叢洪財(cái)

(白山市中心醫(yī)院,吉林 白山 134300)

沙門(mén)菌,也叫沙門(mén)氏桿菌,為一大類(lèi)寄生于人和動(dòng)物腸道內(nèi)的生化反應(yīng)和抗原構(gòu)造相似的革蘭陰性桿菌。人一旦進(jìn)食了感染沙門(mén)菌的食物,4～24min就開(kāi)始惡心、嘔吐,繼而出現(xiàn)腹痛、腹瀉、發(fā)熱等,大便呈水樣,嚴(yán)重時(shí)還會(huì)脫水、休克。除實(shí)施針對(duì)電解質(zhì)紊亂的治療外,喝一些生理鹽水可防脫水[1]。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2008年7月—2010年7月我院接收的疑為沙門(mén)菌的腸熱癥患者95例,男30例,女65例,年齡22～48歲,平均34.1歲。

1.2 方法

95例患者分為兩組,一組為全面生化反應(yīng)和血清學(xué)檢驗(yàn)組,50例;一組為常規(guī)檢驗(yàn)組,45例。

1.3 全面生化反應(yīng)和血清學(xué)檢驗(yàn)

1.3.1 樣本采集

根據(jù)疾病的類(lèi)型、病情和病程的不同采取不同的樣本。

(1)采集血液或骨髓液:腸熱癥病人,在病程的第1～2周內(nèi)采集靜脈血,在1～3周內(nèi)不采集骨髓液。

(2)采集糞便和尿液:腸熱癥病人在病程的第2周以后;胃腸炎病人在急性期、早期采集新鮮糞便,最好在用藥前采集;帶菌者可用直腸拭子采集直腸表面粘膜。在病程的第2周,腸熱癥病人亦可采集中斷尿或無(wú)菌導(dǎo)尿,經(jīng)3000 r/min離心沉淀后供檢驗(yàn)用。

(3)采集嘔吐物或食物等:疑為沙門(mén)菌食物中毒的病人,除采集糞便外,還應(yīng)采集嘔吐物和可疑食物樣本,新鮮肉類(lèi)用無(wú)菌剪刀采取,于無(wú)菌器皿內(nèi)送檢[2]。

1.3.2 設(shè)備和材料

天平,均質(zhì)器或乳缽,溫箱(36℃±1℃,42℃),顯微鏡,滅菌廣口瓶(500mL,250mL),滅菌吸管(10mL)滅菌平皿(90mm ×15mm),滅菌小試管(內(nèi)徑3mm,長(zhǎng)5cm),滅菌毛細(xì)管,橡皮乳頭,載玻片,酒精燈,滅菌金屬匙或玻璃棒,接種棒和鎳鉻絲,試架和試管簍。

1.3.3 培養(yǎng)基和試劑

(1)所用培養(yǎng)基和配制:緩沖蛋白胨水(BP):氯化鎂孔雀綠(MM)增菌液;四硫酸鈉煌綠(TTB)增菌液;亞硒酸鹽胱氨酸(SC)增菌液;亞硫酸鉍瓊脂(BS);膽鹽硫乳(DHL)瓊脂;HE瓊脂;WS瓊脂;SS瓊脂三糖鐵(TSI)瓊脂;蛋白胨水、靛基質(zhì)試劑;尿素瓊脂(pH7.2);氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基;氨基酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基;糖發(fā)酵管;“2.3.25”O(jiān)NPG培養(yǎng)基;半固體瓊脂;丙二酸鹽培養(yǎng)基“2.3.20”。

(2)沙門(mén)菌因子血清:按照26種用于初步分型,57種用于進(jìn)一步分型,163種用于詳細(xì)分型進(jìn)行選用[3]。

1.3.4 最后鑒定方法

主要依賴全面生化反應(yīng)和血清學(xué)兩方面的鑒定。

(1)血清學(xué)鑒定:先做A～F多價(jià)O血清的凝集(95%以上的沙門(mén)菌都屬于A～F群),然后以6個(gè)O群的因子血清定群(O2凝集為A群;O4凝集為B群;O7凝集為C1亞群;O8凝集C2亞群;O9凝集為D群;O10凝集為E群;O11凝集為F群。再用H因子血清第一相和第二相凝集結(jié)果綜合決定其所屬的血清型。

(2)全面生化反應(yīng):①?gòu)倪x擇性瓊脂平板上直接挑取數(shù)個(gè)可疑菌落,分別接種TSI瓊脂。在 TSI瓊脂內(nèi),腸桿菌科屬種的反應(yīng)結(jié)果。在TSI瓊脂內(nèi)只有斜面產(chǎn)酸又同時(shí)硫化氫陰性的菌株可以排除,其他的反應(yīng)結(jié)果均有沙門(mén)菌的可能,但同時(shí)也均有不是沙門(mén)菌的可能;②在接種TSI瓊脂抽時(shí),再接種蛋白胨水(作靛基質(zhì)試驗(yàn)用)、尿素瓊脂(pH7.2)、KCN培養(yǎng)基和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基及對(duì)照培養(yǎng)基各1管,在(36±1)℃培養(yǎng)18～24h,必要時(shí)可延長(zhǎng)至48h,并判定結(jié)果。

2 結(jié)果

如表1所示。

表1 檢測(cè)結(jié)果

3 討論

從表1可以看出,50例全面生化反應(yīng)和血清學(xué)檢驗(yàn)組,檢驗(yàn)有效49例,檢驗(yàn)無(wú)效1例,有效率98.00%。45例常規(guī)檢驗(yàn)組,檢驗(yàn)有效35例,檢驗(yàn)無(wú)效10例,有效率77.78%?？梢?jiàn),全面生化反應(yīng)和血清學(xué)檢驗(yàn)在沙門(mén)菌疾病中的應(yīng)用效果良好。

沙門(mén)菌所致疾病:①腸熱癥(傷寒和副傷寒):由傷寒沙門(mén)菌、甲、乙、丙型副傷寒沙門(mén)菌引起;②食物中毒(急性胃腸炎):由鼠傷寒沙門(mén)菌、豬霍亂沙門(mén)菌、腸炎沙門(mén)菌引起,有發(fā)熱、惡心嘔吐、水樣瀉,嚴(yán)重者致脫水、休克、腎衰而死亡(主見(jiàn)于嬰兒、老人等),但大多2～3天自愈:③敗血癥:常由豬霍亂沙門(mén)菌、丙型副傷寒沙門(mén)菌、鼠傷寒沙門(mén)菌、腸炎沙門(mén)菌等引起,高熱、寒戰(zhàn)、貧血等嚴(yán)重癥狀,多見(jiàn)于兒童及免疫力低下者。

需要引起我們注意的是:沙門(mén)菌是腸道重要的致病菌,我們?cè)谂R床檢測(cè)時(shí)應(yīng)特別注意陽(yáng)性對(duì)照菌和分離菌可能對(duì)操作環(huán)境的污染。凡是用過(guò)的所有增菌、分離、生化試驗(yàn)、血清凝集試驗(yàn)的器物以及鏡檢后的玻片等,均應(yīng)滅菌后方能洗滌。

[1]康艷蓉,袁文英,林青,等.兩種培養(yǎng)基的沙門(mén)菌檢出率比較[J].上海預(yù)防醫(yī)學(xué),2010(07):385-386.

[2]王小紅,龔成林.一起乙型副傷寒沙門(mén)菌引起的食物中毒[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2010(06):15-36.

[3]侯冬蓮,石誼聯(lián),蘇娟.阿維菌素中毒2例報(bào)告[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2010(16):195-196.