楊潔

（菏澤醫(yī)學專科學校,山東 菏澤 274611）

周圍神經(jīng)的損傷、再生和功能重建一直是外科領域中的難題之一。多年來臨床常規(guī)的治療方法是自體神經(jīng)移植,但自體神經(jīng)移植不僅會給供區(qū)帶來新的創(chuàng)傷，而且常采用的供體-皮神經(jīng)較細小，不能滿足臨床需要。并且絕大多數(shù)的周圍神經(jīng)是混合神經(jīng)，它們含有多種纖維成分，所以當神經(jīng)損傷后導致?lián)p傷近端及遠端神經(jīng)的對位關系紊亂，從而影響神經(jīng)的再生和功能修復。雖然現(xiàn)在的顯微外科技術較發(fā)達，但是周圍神經(jīng)損傷的治療一直沒有得到很好的解決。

周圍神經(jīng)損傷后，如果再生軸突沒有及時到達靶器官，可引起運動終板、感覺器的退變和肌肉萎縮。Card對損傷神經(jīng)進行端側吻合，當受損神經(jīng)近端的再生纖維未到達遠端時，正常神經(jīng)干再生纖維的先期支配有利于防止肌肉萎縮及終板退變［1］。Heath等認為用干細胞或祖細胞作為種子細胞可以改善細胞再生微環(huán)境，增加移植組織與周圍組織的相容性，且減少免疫反應［2］。國內(nèi)研究將從人胚胎腦組織獲得的神經(jīng)干細胞經(jīng)克隆后移植到大鼠的脊髓損傷模型中，可使軸突廣泛髓鞘化，再生的神經(jīng)纖維可延伸至損傷部位的遠端。Murakami［3］等用植入明膠的神經(jīng)干細胞成功修復了15mm坐骨神經(jīng)缺損，發(fā)現(xiàn)神經(jīng)干細胞可分化為施萬細胞樣支持細胞，這些細胞可在移植物的導管中形成大量有髓神經(jīng)纖維，并且再生的神經(jīng)可形成神經(jīng)傳導通路。神經(jīng)干細胞移植入周圍神經(jīng)，雖未發(fā)現(xiàn)神經(jīng)元與中樞神經(jīng)的聯(lián)系，但發(fā)現(xiàn)它可改善神經(jīng)再生的微環(huán)境，促進周圍神經(jīng)再生和功能恢復，并能夠進一步分化，發(fā)出軸突支配受損神經(jīng)的靶器官防止靶器官萎縮。提示神經(jīng)干細胞主要通過改善神經(jīng)再生的微環(huán)境來促進神經(jīng)再生和功能恢復。Holmes［4］等把神經(jīng)干細胞種植在有賴氨酸丙氨酸及天冬氨酸形成的16肽的自制生物支架，在一定條件下，讓干細胞分化成各種類型的神經(jīng)細胞，然后將其植入組織內(nèi)也能達到修復神經(jīng)的目的。

組織工程學是一門利用組織學與工程學的方法研究生物可替代物的科學。這種生物可替代物包括細胞、器官與組織。組織工程器官包括骨、皮膚、血管及輸尿管等。目前人們利用種子細胞在組織工程化人工神經(jīng)中促進神經(jīng)再生的作用，拓展了探討治療周圍神經(jīng)損傷新的前景。組織工程化人工神經(jīng)的關鍵因素是種子細胞的培養(yǎng)與擴增、支架材料的選擇以及神經(jīng)生長的微環(huán)境。Fansa等［5］最先將體外培養(yǎng)的施萬細胞植入經(jīng)過去除細胞成分的骨骼肌后，橋接于坐骨神經(jīng)的損傷處，促進了損傷神經(jīng)的再生。在病理生理過程中，施萬細胞參與周圍神經(jīng)的修復，首先是形成Büngner條帶，從而引導軸突延伸。實驗證明單純移植施萬細胞雖對神經(jīng)再生有效。國內(nèi)很多學者利用施萬細胞結合相關生物材料修復周圍神經(jīng)離斷損傷取得了滿意的實驗效果［6］。

神經(jīng)干細胞（Neural stem cells，NSCs）是一類具有自我更新及多潛能分化傾向的未分化細胞，可以分化為神經(jīng)元和神經(jīng)膠質細胞，而且神經(jīng)干細胞免疫源性弱，可以誘導分化為施萬細胞，是神經(jīng)組織工程的良好種子細胞。研究表明，將神經(jīng)干細胞移植到脫髓鞘的脊髓部位時，神經(jīng)干細胞可以向施萬細胞分化并髓鞘化，Murakami等人聯(lián)合神經(jīng)干細胞和明膠海綿不僅修復了缺損的坐骨神經(jīng)，而且部分移植細胞表達施萬細胞的標志物s-100和P75［7］。另外，神經(jīng)干細胞可以在體外擴增并長期保存，與神經(jīng)系統(tǒng)最具同源性，因此應用神經(jīng)干細胞修復周圍神經(jīng)損傷有廣闊的應用前景。

神經(jīng)干細胞在組織工程中應用廣泛，常見的神經(jīng)干細胞有神經(jīng)上皮干細胞與神經(jīng)嵴干細胞。起源于胚胎神經(jīng)管壁的神經(jīng)上皮干細胞是最原始的神經(jīng)干細胞，在體外培養(yǎng)中顯示出了旺盛的生命力，還有很強的多向分化能力，更適合修復損傷的神經(jīng)通路，而且神經(jīng)上皮干細胞具有低免疫原性，能夠減少異

體移植帶來的免疫排斥反應。因此神經(jīng)上皮干細胞作為組織工程的種子細胞具有明顯的優(yōu)越性。神經(jīng)嵴干細胞具有多潛能性，可增殖并分化為不同類型的成熟組織和細胞。體內(nèi)實驗證實，神經(jīng)嵴干細胞的衍生物遍及了外、中、內(nèi)三個胚層，包括周圍神經(jīng)系統(tǒng)和腸神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)膠質、神經(jīng)元、大部分的初級感覺神經(jīng)元；內(nèi)分泌細胞、心臟流出道和大血管的平滑肌細胞；皮膚和內(nèi)臟器官的色素細胞，以及頭面部的骨、軟骨、結締組織等。神經(jīng)嵴可分為兩部分：顱神經(jīng)嵴和軀干神經(jīng)嵴。顱神經(jīng)嵴干細胞除參與形成頭頸部腹側皮膚的真皮、平滑肌及腺體中結締組織基質等軟組織外，尚可特征性分化為顱面部骨架硬組織。與顱神經(jīng)嵴干細胞不同，軀干神經(jīng)嵴干細胞主要分化為周圍神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質，并參與背根神經(jīng)節(jié)、交感神經(jīng)節(jié)和脊索的形成，在周圍神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育過程中起主要的作用。

研究者們在周圍神經(jīng)組織工程領域做了大量工作！但在臨床上長段周圍神經(jīng)缺損的修復仍以自體神經(jīng)移植為主，尋找豐富的種子細胞來源和經(jīng)體外培養(yǎng)的種子細胞繁殖及擴增后易趨于老化的問題是目前研究需要克服的主要問題，神經(jīng)干細胞的研究為組織工程化修復周圍神經(jīng)損傷提供了新的希望。

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