王丹丹 綜述 李燕華 審校

卵巢癌(ovarian carcinoma)是女性生殖道常見的惡性腫瘤之一，盡管其發(fā)病率在女性生殖系統(tǒng)腫瘤中居第3位，死亡率卻居第1位［1］。不同期別卵巢癌預后差異很大，早期卵巢癌患者通過手術和化療其5年生存率可在90%以上，但目前能在早期獲得診斷的患者不足25%。因此，早期診斷對提高卵巢癌患者生存率尤為重要。CA125是目前公認的卵巢癌術前診斷、療效觀察、術后復發(fā)和預后評估最具價值的觀測指標，但CA125的合成受許多因素影響，如子宮內(nèi)膜異位癥，盆腔炎癥等均可見CA125不同程度地升高，有研究發(fā)現(xiàn)40% ～50%的Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌患者的血清CA125檢測值并不升高［2］，所以將CA125作為卵巢癌早期診斷唯一的指標仍有一定的局限性。近年來隨著對卵巢癌發(fā)病機制的深入研究，多種過度表達的蛋白及其受體在卵巢癌發(fā)生發(fā)展中的作用受到重視，并作為用于卵巢癌診斷的腫瘤標志物。本文就目前最新的如人附睪蛋白-4(HE4)等標志物在卵巢癌中的診斷應用進展作一綜述。

1 HE4與卵巢癌

人附睪蛋白4(HE4，又名WFDC2)基因的cDNA最早由Kirchhoff等［3］首先從附睪的上皮遠端分離出來，是1種可能與精子成熟度有關的蛋白酶抑制劑，但至今未能證實它具有蛋白抑制功能。目前已有大量實驗表明HE4在卵巢癌早期診斷中的價值明顯優(yōu)于CA125。Drapkin等［4］用免疫組織化學方法描述了HE4在不同組織類型卵巢癌中的表達，發(fā)現(xiàn)HE4在93%的卵巢漿液性癌、50%的卵巢透明細胞癌及100%卵巢子宮內(nèi)膜樣癌中高表達，而在卵巢黏液性癌及正常卵巢組織中不表達。Moore等［5］研究表明，就單一標志物而言，HE4用于診斷卵巢癌的敏感性高達72.9%、特異性達95%，而CA125的敏感性為27% ～66%，特異性為75.2%。就聯(lián)合檢測物而言，CA125聯(lián)合HE4的檢測敏感性達76.4%、特異性95%，明顯高于單項檢測HE4或CA125的敏感度。在此基礎上進一步研究了CA125再聯(lián)合其他標志物檢測，其敏感性并無明顯變化。對于Ⅰ期病變，HE4為最佳的單一標志物，聯(lián)合檢測CA125或其他標志物不能增加其敏感性。Montaqnana等［6］研究顯示卵巢癌患者血清CA125和HE4水平明顯高于正常人、卵巢良性腫塊、宮頸癌及子宮內(nèi)膜腫瘤患者，且血清HE4的敏感性和特異性高于CA125。Huhtinen等［7］研究顯示聯(lián)合檢測 HE4和 CA125血清濃度可增加卵巢癌的診斷準確率，并可從卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫中鑒別卵巢癌。Abdel-Azeez等［8］研究顯示血清HE4為單獨檢測早期卵巢癌最敏感的腫瘤標記物(早期檢出率為76.9%)。Kim等研究顯示［9］聯(lián)合檢測附件腫塊患者血清HE4和CA125水平可成功地將可能發(fā)展為卵巢癌的高風險組和低風險組患者區(qū)分開(敏感性 87.5%，特異性 93.8%)。然而 Montagnana等［10］研究顯示HE4聯(lián)合CA125對于評估盆腔腫塊發(fā)展為卵巢癌的風險并不優(yōu)于單獨檢測血清HE4。還有研究顯示［11］，在復發(fā)的卵巢癌患者中，CA125檢測的敏感度為96%，HE4的敏感度為100%，其中52%(14/27)的患者血清HE4水平上升比血清CA125的上升提前6～69周出現(xiàn)。Lamy等［12］研究也表明，在復發(fā)的卵巢癌患者中血清HE4比血清CA125提前5～8個月出現(xiàn)異常表達，HE4可作為很好的預測卵巢癌復發(fā)的指標。綜上所述，HE4作為新的卵巢癌早期診斷標志物具有較高的敏感性和特異性。

2 OPN與卵巢癌

骨橋蛋白(Osteopontin，OPN)是1種磷酸化糖蛋白，基因定位于人染色體4q21-25，由7個外顯子和6個內(nèi)含子構成，分子量為41～75 KD，OPN參與細胞外基質(zhì)的形成，是1種可分泌細胞因子［13，14］。OPN蛋白有8個α螺旋和6個β折疊的二級結構，其中含有特異性的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列(簡稱RGD序列)。近年來，較多的研究發(fā)現(xiàn)OPN與卵巢癌侵襲、轉移密切相關。Kim等［15］利用ELISA法對107例健康婦女、46例良性卵巢疾病、47例其他婦科癌癥患者以及51例上皮性卵巢癌患者進行血清OPN檢測，發(fā)現(xiàn)51例卵巢癌患者術前血清OPN水平顯著高于其他3組患者。同時還發(fā)現(xiàn)，在漿液性、黏液性、透明細胞性和內(nèi)膜樣卵巢癌患者血清中OPN的表達無顯著性差異。Meinhold Heerlein等［16］用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)發(fā)現(xiàn)卵巢癌患者血清中OPN的表達明顯增強，并可作為卵巢癌早期診斷及病情監(jiān)測及評價預后的生物標志物之一。尚有研究指出，血漿OPN升高可提示卵巢癌復發(fā)［17］。Ye等［18］發(fā)現(xiàn)早期卵巢癌患者尿液中OPN片段增加，與修飾型嗜酸細胞源性神經(jīng)毒素結合后具有93%的檢出率和72%的敏感性，可用于早期卵巢癌的非侵襲性篩查。Visintin等［19］通過ELISA分析評估362例健康婦女、156例新診斷的卵巢癌患者血清中蛋白表達水平，結果發(fā)現(xiàn)OPN與CA125聯(lián)合應用對卵巢癌的檢測敏感性達95.3%，特異性達99.4%，而單獨應用 CA125時敏感性僅為84.4%。Bao等［20］應用免疫組化法檢測了40例三期卵巢癌患者腫瘤原發(fā)灶和轉移灶的OPN水平，結果顯示其中32例患者卵巢癌轉移灶中OPN顯著增加，且這些患者預后極差。Matsuura等［21］研究顯示卵巢透明細胞癌的癌細胞侵襲能力與OPN的上升或下降有關，因此OPN處于正常水平對卵巢透明細胞癌的治療至關重要。Zhang等［22］研究顯示OPN在卵巢癌中的表達顯著高于卵巢交界性腫瘤和良性腫瘤(P＜0.05)，OPN在低分化卵巢癌中的陽性率明顯高于中、高度分化的卵巢癌(P＜0.05)，OPN的陽性率與淋巴結轉移率高(P＜0.05)有關，但與年齡和病理類型無關。Tilli等［23］研究表明，骨橋蛋白-C的剪接異構體有助于卵巢癌惡化，因此選擇性地下調(diào)OPN-C可能有助于改變卵巢腫瘤的進展，成為新的治療卵巢癌的方法。OPN作為卵巢癌轉移機制的重要參與者，可能成為與CA125互補的、有前景的、新的卵巢癌生物學標志物。

3 YKL-40與卵巢癌

甲殼質(zhì)酶蛋白40(YKL-40)是哺乳類動物甲殼酶蛋白家族的一員，最早在非泌乳期牛的乳汁分泌物中發(fā)現(xiàn)，YKL-40含383個氨基酸，編碼的蛋白序列與糖基水解酶相似［24］，位于染色體1q32，它的結構類似甲殼質(zhì)酶蛋白，被稱為甲殼質(zhì)酶蛋白40，亦稱人軟骨糖蛋白-39(HCgp-39)，其生物功能目前還不十分清楚。Johansen等［25］研究證實，YKL-40在腫瘤細胞的增生、分化、生長、侵襲和轉移、血管發(fā)生、炎癥反應以及腫瘤周圍細胞外基質(zhì)的重塑中起重要作用。Dupont等［26］對卵巢癌中YKL-40的研究發(fā)現(xiàn)卵巢癌Ⅰ期和Ⅱ期患者中65%血清YKL-40升高，Ⅲ和Ⅳ期患者中74% ～91%血清YKL-40升高，首次復發(fā)卵巢癌患者中55%血清YKL-40升高。血清YKL-40水平與腫瘤分期和腫瘤負荷有關，且血清YKL-40≥80 U者預后差，腫瘤復發(fā)率為71%，血清YKL-40對于早期卵巢癌診斷的敏感性高于CA125和CA15-3，因此認為血清YKL-40水平可作為檢測早期卵巢癌的標志物，并且血清中YKL-40水平升高與早期卵巢癌患者的復發(fā)和生存期短相關。Gronlund等［27］研究發(fā)現(xiàn)血清YKL-40水平升高增加了卵巢癌二線化療藥物耐藥性的風險，從生物學角度說明YKL-40表達增高可能與卵巢癌細胞的增殖和抗凋亡有關。有研究發(fā)現(xiàn)，65%的Ⅰ、Ⅱ期卵巢癌患者，74% ～91%的Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌患者及55%的首次復發(fā)的卵巢癌患者術前血清 YKL-40 水平明顯升高［28，29］。彭春杰等［30］研究卵巢上皮性腫瘤組織中YKL-40和CA125的表達時發(fā)現(xiàn)YKL-40和CA125表達水平隨卵巢漿液性腫瘤惡性程度的增加而表達增高。Yang等［31］應用免疫組化法檢測86例卵巢上皮性癌和20例正常卵巢組織標本的YKL-40表達，結果顯示YKL-40在正常卵巢組織中呈陰性或低水平表達，在卵巢癌組織中高表達，并且YKL-40的過度表達與卵巢上皮性癌的臨床階段有關，且YKL-40過度表達患者的總生存時間明顯低于YKL-40正常表達者。Hogdall等［32］應用免疫組化法檢測了181例卵巢交界性腫瘤和473例卵巢上皮性癌患者組織中的YKL-40水平，并用ELISA法檢測了19例卵巢交界性腫瘤和76例卵巢上皮性癌患者血清中的YKL-40水平，結果顯示卵巢上皮性癌患者組織和血清中YKL-40均高表達，但只有血清中YKL-40可作為卵巢上皮性癌患者的預后指標。Zou等［33］用ELISA法檢測了49例卵巢癌患者的YKL-40及CA125水平，結果顯示對于卵巢癌的診斷YKL-40的敏感性為92.9%，特異性為94.4%，YKL-40聯(lián)合 CA125檢測時其敏感性提高至98.2%，但特異性下降至81.3%。YKL-40可能不是個獨立的卵巢癌預后因素。鑒于血清YKL-40在檢測卵巢癌、監(jiān)測病情、評價手術療效及評估預后方面的作用，血清YKL-40水平有可能成為早期診斷卵巢癌的1個很好的標志物。

綜上所述，腫瘤標志物存在于血液、細胞、組織或體液中，在腫瘤細胞異常表達，是反映腫瘤存在和生長的一類物質(zhì)(包括蛋白質(zhì)、激素、酶和多胺等)。在正常組織或良性疾病中不表達或者僅輕微表達，但可在腫瘤患者的血清、組織或體液及排泄物中檢測到。腫瘤標志物在腫瘤診斷方面的作用有:①早期檢測惡性腫瘤;②用于良、惡性腫瘤的鑒別診斷;③對于治療后隨診的惡性腫瘤患者，可作為判斷腫瘤預后和隨診的指標;④可用于化療患者的療效觀察。檢測HE4，OPN，YKL-40可能是鑒別卵巢良、惡性腫瘤的1種更有效的指標，并且其在早期卵巢癌的診斷中敏感度明顯高于CA125，雖然其在晚期卵巢癌診斷中的敏感度與CA125相當，但特異度明顯高于后者，彌補了CA125的不足。盡管目前HE4，OPN，YKL-40在卵巢癌中發(fā)病機制的研究尚處于早期階段，但隨著更多的研究及臨床診療的實踐，必將進一步證實和拓寬其應用。HE4，OPN，YKL-40都可能成為卵巢癌腫瘤標志物新的方向，在卵巢癌的鑒別、早期診斷、治療、預后及監(jiān)測等方面發(fā)揮較好的作用。

［1］任海花，任衛(wèi)東，馬惠風.卵巢癌臨床流行病學調(diào)查報告〔J〕.基層醫(yī)學論壇，2009，13(2):62.

［2］Whitehouse C，Solomon E.Current status of the molecular characterization of the ovarian cancer antigen CA125 and implications for its use in clinical screening〔J〕.Gynecol Oncol，2003，88(12):152.

［3］Kirchhoff C，Habben I，Ivell R，et al.A major human epididymisspecific cdna encodes a protein with sequence homology to extracellular proteinase inhibitors〔J〕.Biol Reprod，1991，45(2):350.

［4］Drapkin R，Lin Y，Mok SC，et al.Human epididym is protein 4(HE-4)is a secreted glycoprotein that is over expressed by serous and endometrioid ovarian carcinomas〔J〕.Cancer Res，2005，65(6):2162.

［5］Moore RG，Brown AK，Miller MC，et al.The use of multiple novel tumor biomarkers for the detection of ovarian carcinoma in patients with a pelvic mass〔J〕.Gynecol Oneol，2008，108(2):402.

［6］Montaqnana M，Lippi G，Ruzzenente O，et al.The utility of serum human epididymis protein 4(HE4)in patients with a pelvic mass〔J〕.Clin Lab Anal，2009，23(5):331.

［7］Huhtinen K，Suvitie P，Hiissa J.Serum HE4 concentration differentiates malignant ovarian tumours from ovarian endometriotic cysts〔J〕.Br J Cancer，2009，100(8):1315.

［8］Abdel-Azeez HA，Labib HA，Sharaf SM，et al.HE4 and mesothelin:novel biomarkers of ovarian carcinoma in patients with pelvic masses〔J〕.Asian Pac J Cancer Prev，2010，11(1):111.

［9］Kim YM，Whang DH，Park J，et al.Evaluation of the accuracy of ser-um human epididymis protein 4 in combination with CA125 for detecting ovarian cancer:a prospective case-control study in a Korean population〔J〕.Clin Chem Lab Med，2011，49(3):527.

［10］Montagnana M，Danese E，Ruzzenente O，et al.The ROMA(Risk of Ovarian Malignancy Algorithm)for estimating the risk of epithelial ovarian cancer in women presenting with pelvic mass:is it really useful?〔J〕.Clin Chem Lab Med，2011，49(3):521.

［11］Havrilesky LJ，Whitehead CM，Rubatt JM，et al.Evaluation of biomarker panels for early stage ovarian cancer detection and monitoring for disease recurrence〔J〕.Gynecol Oncol，2008，110(3):374.

［12］Lamy PJ，Roques S，Viglianti C，et al.HE4，a novel marker for epithelial Ovarian cancer:evaluation of analytical performances〔J〕.Ann Biol Clin(Paris)，2010，68(3):325.

［13］Young MF，Kerr JM，Temrine JD，et al.cDNA cloning，mRNA distribution and heterogeneity chromosomal location，and RFLP analysis of human osteopontin(OPN)〔J〕.Genomics，1990，7(4):491.

［14］O’Regan A，Berman JS.Osteopontin:a key cytokine in cell-mediated and granulomatous inflammation〔J〕.Int J Exp Pathol，2000，81(6):373.

［15］Kim JH，Skates SJ，Uede T，et al.Osteopontin as a potential diagnostic biomarker for ovarian cancer〔J〕.J Am Med Assoc，2002，287(13):167l.

［16］Meinhold-Heerlein I，Bauersehlag D，Zhou Y，et al.An integrated clinical-genornics approach identifies a candidate multi-analyze blood test for serous ovarian carcinoma〔J〕.Clin Cancer Res，2007，13(2 pt 1):458.

［17］Schorge JO，Drake RD，Lee H，et al.Osteopontin as an adjunct to CA125 in detecting recurrent ovarian cancer〔J〕.Clin Cancer Res，2004，10(10):3474.

［18］Ye B，Skates S，Monk SC，et al.Proteomic-based discovery and characterization of glycosylated eosin ophil-derived neurotoxin and C00H-terminial osteopontin fragments for ovarian cancer in urine〔J〕.Clin Cancer Res，2006，12(2):432.

［19］Visintin I，F(xiàn)eng z，Longton G，et al.Diagn Diagnostic markers for early detection of ovarian cancer〔J〕.Clin Cancer Res，2008，14(4):1065.

［20］Bao LH，Sakaguchi H，F(xiàn)ujimoto J，et al.Osteopontin in metastatic lesions as a prognostic marker in ovarian cancers〔J〕.J Biomed Sci，2007，14(3):373.

［21］Matsuura M，Suzuki T，Saito T.Osteopontin is a new target molecule for ovarian clear cell carcinoma therapy〔J〕.Cancer Sci，2010，101(8):1828.

［22］Zhang LL，Shao SL，Wu Y.Expressions of osteopontin and B7-H4 in epithelial ovarian neoplasm and their significance〔J〕.Chin J Cancer，2010，29(1):25.

［23］Tilli TM，F(xiàn)ranco VF，Robbs BK，et al.Osteopontin-c splicing isoform contributes to ovarian cancer progression〔J〕.Mol Cancer Res，2011，9(3):280.

［24］Rehli M，Niller HH，Ammon C，et al.Transcriptional regulation of(CHI3L1)，a marker gene for late stages of macrophage differentiation〔J〕.J Biol Chem，2003，278(45):44058.

［25］Johansen JS，Jensen BV，Roslind A，et al.Is YKL-40 a new therapeutic target in cancer〔J〕.Expert Opin Ther Targets，2007，11(2):219.

［26］Dupont J，Tanwar MK，T haler HT，et al.Early detection and prognosis of ovarian cancer using serum YKL-40〔J〕.J Clin Oncol，2004，22(16):3330.

［27］Gronlund B，Hogdall EV，Johansen JS，et al.Pre-treatment prediction of chemoresistance in second-line chemotherapy of ovarian carcinoma:value of serological tumor marker determination(tetranectin，YKL-40，CASA，CA125)〔J〕.Int J Biol Markers，2006，21(3):141.

［28］Hogdall EV，Johansen JS，Kjaer SK，et al.High plasma YKL-40 level inpatients with ovarian cancer stage III is related to shorter survival〔J〕.Oncol Rep，2003，10(5):1535.

［29］Dehn H，Hogdall EV，Johansen JS，et al.Plasma YKL-40，asa prognostic tumor marker in recurrent ovarian cancer〔J〕.Acta Obstet Gynecol Scand，2003，82(3):287.

［30］Peng Chun-jie，Zheng Jian-hua，Liu Yun-duo，et al.Expression and clinical significance of human cartilage glycoprotein-39 and carcinoembryonic antigenl 25 in Ovarian epithelial tumor〔J〕.Chinese Journal of Practical Gynecology and Obstetrics，2008，35(1):445.

［31］Yang GF，Cai PY，Li XM，et al.Expression and clinical significance of YKL-40 protein in epithelial ovarian cancer tissues〔J〕.Ai Zheng，2009，28(2):142.

［32］Hogdall EV，Ringsholt M，Hogdall CK，et al.YKL-40 tissue expression and plasma levels in patients with ovarian cancer〔J〕.BMC Cancer，2009，9:8.

［33］Zou L，He X，Zhang JW.The efficacy of YKL-40 and CA125 as biomarkers for epithelial ovarian cancer〔J〕.Braz J Med Biol Res，2010，43(12):1232.