北京市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院（100039）都姣嬌 穆淑珍

傳統(tǒng)中藥華中五味子（Schisandra sphenantheraRehd.et Wils.）來源于五味子屬植物華中五味子的干燥成熟果實(shí)，又稱為“南五味子”，是中醫(yī)常用的滋補(bǔ)強(qiáng)壯藥。近年來，通過大量臨床實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其在諸多方面都有較好的療效，臨床應(yīng)用有更加廣泛的前景。

1 儀器與材料

質(zhì)譜（EI-MS）條件為安捷倫-5973型，直接進(jìn)樣，在70eV下測定，檢索用NIST數(shù)據(jù)庫；核磁共振譜（1H-NMR，13C-NMR 和DEPT）均在INOVA-400核磁共振儀上測定（TMS為內(nèi)標(biāo)）。柱層析用硅膠（200～300目，40～80目，硅膠H），薄層層析用硅膠（GF254）及GF254薄層層析板均為青島海洋化工廠產(chǎn)品。反相材料RP-18（40～63μm） 及RP-18薄層板為默克公司產(chǎn)品（Merck，Darmstadt，Germany）；Sephadex LH-20（25～100 μm）為Amersham Biosciences，Sweden公司產(chǎn)品。薄層層析板采用UV-254和365 nm、碘蒸氣、5% 硫酸-乙醇溶液、顯色觀察其斑點(diǎn)。所有化學(xué)溶劑均為重蒸的工業(yè)級試劑，氘代試劑購于武漢中興科技。實(shí)驗(yàn)用植物樣品（約15kg）于2010年8月購自貴州省三橋藥材市場，產(chǎn)自四川，經(jīng)貴陽中醫(yī)學(xué)院陳德媛教授鑒定為五味子屬植物華中五味子（Schisandra sphenantheraRehd.et Wils.）的干燥成熟果實(shí)。

2 提取與分離

華中五味子成熟干燥果實(shí)（15.0 kg）粉碎后用95%乙醇回流提取3次（時間依次為5h、4h、4h），提取液合并，并減壓濃縮至浸膏。用水制成混懸液后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取（每種溶劑至少萃取3次）?；厥杖軇┖蠓謩e得到石油醚萃取物部位、乙酸乙酯萃取物部位、正丁醇萃取物部位及最后的水部分，經(jīng)薄層層析（TLC）分析檢測后，發(fā)現(xiàn)石油醚萃取物部位和乙酸乙酯萃取物部位基本相同，故合并一起，濃縮成浸膏約1731g。浸膏分別用硅膠柱和凝膠柱反復(fù)層析的方法，石油醚∶丙酮（1∶0～0∶1）梯度洗脫分離得到化合物五味子酚111.08g（schisanhenol，1），五味子酯乙523mg（schisantherin B，2），chicanine 28mg（3），pregomisin 6mg（4）、甘五酸123mg（schizandronic acid，5）、去氧五味子素 18mg（6）、前戈米辛 9mg（7）、內(nèi)消旋二氫愈創(chuàng)木脂素 22mg（8），五味子酯甲 13mg（9），戈米辛P順芷酸酯 15mg（10）。其中前戈米辛（7）首次從該植物中分離得到。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

提取分離出的化合物結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)果如下：

化合物1：無色晶體（丙酮）；C23H30O6；EI-MS m/z （%）：402 （M+，100），387（3），370 （3），235 （3），221 （6），181 （7），167 （2）；1H NMR （400MHz，CDCl3）δ（ppm）：6.58（1H，s，H-4），6.38 （1H，s，H-11），3.88，3.92（12 H，s，-O C H3×4），0.77（3 H，d，H-7，J=6.8 H z），1.02（3 H，d，H-8，J=6.8 H z），5.76（1H，s，-OH），13C-NMR （100MHz，CDCl3）δ（ppm）：151.1 （C，C-1），139.8 （C，C-2），153.0 （C，C-3），107.1 （CH，C-4），139.6 （C，C-5），35.6 （CH2，C-6），40.7 （CH，C-7），33.6（CH，C-8），39.1 （CH2，C-9），134.2 （C，C-10），107.6（CH，C-11），150.4 （C，C-12），133.6（C，C-13），146.7 （C，C-14），116.8 （C，C-15），121.0 （C，C-16），12.6 （CH3，C-17），21.8 （CH3，C-18），61.0 （OCH3，C-2），60.9 （OCH3，C-1），60.9 （OCH3，C-13），55.8 （OCH3，C-3），55.7（OCH3，C-12），與文獻(xiàn)[1]報(bào)道的波譜數(shù)據(jù)基本一致。

化合物2：淡黃色結(jié)晶（丙酮）；C28H34O9；EI-MS m/z （%）：83 （M+，100），514 （21），414（48），343 （81）；1H NMR（400MHz，CDCl3）δ（ppm）：1.40 （3H，s，H-8），1.15 （3H，d，H-7，J=9.2），6.47（1H，s，H-4），3.91，3.74，3.70，3.53（13H，s，-OCH3×4），5.89（2H，d，-OCH2O-）；13CN M R（100 M H z，C D C ll3）：140.2（C，C-1），133.9（C，C-2），148.4（C，C-3），102.4（CH，C-4），135.1（C，C-5），36.1（CH2，C-6），42.2 （CH，C-7），71.9（C，C-8），84.1（CH，C-9），130.7（C，C-10），110.0（CH，C-11），151.6 （C，C-12），141.3（C，C-13），151.6 （C，C-14），121.0 （C，C-15），121.8 （C，C-16），18.7 （CH3，C-17），28.0 （CH3，C-18），58.7 （1-OCH3，C），60.3 （14-OCH3，C），60.5 （13-OCH3，C），55.3 （12-OCH3，C-21），100.3 （-OCH2O-，C），19.5，15.5 （CH3，α，β-C），126.8 （C，C-α），139.8 （CH，C-β），165.9（C=O，C），與文獻(xiàn)[2][3]報(bào)道的波譜數(shù)據(jù)基本一致。

化合物3：白色結(jié)晶（丙酮）；C20H22O5；EI-MS m/z （%）：145 （M+，100），342 （17），192（76），177 （40），164（36）；1HNMR （400MHz，CDCl3）：0.61，0.98 （each3H，d，J=6.5，J=6.4，CH3-3，CH3-4， respectively），2.39-2.44 （m，2H，H-3，H-4），3.90 （s，3H，OCH3），4.61 （d，1H，J=9.2，H-5），5.42 （d，1H，J=4.0，H-2），5.65 （br，1H，OH），5.94 （s，2H，OCH2O），6.77-6.93 （m，6H，Ar-H×6）；13C-NMR （100MHz，CDCll3）δ （ppm）：147.4 （C），146.6 （C），146.2（C），145.0 （C），134.8 （C），134.6 （C），119.2（CH），119.0 （CH），114.0 （CH），108.3 （CH），107.8 （CH），106.7 （CH），85.7 （CH），84.6 （CH），47.4 （CH），43.3 （CH），100.8 （CH2），55.8 （CH3），11.7 （CH3），9.4 （CH3），與文獻(xiàn)[4]報(bào)道的波譜數(shù)據(jù)基本一致。

化合物4：為無色固體（氯仿）；C22H30O6； EI-MS m/z （%）：168 （M+，100），390（20），195 （15）；1H NMR （400MHz，CDCl3） δ（ppm）：0.85 （6H，d，J=6.4Hz，2×CH3CH），1.77 （2H，m，2×CH），2.21-2.27 （2H，m，Ar-CH2-），2.67-2.71 （2H，m，Ar-CH2-），3.84（6H，s，2×CH3O-），3.87 （6H，s，2×CH3O-），5.73 （2H，s，2×OH），6.25，6.42 （4H，s，Ar-H×4）；13C-NMR （100MHz，CDCll3）δ （ppm）：152.0 （C），148.8 （C），138.2 （C），133.4 （C），108.5 （CH），104.7 （CH），38.9 （CH），39.3 （CH2），60.9 （CH3），55.7 （CH3），16.2 （CH3），與文獻(xiàn)[5]報(bào)道的波譜數(shù)據(jù)對照基本一致。

化合物5：白色晶體（氯仿），C30H46O5；1HNMR （400MHz，CDCl3） δ（ppm）：13C-NMR （100MHz，CDCll3）δ （ppm）：219.1 （C，3-C），171.4 （C，26-C），18.4 （CH3，21-C），127.4 （C，25-C），52.8 （CH，17-C），50.9（C，4-C），49.2 （C，14-C），48.8 （CH，5-C），48.6（CH，8-C），45.8 （C，13-C），38.0 （CH2，2-C），36.5 （CH，20-C），36.4 （CH2，1-C），36.0 （CH2，12-C），34.0 （CH2，15-C），33.3 （CH2，22-C），30.0 （CH2，19-C），28.6 （CH2，7-C），27.2 （CH3，29-C），27.1 （CH2，11-C），26.4 （C，10-C），26.4（C，23-CH2），22.4 （CH2，16-C），22.0 （CH2，6-C），21.7 （C，9-C），21.1 （CH3，27-C），21.0（CH3，30-C），19.6 （CH3，28-C），18.5 （CH3，18-C），144.3 （CH，24-C），與文獻(xiàn)[6][7]報(bào)道的波譜數(shù)據(jù)一致。

化合物6：白色粉末（氯仿）；C24H32O6；EI-MS m/z（%）：416（M+，100），401（3），370（4），149（9），43（13）；1H NMR（400MHz，CDCl3）δ（ppm）：6.55（2H，s，2￠-H），3.90（12H，s，4CH3O），3.60（6H，s，2OCH3O），2.01-2.60（4H，m，2CH2），1.82-2.17（2H，m，2CH），1.01（3H，d，J=7.2Hz），0.74（3H，d，J=7.2Hz），13C-NMR（100MHz，CDCl3）δ（ppm）：152.8（C，C-12），151.5（C，C-3），151.4（C，C-14），151.3（C，C-1），140.0（C，C-13），139.6（C，C-2），139.1（C，C-5），133.8（C，C-10），123.2（C，C-16），122.2 （C，C-15），110.3（CH，C-11），107.0（C，C-4），60.9（CH3O，2-C，13-C），60.5（CH3O，1-C，14-C），55.8（CH3O，3-C，12-C），40.6（CH，C-9），39.0（CH2，C-7），35.5（CH，C-6），33.7（CH2，C-8），21.8（CH3，C-18），12.6（CH3，C-17），與文獻(xiàn)[2][8]報(bào)道的波譜數(shù)據(jù)基本一致。

化合物7：為無色固體（氯仿）；C22H30O6；EI-MS m/z（%）：168（M+，100），390（20），195（15）；1H NMR（400MHz，CDCl3）δ（ppm）：0.85（6H，d，J=6.4Hz，2CH3CH），1.77（2H，m，2CH），2.21-2.27（2H，m，Ar-CH2-），2.67-2.71（2H，m，ф-CH2-），3.84（6H，s，2CH3O-），3.87（6H，s，2CH3O-），5.73（2H，s，2OH），6.25，6.42（4H，s，ф-H4），13C-NMR（100MHz，CDCll3），δ（ppm）：152.0（C），148.8（C），138.2（C），133.4（C），108.5（CH），104.7（CH），38.9（CH），39.3（C H2），60.9（C H3），55.7（CH3），16.2（CH3），與文獻(xiàn)[5]報(bào)道的波譜數(shù)據(jù)對照基本一致。

化合物8：為無色固體（氯仿）；C20H34O4：EI-MS m/z （%）137（100），330（M+，11），149（4），43（7）；1H NMR（400MHz，CDCl3）δ（ppm）：0.88（6H，d，J=7Hz，2CH3），1.73-1.75（2H，m，2CH），2.28-2.74（4H，m，2CH2），3.81-3.86（6H，s，2CH3O），5.48（2H，s，2OH），6.61-6.83（3H，m，3ф-H），13C-NMR（100MHz，CDCl3）δ（ppm）：146.2（C，C-3'，C-3"），143.5（C，C-4'，C-4"），133.7（C，C-1'，C-1"），121.6（CH，C-6'，C-6"），113.9（CH，C-5'，C-5"），111.3（CH，C-2'，C-2"），55.8（CH3O，3'-CH3O，3"-CH3O），39.1（CH，C-2，C-3），38.8（CH2，C-1，C-4），16.2（CH3，2-CH3，3CH3），與文獻(xiàn)[1]報(bào)道的波譜數(shù)據(jù)基本一致。

化合物9：為無色固體（氯仿）；C30H32O9； EI-MS m/z（%）：536（M+，13），342（29），312（16），105（100），77（31），57（21）；1H NMR（400MHz，CDCl3）δ（ppm）：1.21（3H，d，J=7.2Hz），1.33（3H，s，CH3），1.68（5H，brs，ф-CH2-），2.15（1H，m，CH），2.28-2.53（2H，m，CH2），3.16-3.98（12H，s，4CH3），5.89（1H，s，CH），5.97-6.00（2H，d，J=1.5，-CH2O-），6.70（1H，s，CH），6.79（1H，s，CH）；13C-NMR（100MHz，CDCl3）：δ（ppm）：153.1（C，C-1），150.5（C，C-3），147.4（C，C-12），139.7（C，C-2），136.9（C，C-14），136.4（C，C-10），129.1（C，C-13），128.7（C，C-5），122.1（C，C-15），121.6（C，C-16），107.1（CH，C-4），106.1（CH，C-11），101.2（CH2，-CH2O-），84.2（CH，C-6），72.3（C，C-7），60.0（CH3，2-CH3O，1-CH3O，14-CH3O），55.9（CH3，3-CH3O），42.0（CH，C-8），36.6（CH2，C-9），36.6（CH2，C-9），28.1（CH3，C-18），18.8（CH3，C-17），與文獻(xiàn)[2][3]報(bào)道的波譜數(shù)據(jù)對照基本一致。

化合物10：為白色粉末（氯仿）；C28H34O9；E I-M S m/z（%）：83（M+，100），514（21），414（48），343（81）；1H NMR（400MHz，CDCl3）δ（ppm）：6.50（1H，s，H-4），6.86（1H，s，H-11），3.61-3.91（12H，s，4CH3O），5.97（2H，-OCH2O-），5.52（1H，H-β）；13C-NMR（100MHz，CDCl3）δ（ppm）：141.3（C，C-1），135.5（C，C-2），149.4（C，C-3），103.0（CH，C-4），136.6（C，C-5），36.6（CH2，C-6），46.5（CH，C-7），75.2（C，C-8），77.6（CH，C-9），133.0（C，C-10），106.0（CH，C-11），152.2（C，C-12），140.9（C，C-13），150.9（C，C-14），119.4（C，C-15），122.8（C，C-16），17.5（CH3，C-17），18.8（CH3，C-18），59.9（1-OCH3，C），60.6（14-OCH3，C），60.9（13-OCH3，C），55.8（12-OCH3，C-21），101.0（-OCH2O-，C），166.6（C=O，C），137.6（CH，C-α），128.6（C，C-β），14.5，12.2（CH3，C-α，β），與文獻(xiàn)[1][2]報(bào)道的波譜數(shù)據(jù)基本一致。