，張培晏

（1.西南大學(xué)榮昌校區(qū)動物醫(yī)學(xué)系，重慶 402460；2.四川省廣元市元壩區(qū)畜牧食品局，四川廣元 628021）

運(yùn)輸是豬的主要應(yīng)激原之一，據(jù)張林等［1］報道的相關(guān)數(shù)據(jù)統(tǒng)計，運(yùn)輸后仔豬發(fā)病率高達(dá)25.3%，病死率在6.1%～14.29%不等，對養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。Buckham K R等［2－4］研究了運(yùn)輸應(yīng)激對國外優(yōu)良品種豬的影響，但國內(nèi)對優(yōu)良地方品種豬的研究報道較少。

榮昌豬作為中國的地方優(yōu)良品種豬之一，趙敏、張庭科等報道了榮昌豬以其母性強(qiáng)、繁殖率較高、性情溫順、肉質(zhì)良好而聞名的品種特性。張毅等［5］報道了榮昌豬的繁殖性能選育指標(biāo)，姚瑞英等［6］報道過廣西環(huán)江香豬等中國地優(yōu)良品種豬的靜態(tài)生理生化指標(biāo)；康世良［7］研究運(yùn)輸應(yīng)激對豬的營養(yǎng)及健康的影響。運(yùn)輸對榮昌豬生理生化指標(biāo)的動態(tài)影響尚未見報道。本研究擬通過比較運(yùn)輸前后榮昌仔豬生理生化指標(biāo)的變化，探討榮昌豬對運(yùn)輸?shù)哪褪芰?，為榮昌豬的養(yǎng)殖提供技術(shù)參考，并為建立和減弱運(yùn)輸?shù)谋＝》桨负痛胧┨峁┛茖W(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗用動物 健康的40日齡榮昌仔豬12頭，購自重慶市榮昌縣石河村某養(yǎng)豬戶，常規(guī)飼養(yǎng)管理。

1.1.2 主要儀器和設(shè)備 Au640型全自動生化分析儀，為日本奧林巴斯產(chǎn)品；MINDRAY BC－1800全自動血液細(xì)胞分析儀，為深圳邁瑞公司產(chǎn)品；5mL一次性注射器、獸用體溫計、聽診器；肝素抗凝管、枸櫞酸鈉抗凝管等；豬籠、長安貨車等。

1.1.3 主要試劑 肝素，38g／L的枸櫞酸鈉；谷丙轉(zhuǎn)氨酶及谷草轉(zhuǎn)氨酶測定試劑盒，為上海藍(lán)怡科技有限公司產(chǎn)品；甘油三酯等檢測試劑，均為四川邁克生物科技股份有限公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 動物分組 將12頭試驗用榮昌仔豬隨機(jī)編號為1號～12號，其中1號～10號為第1組，即試驗組；11號～12號為第2組，即空白對照組。試驗組于室外溫度15℃左右的條件下，將10頭試驗用榮昌仔豬裝入豬籠，往返運(yùn)輸合計2h約100km的路程，途中不給任何飲水和食物，并于運(yùn)輸前、運(yùn)輸停止后30min、運(yùn)輸停止后 第1、3、7天采集血樣；空白對照組飼喂于圈舍，采血和測定方法同試驗組。

1.2.2 血液樣本的采集及處理 準(zhǔn)備好抗凝管、注射器等，于試驗前對處于空腹?fàn)顟B(tài)的12頭試驗用榮昌仔豬按5mL／頭前腔靜脈采血。其中，3mL注入抗凝管（肝素）混勻用于檢驗血液生化指標(biāo)，2mL注入抗凝管（枸櫞酸鈉）混勻用于檢驗血液生理指標(biāo)，編號，靜置，備送檢。同法采集運(yùn)輸后30min、運(yùn)輸后1d、運(yùn)輸后3d及運(yùn)輸后7d試驗仔豬的血樣，編號，送檢。

1.2.3 血液生化、生理指標(biāo)的檢測 將由肝素處理的各血液樣品置于Au640全自動血液生化分析儀，按其要求添加各種檢測試劑，檢測葡萄糖、尿素等血液生化指標(biāo)的變化，記錄檢測結(jié)果。由枸椽酸鈉處理的各血液樣品送BC－1800全自動血液細(xì)胞分析儀，檢測白細(xì)胞、RBC分布寬度變異系數(shù)等血液生理指標(biāo)的變化，記錄檢測結(jié)果。用F檢驗對運(yùn)輸前后的各血液生理生化指標(biāo)做統(tǒng)計分析，比較運(yùn)輸前后的差異顯著性。

1.2.4 三大生理指標(biāo)的檢測 對所有12頭試驗用榮昌仔豬于運(yùn)輸前、運(yùn)輸停止后30min、運(yùn)輸后第1、3、7天監(jiān)測三大生理指標(biāo)即體溫、呼吸和脈搏。其中，運(yùn)輸后的第1、3、7天均在空腹?fàn)顟B(tài)時測量三大生理指標(biāo)。肛門測定體溫，取3次測定結(jié)果的平均值。通過觀察豬腹部起伏測定呼吸次數(shù)，重復(fù)3次，取其平均值。脈搏次數(shù)采用聽診器左側(cè)胸部聽診，重復(fù)3次取其平均值。

1.2.5 運(yùn)輸對榮昌豬血液生化指標(biāo)的影響 根據(jù)測定的試驗組及空白對照組各血液樣品生化指標(biāo)結(jié)果，以每個生化指標(biāo)為基礎(chǔ)，計算試驗組（10個平行樣本）和空白對照組（2個平行樣本）每個生化指標(biāo)的平均值作為本次試驗的測量值，觀察運(yùn)輸對榮昌豬血液生化指標(biāo)影響的動態(tài)變化過程。

1.2.6 運(yùn)輸對榮昌豬血液生理指標(biāo)的影響 參照本文1.2.5項的方法，測定運(yùn)輸2h約100km的運(yùn)輸對榮昌豬血液生理指標(biāo)影響的變化，觀察運(yùn)輸對榮昌豬血液生化指標(biāo)影響的動態(tài)變化過程。

1.2.7 運(yùn)輸對榮昌豬三大臨床生理指標(biāo)的影響

根據(jù)測定的三大臨床生理指標(biāo)結(jié)果為基礎(chǔ)，同本文1.2.5項的方法測定運(yùn)輸2h后榮昌豬在7d內(nèi)的三大生理指標(biāo)的變化，觀察運(yùn)輸對榮昌豬的影響程度。

1.2.8 運(yùn)輸對榮昌豬個體間影響的差異性分析以測定的10頭試驗豬的各血液生理、生化指標(biāo)為基礎(chǔ)，采用F檢驗分析各試驗豬在組內(nèi)各個體間的血液生理、生化指標(biāo)在運(yùn)輸前、運(yùn)輸停止后30min、運(yùn)輸停止后第1、3、7天變化的差異性。同時，以運(yùn)輸停止后30min的各血液生理、生化指標(biāo)為基礎(chǔ)，與空白對照組相應(yīng)指標(biāo)作參照，分析血液生化與生理指標(biāo)與運(yùn)輸?shù)牟町愋浴?/p>

1.2.9 試驗數(shù)據(jù)用Microsoft Excel 2010統(tǒng)計處理軟件進(jìn)行方差分析和F值檢驗。

2 結(jié)果

2.1 運(yùn)輸前后榮昌豬生化指標(biāo)的變化及分析

榮昌豬在運(yùn)輸前后的血液生化指標(biāo)變化情況見表1。

表1 運(yùn)輸前后血液生化指標(biāo)的檢測及分析Table 1 Detection and analysis of the blood biochemical indexes of Rongchang pig for the transport stress

（續(xù)表1）

從表1可知，尿素、肌酐、總膽固醇、甘油三酯、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、球蛋白、血清鉀、血清鈣、血清磷、血清鎂、淀粉酶在運(yùn)輸停止時與運(yùn)輸前比較差異都極顯著（P＜0.01）；葡萄糖、白蛋白、血清鈉、血清氯在運(yùn)輸停止時與運(yùn)輸前比較差異不顯著；葡萄糖、尿素、肌酐、總膽固醇、肌酸激酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、球蛋白、淀粉酶在運(yùn)輸停止時與運(yùn)輸前比較時都先有不同程度升高后逐漸恢復(fù)到運(yùn)輸前水平；低密脂蛋白、直接膽紅素、間接膽紅素、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷氨酰胺基轉(zhuǎn)移酶、血清鉀、血清鈣、血清鎂、血清磷在運(yùn)輸停止時與運(yùn)輸前比較都有不同程度降低后逐漸恢復(fù)到運(yùn)輸前水平。

從監(jiān)測的運(yùn)輸停止后30min到運(yùn)輸后第7天的榮昌豬血液生化各指標(biāo)的變化可以看出，血液中葡萄糖在運(yùn)輸停止后第1天～第3天內(nèi)降至正常值以下，即5.0mmol／L，第7天基本恢復(fù)至正常水平；谷草轉(zhuǎn)氨酶于運(yùn)輸后30min內(nèi)上升明顯，達(dá)73.40 mmol／L，運(yùn)輸停止后第3天開始下降，在第7天時恢復(fù)到運(yùn)輸前水平；肌酸激酶于運(yùn)輸停止時（即運(yùn)輸停止后30min）急劇上升，運(yùn)輸停止后第1天急劇下降，并于運(yùn)輸停止后第7天表現(xiàn)接近對照組的水平；血清鉀、鈉、鈣離子水平于運(yùn)輸停止時（即運(yùn)輸停止后30min）降低，運(yùn)輸停止后第1天升高，第7天接近正常水平。

2.2 運(yùn)輸前后榮昌豬血液生理指標(biāo)的變化及分析

運(yùn)輸前后榮昌豬血液生理指標(biāo)的變化結(jié)果見表2。

表2 運(yùn)輸前后血液生理指標(biāo)的檢測及分析Table 2 Detection and analysis of the blood physical indexes of Rongchang pig for the transport stress

從表2可知，白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞絕對值、中性粒細(xì)胞絕對值、紅細(xì)胞壓積、平均紅細(xì)胞血紅蛋白、血小板壓積、血小板、紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞百分比、中性粒細(xì)胞百分比、中間細(xì)胞百分比、血紅蛋白濃度、RBC分布寬度變異系數(shù)在運(yùn)輸停止時與運(yùn)輸前比較差異都極顯著；血小板壓積、RBC分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差、平均RBC血紅蛋白濃度、平均血小板體積、血小板分布寬度在運(yùn)輸停止時與運(yùn)輸前比較差異不顯著；紅細(xì)胞、中性粒細(xì)胞百分比、平均血小板體積、RBC分布寬度變異系數(shù)四項血液生理指標(biāo)在運(yùn)輸停止時與運(yùn)輸前比較都有不同程度的升高，其他的血液生理指標(biāo)在運(yùn)輸停止時都呈現(xiàn)下降。

從表2的動態(tài)監(jiān)測可知，白細(xì)胞含量于運(yùn)輸停止時（即運(yùn)輸停止后30min）急劇下降，運(yùn)輸停止后第1、3、7天處于高水平；紅細(xì)胞于運(yùn)輸停止時到運(yùn)輸停止后的第7天之內(nèi)均處于高水平。

2.3 運(yùn)輸前后榮昌豬臨床三大生理指標(biāo)的變化及分析

榮昌豬在運(yùn)輸前后三大臨床生理指標(biāo)見表3。

表3 臨床三大生理指標(biāo)檢測結(jié)果Table 3The results of three clinical physical indexes of Rongchang pig for the transport stress

從表3可知，在整個試驗過程中體溫變化不大，運(yùn)輸前后差異不顯著；脈搏在運(yùn)輸停止時與運(yùn)輸前比較差異極顯著，運(yùn)輸脈搏次數(shù)明顯增加；呼吸在運(yùn)輸停止時與運(yùn)輸前比較差異顯著，呼吸次數(shù)減少。

從表3的動態(tài)監(jiān)測可知，脈搏于運(yùn)輸后加快，運(yùn)輸停止后第1天達(dá)最高值，即131次／min，運(yùn)輸停止后第7天還處于正常水平之上；呼吸頻率于運(yùn)輸停止后30min內(nèi)降低，運(yùn)輸停止后第1天接近正常值，運(yùn)輸停止后第2天起，處于26次／min左右的較低水平。

2.4 運(yùn)輸對榮昌豬個體間影響的差異性分析

多重比較表明，運(yùn)輸前的10頭試驗用榮昌仔豬與空白組的2頭榮昌仔豬各血液生理生化指標(biāo)及臨床指標(biāo)在個體間差異不顯著 （P＞0.05），運(yùn)輸后30min各生理生化指標(biāo)在試驗豬及空白對照組間的差異顯著（P＜0.05），部分指標(biāo)在試驗豬組內(nèi)的個體間差異極顯著 （P＜0.01）。

3 討論

動物血液生化指標(biāo)作為衡量其機(jī)體的健康指針，根據(jù)環(huán)境和飼養(yǎng)等因素的變化一直處于動態(tài)平衡，以適應(yīng)周圍環(huán)境。作為器官機(jī)能正常與否的信號，血液各生化指標(biāo)的變化程度必將表明動物某個器官是否發(fā)生了器質(zhì)性的病變或損傷。本文對榮昌豬在運(yùn)輸前后重要的幾個血液生化指標(biāo)進(jìn)行了動態(tài)變化監(jiān)測。從監(jiān)測運(yùn)輸2h后，7d內(nèi)的動態(tài)變化可知，葡萄糖、肌酐、谷草轉(zhuǎn)氨酶及三種主要血清離子在運(yùn)輸前后波動都很大，差異極顯著 （P＜0.01）。但在運(yùn)輸停止后的第7天基本恢復(fù)到和對照組一致的水平。谷草轉(zhuǎn)氨酶主要存在于肝細(xì)胞線粒體內(nèi)，當(dāng)肝臟發(fā)生嚴(yán)重壞死或破壞時，將引起谷草轉(zhuǎn)氨酶的升高，運(yùn)輸后谷草轉(zhuǎn)氨酶濃度升高說明運(yùn)輸對榮昌豬肝臟功能影響較大。

鉀離子是細(xì)胞內(nèi)的主要陽離子，體內(nèi)98%的鉀離子存在于細(xì)胞內(nèi)。心肌和神經(jīng)都需要有相對恒定的鉀離子濃度來維持正常的應(yīng)激性。朱道立等［8］報道動物應(yīng)激時血清中鈉離子變化不明顯，高得儀等［9］報道要減少。本試驗結(jié)果表明，運(yùn)輸停止時血清鉀離子減少，停止運(yùn)輸后第1天血清鉀離子回升，應(yīng)該是運(yùn)輸時的應(yīng)激及氣溫等緊密相關(guān)。本次試驗中的其他幾種血清離子如鈣、磷、鎂等在運(yùn)輸前后的變化差異都極顯著 （P＜0.01）。

本研究監(jiān)測榮昌豬在運(yùn)輸停止后連續(xù)7d的血液生理指標(biāo)的動態(tài)變化可知，除白細(xì)胞于運(yùn)輸停止后到第7天一直處于高水平之外，其他幾種生理指標(biāo)也一直處于對照組對應(yīng)的指標(biāo)濃度值之上。而白細(xì)胞作為動物機(jī)體免疫防御的主要細(xì)胞類型，表明運(yùn)輸對榮昌豬的特異性和非特異性免疫機(jī)制都有一定影響。紅細(xì)胞濃度的持續(xù)較高水平說明運(yùn)輸對榮昌豬的刺激所致緊張和呼吸頻率增加，需要消耗更多氧有關(guān)［10］。

從監(jiān)測的三大臨床生理指標(biāo)動態(tài)變化表明，榮昌豬的體溫在運(yùn)輸后變化不很明顯，這主要與運(yùn)輸時天氣（室外溫度15℃左右）及季節(jié)（11月份）有關(guān)；脈搏在運(yùn)輸后上升，可能與運(yùn)輸時的噪音、陌生環(huán)境等引起的精神緊張有關(guān)；呼吸頻率在運(yùn)輸后下降與運(yùn)輸所至緊張而呼吸加快，后因呼吸肌疲勞密切相關(guān)。

試驗表明，正常健康的榮昌豬運(yùn)輸2h約100 km的路程后，與抵抗疾病密切相關(guān)的肌酸激酶、白細(xì)胞及紅細(xì)胞數(shù)量、葡萄糖的含量等都出現(xiàn)明顯變化。因此，運(yùn)輸前的增強(qiáng)抵抗力的中藥保健、重點(diǎn)疫苗的免疫、飼喂或注射抗應(yīng)激的藥物以降低神經(jīng)機(jī)能的緊張度，并輔以電解多維飲水，調(diào)節(jié)其機(jī)體內(nèi)環(huán)境等，應(yīng)該是減少運(yùn)輸對榮昌豬影響的較好措施。

綜上所述，正常健康的榮昌仔豬在15℃室外溫度下運(yùn)輸2h后，大部分生理生化指標(biāo)如谷丙轉(zhuǎn)氨酶、肌酸激酶等上升，部分生理生化指標(biāo)如白細(xì)胞等的數(shù)量急劇下降，運(yùn)輸停止時與運(yùn)輸前比較，差異極顯著（P＜0.01）。運(yùn)輸后30min試驗組豬的各個生理生化指標(biāo)與空白組的榮昌豬在個體間差異顯著（P＜0.05）；試驗組內(nèi)大部分生理生化指標(biāo)在個體間差異不顯著（P＞0.05），小部分生理生化指標(biāo)的變化在試驗組內(nèi)個體間差異極顯著（P＜0.01）。榮昌豬對運(yùn)輸?shù)牡挚鼓芰^差，需要在運(yùn)輸前后做好抗應(yīng)激措施。

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