姜義寶，楊玉榮，王成章，崔國文

(1.河南農業(yè)大學牧醫(yī)工程學院，河南 鄭州 450002；2.東北農業(yè)大學動物科學技術學院，黑龍江 哈爾濱 150030)

飼料中抗生素和激素類添加劑的應用可謂雙刃劍，既達到促進動物生長，改善畜產品品質的效果，同時也對人類的健康及環(huán)境構成威脅。尋求綠色飼料添加劑，越來越受到人們的關注。已有研究發(fā)現(xiàn)異黃酮具有促生長，改善畜產品品質，并且毒性遠低于雌二醇[1-2]的特性，是一種在畜牧業(yè)生產上具有廣闊應用前景的飼料添加劑。此外，紅車軸草(Trifoliumpratense)為豆科三葉草屬的多年生草本植物，南北均有種植，資源豐富，是集草、藥兼用于一體的優(yōu)良植物[3]，其含有黃酮類、異黃酮類、黃酮醇類、香豆素和酚羧酸類化合物等成分[4]，深度開發(fā)及加工增值潛力大，且紅車軸草中異黃酮含量占干質量的1%，是大豆(Glycinemax)籽粒中異黃酮含量的10倍，它是少數(shù)幾種含4種異黃酮(植物雌激素)的植物之一[5]。紅車軸草異黃酮已成為一種保健食品和醫(yī)藥品原料，是繼大豆異黃酮之后備受國內外關注的一種植物雌激素，但紅車軸草異黃酮的應用研究還主要集中在人類疾病的預防與治療和抗氧化方面[6-7]，在畜禽生產方面研究的較少。本試驗以紅車軸草異黃酮為原料，研究其對肉雞生長、屠宰性能和肉品質的影響，以期為其在畜禽生產上的應用提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1試驗動物及試驗設計 選用1日齡雄性AA肉仔雞180羽，隨機分為3組，對照組、試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組，每組4個重復，每個重復15只雞，自由采食、飲水、消毒，防疫按常規(guī)程序進行。

1.2紅車軸草異黃酮 紅車軸草異黃酮購于湖南現(xiàn)代九匯有限公司，總黃酮含量80.64%(HPLC)，其中芒柄花素(formononetin)72.80%、鷹嘴豆芽素A(Bbiochanin A)7.04%、黃豆苷元(daidzein)0.23%、染料木黃酮(genistein)0.19%。

1.3試驗日糧 參照肉雞飼養(yǎng)標準[8]，配制不同階段日糧，基礎日糧組成見表1，對照組飼喂基礎日糧，試驗Ⅰ組飼喂基礎日糧+紅車軸草異黃酮(10 mg/kg)，試驗Ⅱ組飼喂基礎日糧+紅車軸草異黃酮(20 mg/kg)，試驗從1日齡開始，49日齡結束。

1.4測量指標與方法

1.4.1生長性能 每周末空腹12 h稱量各組肉雞，記錄各組雞采食量和剩料量，計算平均日采食量、日增體質量和料重比，并且每天記錄雞發(fā)病和死亡情況。

1.4.2屠宰性能 飼養(yǎng)結束時雞空腹12 h，每組取2只稱量后進行屠宰，測定屠宰率、全凈膛率和半凈膛率，分離胸肌、腿肌和腹脂，計算胸肌率、腿肌率和腹脂率。

表1 基礎日糧組成及其營養(yǎng)水平

1.4.3血脂的測量 屠宰時雞翅靜脈取血樣，分離血清后用全自動生化分析儀測定血清中總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)和甘油三酯(TG)。

1.4.4肉品丙二醛(MDA)的測量 測定4 ℃下冷藏0、2、4、6和8 d后胸肌MDA含量，采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定。

1.4.5肉品質的測量 pH值：屠宰后取胸肌，用PHS-3C酸度計測量45 min pH值和24 h pH值；滴水損失：采用吊袋法將胸肌在4 ℃冰箱懸掛保存48 h后稱量測量；肌肉嫩度：將胸肌肉樣置于C-LM3型嫩度儀上進行剪切，測定剪切肉樣所需的力值，以N表示。

1.5統(tǒng)計分析 采用DPS 7.05軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，以P<0.05為差異顯著，試驗結果以平均值±標準偏差(Mean±SD)表示。

2 結果與分析

2.1紅車軸草異黃酮對肉雞生長性能的影響 日糧中添加紅車軸草異黃酮對肉雞生長有較大影響(表2)，試驗Ⅰ組和Ⅱ組的平均日增體質量分別比對照組顯著提高4.27%(P<0.01)和6.48%(P<0.01)，料重比試驗Ⅰ組和Ⅱ組低于對照組，但差異不顯著(P>0.05)。試驗組日采食量與對照組相比無顯著差異(P>0.05)。試驗組間比較，除日增體質量試驗Ⅱ組顯著高于試驗Ⅰ組外(P<0.05)，其余指標差異不顯著(P>0.05)，說明添加量紅車軸草異黃酮對肉雞的生長有促進作用。

2.2紅車軸草異黃酮對肉雞屠宰性能的影響 與對照組相比，日糧中添加紅車軸草異黃酮對肉雞的屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率均有所提高(表2)，但差異不顯著(P>0.05)，試驗Ⅰ組和Ⅱ組間差異也不顯著(P>0.05)。試驗Ⅰ組和Ⅱ組與對照組相比，腹脂率降低2.45%(P>0.05)和13.47%(P<0.05)，說明紅車軸草異黃酮能夠提高肉雞的屠宰性能。

2.3紅車軸草異黃酮對肉雞血脂的影響 日糧中添加紅車軸草異黃酮顯著降低了肉雞血清TG和 TC(P<0.05)，對HDL無明顯影響(P>0.05)，試驗Ⅰ組和Ⅱ組LDL均低于對照組，但各試驗組間差異不顯著(P>0.05) (表3)，說明紅車軸草異黃酮能夠調節(jié)肉雞血清中膽固醇代謝。

2.4紅車軸草異黃酮對肉品質的影響 試驗Ⅰ組和Ⅱ組滴水損失分別比對照組低8.35%和2.99%，剪切力分別比對照組低9.47%和4.27%，但差異均不顯著(P>0.05)；胸肌的45 min pH值和24 h pH值，試驗組和對照組間均無明顯差異(P>0.05) (表3)。

2.5紅車軸草異黃酮對雞肉丙二醛含量的影響 在4 ℃冷藏條件下，各組丙二醛含量隨著時間的延長逐漸升高，試驗組始終低于對照組，在0、2、4、8 d各組間差異不顯著(P>0.05)，在6 d試驗Ⅰ組和Ⅱ組均低于對照組，并且試驗Ⅱ組明顯低于對照組(P<0.05)(表3)。

表2 紅車軸草異黃酮對肉雞生長和屠宰性能的影響

表3 紅車軸草異黃酮對血脂、肉品質和胸肌MDA含量的影響

3 討論

3.1紅車軸草異黃酮對生長性能的影響 紅車軸草異黃酮具有植物雌激素的作用，動物攝食后被胃腸道代謝，并通過與下丘腦和垂體雌二醇受體結合而干擾雌二醇的反饋調節(jié)，從而在細胞水平與內源雌激素競爭雌激素受體，影響下丘腦和垂體的神經(jīng)內分泌性腺軸和生長軸，使睪酮和生長激素等生成釋放增加，進而加速蛋白質合成，促進肌肉生長[9]。謝棒祥等[10]研究表明，肉雞日糧中添加大豆異黃酮和山楂(Crataeguspinnatifida)葉總黃酮，可以顯著改善其4～6周的生長性能，本試驗添加紅車軸草異黃酮亦提高了肉雞日增體質量，降低了料重比，這與王國杰和韓正康[11]、朱宇旌等[12]的研究結果一致；試驗組提高了肉雞的胸肌質量和腿肌質量，進一步表明紅車軸草異黃酮能夠促進蛋白質合成與肌肉生長。

3.2紅車軸草異黃酮對屠宰性能和血脂的影響 脂肪沉積及代謝是一個復雜的生理生化過程，受飲食、內分泌、神經(jīng)及脂肪組織自身等多因素的調控，大量研究表明，異黃酮對動物和人類的脂肪代謝具有調節(jié)作用[13]。沙棘(Hippophaerhamnoides)黃酮提高了肉雞血清中高、低密度脂蛋白和游離脂肪酸含量，降低了肉雞血清中甘油三酯和總膽固醇的含量[14]，大豆黃酮具有降低肉雞脂肪沉積的作用[15]，試驗中添加兩種不同劑量的紅車軸草異黃酮提高了肉雞的屠宰率，降低了腹脂率，顯著降低了總膽固醇和甘油三酯，對高密度脂蛋白和低密度脂蛋白無顯著影響。幸奠霞等[16]研究表明，刺芒柄花素能夠有效降低高脂血癥大鼠的膽固醇含量。這可能由于植物雌激素能夠與雌激素受體結合，上調肝臟低密度脂蛋白受體的表達，直接抑制膽固醇合成限速酶——羥甲基戊二酸單酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶[17-18]，影響脂肪合成與分解的速率，達到對脂肪沉積的調節(jié)作用。紅車軸草異黃酮使肉雞高密度脂蛋白相對穩(wěn)定，由于維持一定的血漿高密度脂蛋白，有助于體內血脂代謝和轉運，維持血漿脂蛋白濃度的穩(wěn)定，使肉雞腹脂率降低。

3.3紅車軸草異黃酮對肉品丙二醛含量的影響 機體的脂質氧化與肉品質量有密切的關系。Hasret[19]的研究表明，肉品在儲存期間，不飽和脂肪酸在自由基攻擊下導致脂質過氧化，生成丙二醛，是肉品脂質過氧化程度直觀的定量化指標，與肉品感觀性狀質量和貨架壽命顯著相關。本試驗中日糧中添加紅車軸草異黃酮降低了肉品組織儲存期間丙二醛的積累，減輕脂質過氧化水平，從而延長了貨架期。紅車軸草異黃酮具有較強的抗氧化功能，能提高機體內超氧化物歧化酶等抗氧化酶的活性，清除機體內的活性氧自由基，這與紅車軸草異黃酮類化合物含多酚結構有關[20]。

3.4紅車軸草異黃酮對肌肉品質的影響 系水力是一種重要的肉質性狀，它可影響到肉的多汁性、嫩度、營養(yǎng)成分和色澤等食用品質，通常用失水率或滴水損失來衡量肉的系水力。嫩度的高低一般用剪切力來表示，剪切力值越大，肌肉嫩度越小，反之則嫩度越大[21]，試驗中肉雞日糧中添加紅車軸草異黃酮10和20 mg/kg降低了胸肌滴水損失和胸腿肌的剪切力，提高了肌肉的嫩度。肉品pH值是反映宰殺后動物體肌糖原酵解速率的重要指標，肉類保持較高pH值可以延長商品的貨架期[22]，本試驗中肉雞日糧中添加紅車軸草異黃酮10 mg/kg胸肌在試驗各時間段pH值均高于對照組，表明添加適宜濃度的紅車軸草異黃酮能夠延長雞肉的儲藏期。

4 結論

本試驗在飼料中添加10和20 mg/kg紅車軸草異黃酮可提高肉雞生長速度和屠宰性能，改善了肉品的品質。并且在添加20 mg/kg時肉雞日增長速度最快，能明顯降低腹脂率，延長雞肉的儲藏時間，紅車軸草異黃酮作為肉雞飼料添加劑，具有一定的應用潛力。本試驗只是對其在雞飼料中添加做了初步探討，紅車軸草異黃酮在生產上的諸多用途和作用機制還有待于進一步研究。

[1]張響英,王根林.植物雌激素的免疫調節(jié)作用[J].畜牧與獸醫(yī),2000,32(3):40-42.

[2]洪文杰,倪迎冬,楊曉靜,等.孵化早期蛋內注射大豆黃酮對仔雞生長與血液指標的影響[J].江蘇農業(yè)科學,2007(5):129-132.

[3]王元生,李發(fā)弟,郝正里,等.岷山紅車軸草異黃酮對產蛋后期母雞生產性能、骨礦化及血液指標的影響[J].草業(yè)學報,2010,19(2):133-139.

[4]陳學福,史高峰.紅車軸草異黃酮的研究進展[J].中草藥,2006,37(2):309-312.

[5]孟祥君,俞聯(lián)平,程文定,等.接種根瘤菌與施肥對岷山紅三葉異黃酮含量的影響[J].草業(yè)科學,2010,27(5):97-100.

[6]朱宇旌,任慧玲,張勇,等.紅三葉異黃酮提取物對小鼠抗氧化功能的影響[J].沈陽農業(yè)大學學報,2010,41(1):102-105.

[7]陳美元,嚴書超,尹春萍,等.紅三葉總異黃酮對人增生前列腺組織基質細胞增殖和凋亡的影響[J].中華男科學雜志,2010,16(1):34-39.

[8]文杰，劉國華，熊本海，等.NY/T 33-2004 雞飼養(yǎng)標準[S].北京：中國農業(yè)出版社,2004.

[9]韓正康.異黃酮植物雌激素對雌性動物生殖、泌乳和產蛋的影響及其作用機制探討[J].畜牧與獸醫(yī),2005,37(6):1-3.

[10]謝棒祥,張敏紅,杜榮,等.類黃酮對肉仔雞生產性能及脂質代謝的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2002,14(4):49-53.

[11]王國杰,韓正康.紅車軸草總異黃酮對小公雞生長及血清辜酮水平的影響[J].動物學研究,1994,15(3)：65-69.

[12]朱宇旌,田書音,曹敏健,等.紅三葉異黃酮對肉雞生長性能的影響[J].沈陽農業(yè)大學學報,2009,40(6)：693-697.

[13]李寶蘭,張詠梅,盧小康,等.苜?？傸S酮對小鼠脂類代謝及氧自由基的影響[J].草業(yè)科學,2009,26(8):93-96.

[14]李垚,付晶,王寶東,等.沙棘黃酮對AA肉仔雞胴體和肉品質的影響[J].畜牧獸醫(yī)學報,2008,39(9):1217-1223.

[15]劉皙潔,張桂春,張維生.半胱胺、大豆黃酮對肉仔雞脂肪代謝的影響[J].東北農業(yè)大學學報,2003,34(2):171-175.

[16]幸奠霞,劉志高,薛存寬,等.刺芒柄花素雌激素樣作用及其與血脂相關性研究[J].中國老年學雜志,2009,29:2340-2342.

[17]Asakura L,Cazita P M,Harada L M,etal.Soy protein containing isoflavones favorably influences macrophage lipoprotein metabolism but not the development of atherosclerosis in CETP transgenic mice [J].Lipids,2006,41(7):655-662.

[18]Yi P,Driscoll M D,Huang J,etal.The effects of estrogen-responsive element- and ligand-induced structural changes on the recruitment of cofactors and transcriptional responses by ER alpha and ER beta[J].Molecular Endocrinology,2002,16(4):674-693.

[19]Hasret U.Evaluation of three 2-thiobarbitaric acid methods for the measurement of lipid oxidation in various meats and meat products [J].Meat Science,2004,67(4):683-687.

[20]劉寶劍,郭延生,刁鵬飛,等.紅車軸草總黃酮體外清除自由基作用的研究[J].天然產物研究與開發(fā),2009,21(1):44-47.

[21]李同樹,劉風民,尹遜河,等.雞肉嫩度評定方法及其指標間的相關分析[J].畜牧獸醫(yī)學報，2004，35(2):171-177.

[22]Yang C C,Chen T C.Effect of refrigerated storage pH adjustment and marinade on color of raw and microwave cooked chicken meat [J].Poultry Science,1993,75:355-362.