李建英，路文盛，顏曉東，郭 進(jìn)，劉 斐，陳 健，葉偉林

(廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院，南寧 530021)

隨著人們對糖尿病腎病(DN)發(fā)病機(jī)制的進(jìn)一步認(rèn)識，證實了炎癥反應(yīng)在 DN進(jìn)展中具有重要作用。DN時腎臟的固有細(xì)胞、炎癥細(xì)胞合成和分泌多種炎癥介質(zhì) (如 NF-κB、IL-6、IL-8、TNF-α、單核細(xì)胞趨化因子-1等)參與炎癥反應(yīng)，炎癥因子(如TNF-α、IL-1β、IL-6)又可通過 IKK/NF-κB[1]、C-Jun氨基末端激酶通路、細(xì)胞因子信號抑制物通路等系統(tǒng)的活化，干擾胰島素的信號傳導(dǎo)，引起和加速腎臟疾病的發(fā)生和發(fā)展。而多種他汀類藥物具有不依賴于調(diào)脂作用的潛在抗炎活性[2]，為此我們觀察了老年早期 DN患者血清高敏 C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、TNF-α、IL-6、IL-1β等炎癥因子水平和外周血 NF-κB p65的磷酸化水平，并探討了阿托伐他汀的治療作用?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇 1997年 8月 ～2010年 8月在我院住院的老年 T2DM患者 96例，均符合 1999年 WHO制定的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，并排除:①伴有高血壓、高脂血癥、糖尿病急性并發(fā)癥、慢性腎功能衰竭等患者;②伴有明確的心、腦、肝、肺等重要器官疾病及腫瘤、外傷、風(fēng)濕免疫性疾病患者;③血肌酸激酶≥正常上限的 3倍，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶或門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶≥正常上限的 1.5倍;④2周內(nèi)使用維生素、阿司匹林、調(diào)脂藥、ACEI、ARB類藥物、胰島素、胰島素增敏劑及抗氧化藥物。根據(jù)是否伴有 DN分為糖尿病組(DM組)、DN組。其中，DM組 30例，男 16例、女 14例，年齡(64.9±6.8)歲;DN組 66例，男 36例、女 30例，年齡(65.3±6.8)歲;DN組隨機(jī)分為糖尿病常規(guī)治療組(DN1組)31例[男 17例、女 14例，年齡(65.4±7.1)歲]、糖尿病常規(guī)治療加阿托伐他汀(立普妥，輝瑞制藥，20 mg/片，每晚 1片)干預(yù)組(DN2組)35例 [男 19例、女 16例，年齡(65.3 ±6.7)歲]。同期選擇我院健康體檢者 30例作為正常對照組(NC組)，男 16例、女 14例，年齡 (64.3±7.3)歲。各組性別、年齡具有可比性。

1.2 方法 所有患者先給予糖尿病常規(guī)治療，包括糖尿病飲食、低鹽低脂飲食、口服降糖藥。待血糖穩(wěn)定[空腹血糖(FPG)≤7 mmol/L，餐后 2 h血糖(2 h PG)≤10 mmol/L)]1個月后，觀察各組血清 hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1β 水平 。 hs-CRP采用免疫熒光分析法檢測;TNF-α、IL-6、IL-1β采用 ELISA法檢測，試劑盒購自上海船夫生物科技有限公司。同時，分別從各組中隨機(jī)抽取 10名患者，應(yīng)用免疫印跡分析法檢測外周血 NF-κB p65磷酸化水平。結(jié)果以Alphaimager 2200多功能凝膠成像儀定量掃描條帶灰度，以 p65蛋白條帶/β-actin蛋白條帶的比值反映 NF-κB p65的磷酸化水平(抗 NF-κB p65抗體購自碧云天生物技術(shù)研究所)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用 SPSS13.0統(tǒng)計軟件，數(shù)據(jù)以±s表示，組間均數(shù)比較采用獨(dú)立樣本t檢驗。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清炎癥因子水平比較 見表1、2。

2.2 各組 NF-κB p65磷酸化水平比較 NC組、DM組、DN1、DN2組治療前 NF-κB p65的磷酸化水平逐漸升高，分別為0.47±0.15、0.76±0.13、0.95±0.18、0.95±0.17，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05)。DN2組治療后為 0.81±0.14，較治療前0.95±0.17顯著下降(P＜0.0);DN1治療后為0.94±0.32，較治療前 0.95±0.18變化不大(P＞0.05)。見圖1。

表1 各組炎癥因子水平比較(±s)

表1 各組炎癥因子水平比較(±s)

注:與 NC組比較，*P＜0.01;與 DM組比較，△P＜0.01

NC組 30 1.12±0.39 10.61±1.45 10.61±1.26 6.24±0.89 DM組 30 4.57±1.14* 20.38±2.66*16.01±1.55*10.61±1.65*DN組 66 7.75±2.81*△35.80±8.15*△20.00±2.35*△15.96±1.90*△

表2 不同治療方案治療前后血清炎癥因子水平比較(±s)

表2 不同治療方案治療前后血清炎癥因子水平比較(±s)

注:與同組治療前比較，#P＜0.01

DN1 31治療前 7.75±2.80 35.80±7.65 20.00±2.55 15.91±1.89治療后 7.74±2.79 34.59±2.55 20.10±2.57 15.90±1.78 DN2 35治療前 7.74±2.83 35.78±8.34 20.01±2.42 16.09±1.95治療后 5.65±2.07#24.88±7.86#17.15±2.14#11.45±1.71#

圖1 NC組、DM組、DN1組、DN 2組治療前后NK-κB磷酸化水平比較

3 討論

研究表明，炎癥是促進(jìn)糖尿病血管病變的關(guān)鍵[3]，炎癥因子(如細(xì)胞間黏附分子-1、血管細(xì)胞黏附分子-1、IL-6)參與了 DN的發(fā)生發(fā)展。NF-κB是炎癥啟動、調(diào)節(jié)的關(guān)鍵核因子，不僅參與了多種炎癥因子轉(zhuǎn)錄的調(diào)控，其活化后還能誘導(dǎo)許多因子的轉(zhuǎn)錄。炎癥因子(如 IL-6、TNF-α)能夠上調(diào)其活性，形成一種正反饋調(diào)節(jié)機(jī)制，增強(qiáng)炎性反應(yīng)的程度[4]。hs-CRP是由肝臟合成的，主要受血循環(huán)中 IL-6、TNF-α調(diào)節(jié)，反過來也可以刺激單核細(xì)胞釋放 IL-6、IL-1β、TNF-α，介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生單核細(xì)胞趨化蛋白-1和內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子等，發(fā)揮致炎作用。TNF-α、IL-6是具有多種功能的細(xì)胞因子，可直接作用于胰島 β細(xì)胞，造成胰島 β細(xì)胞損傷，誘發(fā)胰島素抵抗，是 DN獨(dú)立危險因素[5]，同時在 DN形成過程中，IL-6、IL-1β、TNF-α、hs-CRP升高 ，又可導(dǎo)致 NF-κB激活，導(dǎo)致炎癥狀態(tài)放大，形成惡性循環(huán)[6]。本研究結(jié)果表明，外周血 NF-κB p65的磷酸化水平以及血清 hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1β水平，DN組比DM組升高(P＜0.05或 ＜0.01)，且均高于 NC組(P＜0.05或 ＜0.01)，表明 DM外周血 NF-κB p65的磷酸化水平以及血清 hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1β水平高低與 DM的病變階段、病變嚴(yán)重程度密切相關(guān)，與近年研究結(jié)果[7]一致。

近年研究表明[2]，阿托伐他汀具有改善內(nèi)皮細(xì)胞功能、抗炎、抗增殖、抗氧化作用。其作用機(jī)制可能是通過抑制HMG-CoA還原酶，減少甲羥戊酸途徑而啟動IκB的基因轉(zhuǎn)錄，IκB增多時可與 NF-κB重新合成 NF-κB/IκB復(fù)合物，使得 NF-κB失活[8]。本研究結(jié)果顯示，DN2組治療后 NF-κB p65的磷酸化水平以及血清hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1β水平明顯降低，表明阿托伐他汀可以抑制 DN患者炎癥水平;DN1組對炎癥指標(biāo)影響不明顯，提示僅控制血糖不能完全改善 DM患者的炎癥反應(yīng)，與 He等[9]研究結(jié)果一致。

綜上所述，我們認(rèn)為阿托伐他汀可抑制老年早期 DN患者外周血 NF-κB活性及炎癥因子 hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1β水平，顯著改善患者炎癥狀態(tài)。

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