陳春云 伊犁師范學(xué)院醫(yī)院，新疆伊寧市 835000

支原體主要定植于人體和動(dòng)物的腔道黏膜上皮上。存在于人類泌尿生殖道的解脲脲原體（Uu）、人型支原體（Mh）能引起非淋菌性尿道炎、前列腺炎、附睪炎、尿路結(jié)石、不育癥及婦女生殖道炎癥、自然流產(chǎn)等。對(duì)支原體的檢測(cè)，常規(guī)的血清學(xué)檢驗(yàn)意義不明確，故對(duì)支原體進(jìn)行分離培養(yǎng)，是檢測(cè)支原體感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”，同時(shí)也可以及時(shí)進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，對(duì)指導(dǎo)臨床合理、規(guī)范用藥，防止耐藥菌株產(chǎn)生有很大意義。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 2008年7月－2009年8月，就診于我院婦科及男性病科病人的陰道分泌物及男性尿道分泌物，其中女性89例，男性17例，共計(jì)106例。

1.2 標(biāo)本采集 女性用女用拭子在宮頸管內(nèi)1～2cm處取宮頸分泌物。應(yīng)先用拭子將膿性分泌物揩干凈，再用另一個(gè)拭子取材；男性用男性拭子由前尿道2～4cm處取尿道分泌物。在取材時(shí)，應(yīng)注意要在宮頸或尿道內(nèi)旋轉(zhuǎn)并至少停留20s以上，以便獲得更多細(xì)胞。

1.3 試劑與儀器 試劑：珠海黑馬生物工程有限公司生產(chǎn)的支原體鑒定藥物選擇測(cè)試卡 。本試劑盒針對(duì)解脲脲原體（Uu）和人型支原體（Mh）檢測(cè)，可以一次性同步獲得以下檢測(cè)結(jié)果：解脲脲原體和人型支原體的分離培養(yǎng)、鑒定；測(cè)定標(biāo)本中支原體的濃度；對(duì)12種抗生素的敏感度測(cè)定（大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、喹諾酮類）。儀器：臺(tái)式恒溫培養(yǎng)箱，型號(hào)303－0型，北京市永光明醫(yī)療儀器廠。

1.4 操作方法 嚴(yán)格按試劑盒操作步驟進(jìn)行。（1）取Uu－Mh培養(yǎng)基1瓶，反應(yīng)板1條。用無菌吸嘴吸取培養(yǎng)基100μl加入反應(yīng)板空白孔G－。（2）將采集的標(biāo)本拭子插入培養(yǎng)瓶。在靠近液面上方的瓶壁擠壓旋轉(zhuǎn)拭子數(shù)次，使標(biāo)本滲入。（3）充分混勻接種標(biāo)本后的培養(yǎng)基，取100μl加入反應(yīng)板的各孔中，G－孔除外。（4）各滴加無菌礦物油2滴，蓋上反應(yīng)板蓋，置35～37℃培養(yǎng)箱中，在24～48h分別觀察結(jié)果。（5）結(jié)果判斷：黃色→陰性（－）；清晰透明紅色→陽性（＋）；混濁紅色→污染。G－（空白孔）應(yīng)為陰性，若陽性，表示污染，試驗(yàn)無效；G＋（對(duì)照孔）若為陽性，說明有支原體生長(zhǎng)，若Uu孔陽性而Mh孔陰性，則為解脲脲原體（Uu）；若 Mh孔陽性而Uu孔陰性，則為人型支原體（Mh）；若Uu及 Mh孔同為陽性，則為兩種支原體混合感染。每種抗生素設(shè)高、低兩個(gè)濃度。

1.5 培養(yǎng)檢出率 106例中，Uu檢出41例，占38.7%，Uu合并Mh 2例，占1.9%，單獨(dú) Mh未檢出。

2 藥敏試驗(yàn)

結(jié)果見表1。

表1 43株Uu陽性標(biāo)本藥敏試驗(yàn)結(jié)果〔株（%）〕

3 討論

3.1 藥敏結(jié)果分析

3.1.1 耐藥率分析：試驗(yàn)結(jié)果顯示，耐藥率最高的是紅霉素（69.8%），其次為環(huán)丙沙星（67.4%），氧氟沙星（58.1%），司巴沙星（48.8%），阿奇霉素（46.5%），克拉霉素（41.9%），羅紅霉素（39.5%），左氧沙星（32.6%），四環(huán)素（6.9%），美滿霉素（4.7%），交沙霉素與強(qiáng)力霉素耐藥率最低（2.3%）。

3.1.2 中敏率分析：藥敏結(jié)果顯示，喹諾酮類藥物中敏率較高，如氧氟沙星（39.5%），環(huán)丙沙星（30.2%），且此類藥物耐藥率偏高，因此總有效率與相關(guān)報(bào)道達(dá)81%相比，低了很多。

3.1.3 敏感率分析：強(qiáng)力霉素敏感率（97.7%），美滿霉素敏感率（95.3%），交沙霉素與四環(huán)素敏感率（88.4%），阿奇霉素（51.2%），克拉霉素（46.5%）。由此可見，強(qiáng)力霉素、美滿霉素可在臨床上作為治療 Uu感染的首選藥物，四環(huán)素、交沙霉素可作為次選藥物［1］。

3.2 藥敏結(jié)果討論

3.2.1 有報(bào)導(dǎo)約16.5%解脲脲原體對(duì)四環(huán)素耐藥，本次統(tǒng)計(jì)占6.9%；而對(duì)紅霉素耐藥高達(dá)69.8%，與報(bào)道中（18.7%）的耐藥率［2］，有一定的差別。

3.2.2 喹諾酮類藥物由于具有抗菌譜廣、口服吸收好、使用方便等優(yōu)點(diǎn)，成為臨床使用最廣泛的抗菌藥物之一，也是治療腸道感染的首選藥物，此類藥物的廣泛使用和濫用，是導(dǎo)致耐藥率增加的原因［3］。同時(shí)大環(huán)內(nèi)酯類藥物，如羅紅霉素、阿奇霉素、克拉霉素，在治療支原體感染中，也在廣泛使用，因此耐藥率也偏高。

3.2.3 以上檢測(cè)結(jié)果，可能與當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)不發(fā)達(dá)，醫(yī)療水平不夠高，藥品品種單一有一定關(guān)系。另外，也與當(dāng)?shù)蒯t(yī)生用藥習(xí)慣和經(jīng)驗(yàn)有關(guān)。在當(dāng)?shù)剜Z酮類藥物，如氧氟沙星、左氧沙星、環(huán)丙沙星作為治療婦科疾病及泌尿系感染的常用藥物。在治療過程中，多選擇病人經(jīng)濟(jì)可以承受的且價(jià)廉的藥品。更有甚者，由于利益的驅(qū)使，專一用高價(jià)藥，四環(huán)素基本不用。此外，由于醫(yī)療條件的限制，許多基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)無法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，醫(yī)生憑經(jīng)驗(yàn)用藥，從而導(dǎo)致耐藥率增加。

3.2.4 由于檢驗(yàn)試劑日益方便、實(shí)用，對(duì)支原體的分離培養(yǎng)不再困難，因此，基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)也應(yīng)盡量做到及時(shí)培養(yǎng)分離鑒定，根據(jù)藥敏結(jié)果調(diào)整臨床用藥，以更好地達(dá)到臨床治療效果，減少耐藥菌株的產(chǎn)生。

3.2.5 由于試驗(yàn)所采用的標(biāo)本數(shù)量不夠多，難免會(huì)使分析數(shù)據(jù)不夠完善，今后會(huì)繼續(xù)關(guān)注相關(guān)事宜。

［1］ 褚云卓，年華，賈桂英，等.解脲脲原體藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析〔J〕.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2000，23：43.

［2］ 徐勇，張曉飛.968例泌尿生殖道支原體培養(yǎng)及藥敏結(jié)果分析〔J〕.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2011，26（1）：65－66.

［3］ 周鐵麗，周明明，費(fèi)靜嫻，等.住院患者腸道大腸埃希菌質(zhì)粒介導(dǎo)喹諾酮類耐藥基因研究〔J〕.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，33（2）：160－162.