王明利

寧波市第六醫(yī)院，浙江寧波315040

LH500血細(xì)胞分析儀故障檢修

王明利

寧波市第六醫(yī)院，浙江寧波315040

對(duì)LH500血細(xì)胞分析儀常見(jiàn)故障，如氣源、進(jìn)樣、計(jì)數(shù)、HGB與分類(lèi)等，從原理與工作流程方面進(jìn)行闡述。同時(shí)分析了故障原因與排除方法，總結(jié)檢修思路與經(jīng)驗(yàn)，供同行分享。

LH500分析儀，故障檢修，血液學(xué)，血細(xì)胞

1 氣源故障

Low vaccum out of range/High vaccum out of range報(bào)警

1．1 工作原理

LH500供氣系統(tǒng)核心是一個(gè)能提供正負(fù)壓氣源的活塞泵。將60psi的正壓調(diào)制為30psi的壓力作為系統(tǒng)工作的動(dòng)力，用于調(diào)制分類(lèi)用的6psi樣品壓和鞘壓，為打開(kāi)壓管閥，計(jì)數(shù)池混勻氣泡，各類(lèi)隔膜泵推注液體，活塞泵工作，自動(dòng)吸樣針穿刺以及排廢液提供動(dòng)力。它所提供的高負(fù)壓通過(guò)負(fù)壓杯VC6給各類(lèi)隔膜泵抽取液體提供動(dòng)力，通過(guò)RG1調(diào)制小孔計(jì)數(shù)用的低負(fù)壓。這些氣壓均由氣路監(jiān)測(cè)板PMC監(jiān)控，一旦壓力不正常，就會(huì)報(bào)錯(cuò)誤信息，真空分布見(jiàn)參考文獻(xiàn)［1］。

1．2 分析與對(duì)策

低負(fù)壓超范圍為多發(fā)的氣路故障，原因是低負(fù)壓調(diào)節(jié)回路空氣阻力大，輕微的調(diào)節(jié)可以用RG1閥旋鈕，順時(shí)針轉(zhuǎn)增加負(fù)壓，逆時(shí)針轉(zhuǎn)減少負(fù)壓。負(fù)壓數(shù)值可以切換到儀器計(jì)算機(jī)DOS界面，選擇Special function－Diagnostics－Opertator options－System test回車(chē)，將Low vaccum range調(diào)整到參考值的中值。如遇調(diào)節(jié)不穩(wěn)定或失靈，則需要清洗調(diào)節(jié)閥RG1。清洗方法:準(zhǔn)備少量蒸餾水，拔脫調(diào)節(jié)閥的1腳讓水吸入，如量較多的話，這時(shí)機(jī)器報(bào)警High vaccum out of range，不用擔(dān)心，是吸入的水到了負(fù)壓捕水杯FL1，造成杯內(nèi)浮子開(kāi)關(guān)上浮頂住了負(fù)壓入口，防止水進(jìn)入氣泵，避免損壞氣泵?？吹竭@個(gè)報(bào)警，只需打開(kāi)儀器右側(cè)門(mén)，找到捕水杯，旋下杯體倒空污水，拉下浮子，將操作過(guò)的部位復(fù)原，故障即時(shí)排除。

2 進(jìn)樣故障

手動(dòng)模式檢測(cè)參數(shù)結(jié)果與空白本底接近，白細(xì)胞池沒(méi)有血樣進(jìn)入;自動(dòng)模式試管架突然停頓，Incomplete Needle Pierce報(bào)警。

2．1 工作流程

LH500有自動(dòng)、手動(dòng)兩種進(jìn)樣模式，樣本從采樣針進(jìn)入，通過(guò)分血閥BSV分配到紅細(xì)胞池，白細(xì)胞池，混勻池。

2．1．1 手動(dòng)進(jìn)樣過(guò)程

按下手動(dòng)進(jìn)樣開(kāi)關(guān)，電磁閥S26打開(kāi)，壓管閥PV25/26開(kāi)啟，吸樣通道開(kāi)放，PM5泵在負(fù)壓作用下吸取125μl樣本從吸樣針通過(guò)分血閥后從12口止于后血傳感器出口。

2．1．2 自動(dòng)進(jìn)樣過(guò)程

試管架在搖床上混勻，當(dāng)傳感器感應(yīng)到試管時(shí)，試管架停止向前，待搖勻后搖床處于穿刺位置，試管撞擊器向前頂，改變?cè)嚬芗芮耙苽鞲衅鞯臓顟B(tài)，同時(shí)進(jìn)行穿刺采樣，此時(shí)電磁閥S25打開(kāi)，壓管閥PV23/24開(kāi)啟，吸樣通道開(kāi)放，PM4在負(fù)壓作用下吸取185μl樣本，由前血傳感器到分血閥3口進(jìn)入，通過(guò)分血閥后從12口止于后血傳感器出口。吸樣結(jié)束，試管撞擊器復(fù)位，試管架前移傳感器隨之復(fù)位，試管前移搖動(dòng)等待下個(gè)樣本穿刺，周而復(fù)始直至試管傳感器沒(méi)有感應(yīng)試管為止，快速前移移除試管架。

2．2 分析與對(duì)策

①排除采樣針、分血閥堵塞，用注射器從12口反沖蒸餾水，采樣針出水順暢，進(jìn)而檢查PV25/26動(dòng)作狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)沒(méi)動(dòng)作說(shuō)明S26有問(wèn)題，查看電磁閥發(fā)現(xiàn)其電源接頭有結(jié)晶，清理結(jié)晶物重新拔插，做樣本，吸樣正常故障排除。

②進(jìn)入儀器DOS界面，按Ctrl+C組合鍵清空試管架，選擇Special function－Diagnostics－Operator options－Autoloader tests觀察搖床各部件動(dòng)作情況，發(fā)現(xiàn)試管架停頓時(shí)，試管撞擊器已復(fù)位，說(shuō)明前移傳感器狀態(tài)沒(méi)有復(fù)位，檢查傳感器發(fā)現(xiàn)其光路被結(jié)晶物擋住，以致機(jī)器誤認(rèn)為穿刺不完全。松脫傳感器遮擋翹板彈簧，拆下定位螺絲，取出翹板，用棉簽蘸清水清潔翹板及其位置周邊的結(jié)晶物及血跡，確保翹板活動(dòng)輕巧到位，復(fù)位做Autoloader tests工作正常故障排除。

3 計(jì)數(shù)故障

3 consecutive vote outs報(bào)警，相關(guān)參數(shù)結(jié)果“——”;RBC/PLT、WBC檢測(cè)結(jié)果重復(fù)性不好。

3．1 工作流程

RBC/PLT計(jì)數(shù)過(guò)程是S35電磁閥打開(kāi)，開(kāi)啟壓管閥PV30，PM11泵在正壓作用下將10ml稀釋液推注到分血閥4口，從14口推著1．6μl的血樣進(jìn)入到RBC池中進(jìn)行稀釋?zhuān)瑲馀莼靹?，S2電磁閥打開(kāi)，PV2、PV68壓管閥開(kāi)啟負(fù)壓通道開(kāi)放，計(jì)數(shù)小孔在低負(fù)壓作用下，讓細(xì)胞依次通過(guò)小孔，同時(shí)掃流管將通過(guò)小孔的細(xì)胞帶離，防止細(xì)胞回流干擾計(jì)數(shù)。

WBC計(jì)數(shù)過(guò)程是S35電磁閥打開(kāi)，開(kāi)啟壓管閥PV30，PM9泵在正壓作用下將6ml稀釋液推注到分血閥7口，從9口推著28μl的血樣進(jìn)入到WBC池，其間S4電池閥打開(kāi)，PV7壓管閥開(kāi)啟，PM1、PM2泵將CBC溶血?jiǎng)┎迦?，一起在WBC池中由氣泡混勻，S2電磁閥打開(kāi)，PV2、PV68壓管閥開(kāi)啟負(fù)壓通道開(kāi)放，細(xì)胞在低負(fù)壓吸引下通過(guò)小孔來(lái)實(shí)現(xiàn)計(jì)數(shù)。

3．2 分析與對(duì)策

計(jì)數(shù)結(jié)果不理想的原因是樣本稀釋、小孔狀態(tài)，RBC要增加掃流通路，WBC要增加溶血?jiǎng)┩窢顟B(tài)以及廢液排除等情況。對(duì)此類(lèi)問(wèn)題，首先觀察計(jì)數(shù)池的液面，正常情況計(jì)數(shù)池液面總是要高于小孔的位置，不同的是沖洗階段RBC池低WBC池高，計(jì)數(shù)階段相反，RBC池高WBC低。如有異常，則觀察分血閥是否到位，液體流速是否順暢，無(wú)恙進(jìn)而檢查相關(guān)閥、泵工作狀態(tài)。其次觀察低負(fù)壓通路是否通暢，檢查相關(guān)閥工作狀態(tài)。最后檢查電信號(hào)部分，如電極接地情況，前置放大板，信號(hào)處理板等。LH500儀器電腦提供了一套完整的軟件診斷工具，有了它的輔助不僅能夠快速有效地判斷故障節(jié)點(diǎn)，而且能執(zhí)行疏通小孔清潔管路等日常維護(hù)工作。進(jìn)入儀器電腦界面，Sample Analysis菜單Rinse沖洗管路、Disinfect消毒計(jì)數(shù)孔及流動(dòng)池Flowcell、Purge清洗流動(dòng)池，都是維護(hù)液路好工具;Special Functions/Diagnostics/Operator Options選項(xiàng)下Fluidic Tests液路測(cè)試、BSV Tests分血閥測(cè)試、System Tests系統(tǒng)測(cè)試、Solenoid Tests電磁閥測(cè)試、Autoloader Cycles自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)測(cè)試、Drain and Vent排廢都是有效的診斷測(cè)試工具，用好這些工具對(duì)維修人員來(lái)說(shuō)就是一把利器。

4 HGB故障

HGB Out of Range;HGB 結(jié)果“——”或者偏高或者偏低

4．1 原理

HGB檢測(cè)原理為CBC Lyse將白細(xì)胞池內(nèi)樣本的紅細(xì)胞膜破壞，并與其釋放的血紅蛋白結(jié)合生成氰化血紅蛋白，該物質(zhì)對(duì)525nm的光譜有特異性吸收。利用朗伯比爾定理，通過(guò)檢測(cè)空白和樣本對(duì)吸收光線強(qiáng)度的對(duì)比，就能計(jì)算出樣本血紅蛋白含量［2］。LH500用鹵素?zé)敉干?WBC池，光電傳感器將檢測(cè)到的光信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào)，傳輸?shù)椒糯笃魈幚砥鬟M(jìn)行處理計(jì)算得出結(jié)果。對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響的主要因素有:空白光強(qiáng)度和樣本濃度。

4．2 分析與對(duì)策

利用軟件診斷工具HGB Lamp Adjust進(jìn)行空白光強(qiáng)校正，校正時(shí)觀察亮度是否有變化，無(wú)變化則細(xì)查光源問(wèn)題，有變化但校正失敗則觀察WBC池比色窗是否有污物。對(duì)結(jié)果偏差的故障，要觀察WBC池液面是否正常，樣本顏色是否變清澈，檢測(cè)步驟如WBC計(jì)數(shù)問(wèn)題的排除。

5 分類(lèi)故障

分類(lèi)結(jié)果均為“:::”，分類(lèi)散點(diǎn)圖提示 PC1、PC2、FC。

5．1 原理

LH500采用VCS技術(shù)，即Volume體積、Conductivity電導(dǎo)、Scattering激光散射，進(jìn)行白細(xì)胞亞群分類(lèi)。PM6/PM7泵釋放300ul分類(lèi)溶血?jiǎng)〦lyse推動(dòng)被空氣隔離的28μl全血到混勻池中，將紅細(xì)胞脹破，白細(xì)胞脹大，然后PM12泵出133μl穩(wěn)定劑Slyse到混勻池將白細(xì)胞復(fù)原，處理后的樣本進(jìn)入流動(dòng)池，在樣本壓和鞘液壓同時(shí)的作用下，讓白細(xì)胞逐個(gè)經(jīng)過(guò)流動(dòng)池，進(jìn)行19秒或8129個(gè)白細(xì)胞VSC檢測(cè)，統(tǒng)計(jì)計(jì)算得出結(jié)果。

5．2 分析與對(duì)策

白細(xì)胞不分類(lèi)產(chǎn)生的因素有:環(huán)境溫度、樣本特殊性、機(jī)器本身。

環(huán)境溫度過(guò)低過(guò)高會(huì)導(dǎo)致紅細(xì)胞不完全破壞或者白細(xì)胞恢復(fù)不完全，需要在機(jī)房?jī)?nèi)安裝空調(diào)，將環(huán)境溫度控制在 25℃左右。有文獻(xiàn)報(bào)道［3－6］，黃疸、高血脂、孕婦、新生兒樣本由于紅細(xì)胞難以溶血，造成不分類(lèi)，需要預(yù)稀釋降濃度分類(lèi)，取百分比為結(jié)果，遇化療患者樣本，由于白細(xì)胞較少需要人工鏡檢。機(jī)器本身原因則重點(diǎn)查樣本及兩種溶血?jiǎng)┹斔屯?，PV27(S27)、PV51(S34)、PV28(S44);PV50(S56)、PV53(S59)、PV58(S59)，無(wú)恙則需清潔流動(dòng)池表面，用張白紙做背景，觀察流動(dòng)池激光聚焦情況，較少碰到需調(diào)節(jié)或維修激光系統(tǒng)，查看樣品和鞘液壓差，調(diào)節(jié)旋鈕使其保持在0．5psi。

6 總結(jié)

LH500血液分析儀是款嬌貴的設(shè)備，需要做好日常維護(hù)保養(yǎng)才能保證其工作狀態(tài)，保障醫(yī)療檢驗(yàn)質(zhì)量，遇到問(wèn)題需要我們工程技術(shù)人員根據(jù)其工作原理和流程分析可能發(fā)生故障的節(jié)點(diǎn)，細(xì)心觀察，充分利用診斷軟件的功能快速準(zhǔn)確定位故障部位，縮短儀器停機(jī)時(shí)間，為疾病診斷和治療方案順利進(jìn)行保駕護(hù)航。

［1］COULTER? LH 500，HmX，and MAXM Analytical Units service manual［M］．PN4237648A(July 2003)．Beckman Coulter，Inc．Fullerton，CA 92835．

［2］何劍云，厲磊．Beckman Coulter LH750的HGB問(wèn)題總結(jié)［J］．醫(yī)療裝備，2009，22(8):68 －69．

［3］朱紅軍，費(fèi)選文，陳書(shū)裕．黃疸因素對(duì)Coulter Maxm血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類(lèi)的影響［J］．實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2000，16(5):422－423．

［4］田桂芹，徐敬東，等．Comter AC．T 5diff血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類(lèi)異常及處理［J］．實(shí)用醫(yī)技雜志，2007，14(21):2838－2839．

［5］陳書(shū)裕，費(fèi)選文，朱紅軍，等．血漿因素對(duì)Co山ber Maxm血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類(lèi)的影響及消除方法［J］．海南醫(yī)學(xué)，2000，ll(5):275 －276．

［6］李芳，白潔．紅細(xì)胞膜滲透脆性降低對(duì)白細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響［J］．寧夏醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，30(4):493 －495．

Troubleshootings Hematology Analyzer of Backman－Coulter LH500

Wang Mingli
6th Ningbo Hospital，Zhejiang(Ningbo，315040)

LH500 of Backman － Coulter hematology analyzers，such as air，sampling，count，HGB and classification，elaborated from a principle and work processes．Simultaneous analysis of failure causes and troubleshooting，maintenance thought and experience summary for readers to share．

LH500，troubleshooting，hematology，hemocyte

R446．11+9

B

1674－1242(2011)03－0182－03

10．3969/j．issn．1674 －1242．2011．03．017

王明利，E －mail:luck2000x@sohu．com

2011－07－17)