楊蘭蘭，侯 艷，肖 蓉，邵宛芳，龔 江，秦廷發(fā)

普洱茶對大鼠鈣磷代謝的影響

楊蘭蘭1，侯 艷2，肖 蓉3,*，邵宛芳2，龔 江1，秦廷發(fā)2

(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南 昆明 650201；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)龍潤普洱茶學(xué)院，云南 昆明 650201；3.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南 昆明 650201)

初步探討普洱茶對實驗大鼠鈣磷代謝的影響。采用100只雄性Wistar大鼠按照體質(zhì)量隨機分為對照組(純凈水)，普洱熟茶低、中、高劑量組，普洱生茶低、中、高劑量組，曲茗綠茶低、中、高劑量組，每組10只，分別灌胃純凈水，0.5、1.0、2.0g/(kg·d)(以體質(zhì)量計)的普洱茶和綠茶茶湯，進行為期90d的灌胃實驗。實驗結(jié)束后將大鼠處死，測定分析普洱茶對實驗大鼠鈣磷代謝的相關(guān)指標(biāo)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：各實驗組動物糞鈣含量均顯著低于對照組(P＜0.05)，除高劑量普洱生茶組和高劑量普洱熟茶組外，其他實驗組大鼠糞磷含量與對照組相比無明顯差異(P＞0.05)；各實驗組鈣磷表觀吸收率與對照組相比無顯著差異(P＞0.05)；結(jié)論：在本實驗條件下，該批普洱生茶、普洱熟茶和綠茶對實驗大鼠的鈣磷代謝無影響。

普洱茶；鈣；磷；代謝；大鼠

云南是普洱茶的原產(chǎn)地。早在東漢時期，普洱茶就已經(jīng)開始慢慢發(fā)展起來[1]。特別是近年來隨著普洱茶及普洱茶文化的不斷發(fā)展，國內(nèi)外專家學(xué)者對普洱茶的生理、藥理功能進行了更加深入的研究，不斷證實了普洱茶具有抗衰老、減肥、防癌、抗癌、降壓、降脂等保健功效[2-5]。雖然普洱茶已被廣大人民所接受，但有學(xué)者認(rèn)為飲用普洱茶會抑制人體對鈣的吸收，造成機體鈣離子的流失。因此，本實驗采用不同劑量的普洱茶對大鼠進行為期3個月的灌胃實驗，測定大鼠對飼料中鈣磷的吸收利用率以及糞鈣、糞磷的含量，探索普洱茶對實驗大鼠鈣磷代謝的影響，從而為消費者健康飲用普洱茶提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料、實驗動物與試劑

普洱茶生茶和普洱茶熟茶(2007年)分別取自云南云縣天龍生態(tài)茶業(yè)有限責(zé)任公司(產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號：DB53/103—2007)；云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所，西雙版納普洱茶研究院(產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)代號：DB53/103)；云南省思茅茶樹良種場，中國普洱茶研究院(產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)代號：D B 5 3/ 103)。將上述3種茶樣分別按普洱熟茶、普洱生茶等量混合。

曲茗綠茶由云南省思茅茶樹良種場提供。

100只Wistar 雄性大鼠(60～75g)由上海西普爾-必凱實驗動物有限公司提供，許可證號：SCXK(滬)2008～0016；基礎(chǔ)飼料由昆明醫(yī)學(xué)院動物實驗中心提供；動物飲用水為云南山泉純凈水，由云南大山飲品有限公司提供。

血清鈣試劑盒(20090317)、血清磷試劑盒(20090317)南京建成生物工程研究院。

1.2 儀器與設(shè)備

PS-4型電感耦合等離子原子發(fā)射光譜儀 美國貝爾德公司；XFLM-50CA電熱式壓力蒸汽滅菌器 浙江新豐醫(yī)療器械有限公司；HH-6 數(shù)顯恒溫水浴鍋 常州市華普達教學(xué)儀器有限公司；RE-2000 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 上海亞榮生化儀器廠；BS210S 電子天平 北京賽多利斯天平有限公司；DGF30-ⅢA 電熱鼓風(fēng)干燥箱 南京實驗儀器廠。

1.3 方法

1.3.1 茶湯制備

將普洱茶葉磨碎后用水浸提，水浸液制備見參考文獻[5]，即將等量的茶葉充分溶解在純凈水中，通過濃縮最終制備出等體積的茶湯，提取的茶湯終質(zhì)量濃度為1g/mL，4℃冰箱保存。

1.3.2 受試普洱茶樣品常規(guī)成分的測定指標(biāo)及方法

取樣：按GB/T 8302—2002《茶 取樣》取樣；磨碎試樣：按GB/T 8303—2002《茶 磨碎試樣的制備及其干物質(zhì)含量測定》制備；水分測定 ：按GB/T 8304—2002《茶 水分測定》測定；水浸出物測定：按GB/T 8305—2002《茶 水浸出物測定》測定；茶多酚含量測定：按GB/T 8313—2002《茶 茶多酚測定》測定；茶多糖含量的測定采用蒽酮-硫酸法，測定方法見參考文獻[6]。

1.3.3 動物分組與處理

健康雄性Wistar大鼠100只，同室單籠飼養(yǎng)，自由采食和飲水，環(huán)境溫度控制在(20±2)℃，相對濕度45%～60%。實驗大鼠在實驗環(huán)境下飼喂基礎(chǔ)飼料適應(yīng)1周后，隨機分為對照組，普洱熟茶低、中、高劑量組，普洱生茶低、中、高劑量組，及綠茶低、中、高劑量組，每組10只。已有研究表明推薦成人每日用茶劑量為0.1g/kg[7]，實驗中低、中、高劑量分別為人體推薦攝入量折算為每千克體質(zhì)量劑量的5倍、10倍和20倍[8]，即低、中、高劑量分別為0.5、1.0、2.0g/(kg·d)，根據(jù)大鼠的體質(zhì)量計算出每只大鼠每天可攝入的茶湯的量，然后將制備好的茶湯按照不同的劑量組用純凈水稀釋到不同的質(zhì)量濃度，一次經(jīng)口灌胃2mL/d，空白對照組灌胃等體積純凈水，灌胃持續(xù)90d。

1.3.4 受試大鼠測定指標(biāo)及方法

1.3.4.1 常規(guī)指標(biāo)測定

每周定時測量實驗大鼠的體質(zhì)量、體長(體長測定從大鼠鼻端到肛門)、飲水量和攝食量。

1.3.4.2 受試大鼠飼料和糞便中鈣磷含量的測定

受試大鼠處死前4d收集每只受試大鼠的全部糞便，送往農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心(昆明)采用等離子體發(fā)光光譜儀測定鈣磷含量。

1.3.4.3 鈣磷表觀吸收率的計算

1.3.4.4 食物利用率的計算

食物利用率/%=體質(zhì)量增加量/攝入飼料質(zhì)量，即大鼠每攝入100g飼料所增加的體質(zhì)量。

1.3.5 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果與分析

2.1 受試茶樣常規(guī)成分含量測定結(jié)果

表1 受試普洱茶常規(guī)成分含量Table 1 Contents of regular ingredients in

表1 受試普洱茶常規(guī)成分含量Table 1 Contents of regular ingredients in

茶樣水分含量/%干物質(zhì)含量/%水浸出物/%茶多酚含量/%茶多糖含量/%普洱生茶7.75± 0.1492.25± 0.1449.40± 0.2329.97± 1.390.35± 0.02普洱熟茶9.88± 0.3590.12± 0.3542.00± 0.1812.38± 0.992.40± 0.14曲茗綠茶6.70± 0.1693.30± 0.2348.90± 0.1836.47± 0.340.33± 0.16

從表1可知，所采普洱茶生茶、普洱茶熟茶、曲茗綠茶理化成分含量符合云南省地方標(biāo)準(zhǔn)DB53/103—2006《普洱茶 云南省地方標(biāo)準(zhǔn)》，說明所選茶樣具有一定的代表性，達到研究所需樣品的要求。

2.2 實驗飼料礦質(zhì)元素測定結(jié)果

實驗大鼠所食基礎(chǔ)飼料經(jīng)等離子原子發(fā)射光譜儀測定其鈣含量為0.85%，磷含量為1.00%，鈣磷比為1:1.18，其比例符合實驗大鼠正常日食的鈣磷比，能夠保證實驗大鼠鈣磷的正常攝入量。

2.3 普洱茶對大鼠體質(zhì)量的影響

在實驗過程中大鼠生長良好，未見明顯的異常變化。各組大鼠的攝食量及飲水量無明顯變化，對大鼠體質(zhì)量的影響見表2。

從表2可以看出，各實驗組大鼠初始體質(zhì)量與對照組相比無顯著差異(P＞0.05)，實驗組間相比無顯著差異(P＞0.05)，說明各實驗大鼠初始體質(zhì)量處于同一水平；除低劑量普洱生茶組、低劑量普洱熟茶組和中劑量普洱熟茶組外，其他實驗組終末體質(zhì)量仍顯著低于對照組(P＜0.05)。說明中、高劑量普洱生茶，高劑量普洱熟茶和綠茶均具有抑制實驗大鼠體質(zhì)量增長的作用并具有一定的量效關(guān)系。可能因為普洱茶中的麴菌含有微量脂肪分解發(fā)酵的脂肪酶，這對脂肪分解具有效用。

2.4 普洱茶及綠茶對大鼠體長的影響

在實驗過程中大鼠生長良好，未見明顯的異常變化，對大鼠體長的影響見表3。

從表3可以看出，與對照組相比，中、高劑量普洱生茶組實驗大鼠體長的凈增值較低，并具有顯著差異(P＜0.05)；而普洱熟茶和綠茶各劑量組實驗大鼠體長的凈增值均無顯著差異(P＞0.05)。說明普洱熟茶、綠茶和低劑量普洱生茶不影響實驗大鼠體長的增長。

2.5 普洱茶及綠茶對大鼠食物利用率的影響

根據(jù)大鼠的初始體質(zhì)量及終末體質(zhì)量得到凈增體質(zhì)量，并由總攝食量根據(jù)1.3.4.4節(jié)公式計算出大鼠的食物利用率(表2)。各實驗組食物利用率顯著低于對照組(P＜0.05)；高劑量普洱生茶組食物利用率顯著低于低劑量和中劑量普洱生茶組(P＜0.05)，普洱熟茶組間食物利用率相比無顯著性差異(P＞0.05)，低劑量綠茶組食物利用率顯著高于高劑量綠茶組(P＜0.05)；低劑量各組間食物利用率相比無顯著性差異(P＞0.05)，中劑量普洱生茶組食物利用率顯著高于中劑量綠茶組(P＜0.05)，高劑量普洱生茶組食物利用率顯著低于高劑量熟茶組(P＜0.05)，說明灌胃普洱生茶、普洱熟茶和綠茶對實驗大鼠的食物利用率有一定的影響。

表2 普洱生茶、普洱熟茶和綠茶對大鼠體質(zhì)量及食物利用率的影響Table 2 Effects of unfermented pu er tea, fermented pu er tea and green tea on body weight of rats,,

表3 普洱生茶、普洱熟茶和綠茶對大鼠體長的影響Table 3 Effects of unfermented pu er tea, fermented pu er tea and green tea on body length of rats,,

2.6 普洱生茶、普洱熟茶和綠茶對大鼠糞便中鈣磷含量的影響

從表4可以看出，各實驗組大鼠糞鈣含量均顯著低于對照組(P＜0.05)，說明灌胃普洱生茶、普洱熟茶和綠茶不僅不會增加實驗大鼠機體中鈣離子從糞便中的排出量，反而抑制了鈣離子的排出量，并具有一定的量效關(guān)系。

此外，除高劑量普洱生茶組和普洱熟茶組糞磷含量顯著低于對照組外(P＜0.05)，其他實驗組與對照組相比無明顯差異(P＞0.05)，但大部分實驗大鼠組糞磷含量較對照組低，說明灌胃普洱生茶、普洱熟茶和綠茶不會促進機體內(nèi)磷離子從糞便中排出，相反高劑量的生茶和熟茶抑制了磷離子的排出。

表4 普洱生茶、普洱熟茶和綠茶對大鼠糞便中鈣磷含量的影響Table 4 Effects of unfermented pu ,er tea, fermented pu ,er tea and green tea on contents of calcium and phosphorus in stool of rats

2.7 普洱生茶、普洱熟茶和綠茶對大鼠鈣磷表觀吸收率的影響

表5 普洱生茶、普洱熟茶和綠茶對大鼠鈣磷表觀吸收率的影響Table 5 Effects of unfermented pu ,er tea, fermented pu ,er tea and green tea on apparent absorption rates of calcium and phosphorus in rats

從表5可以看出，各實驗組鈣和磷的表觀吸收率與對照組相比無顯著差異(P＞0.05)，說明灌胃普洱生茶、普洱熟茶和綠茶對大鼠鈣和磷表觀吸收率沒有影響。

3 結(jié) 論

由實驗結(jié)果可以看出，高劑量普洱生茶、普洱熟茶和綠茶均具有抑制實驗動物體質(zhì)量增加的作用，并具有一定的量-效關(guān)系。因為普洱茶中的麴菌含有微量脂肪分解發(fā)酵的脂肪酶，這對脂肪分解具有效用。與侯艷等[9]的研究結(jié)果相似。另有文章報道，日本朝日啤酒和朝日飲料兩公司為了尋求抑制減肥反彈的方法，利用老鼠對具有抑制脂肪吸收效果的4種中國茶( 普洱茶、茉莉花茶、烏龍茶、混合茶) 進行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，喂食普洱茶粉末的老鼠，體質(zhì)量下降非常明顯，顯示出驚奇效果[10]。普洱熟茶、綠茶和低劑量的普洱生茶不影響實驗動物體長的增長。普洱茶和綠茶對實驗動物的日攝食量影響不大；此外，已有研究顯示，大鼠飼料鈣磷比為1.2:1時，生長期實驗大鼠體質(zhì)量增加及骨骼發(fā)育較好[11-12]，本實驗所采用的飼料鈣磷比為1.18:1，接近該比值能夠保證實驗大鼠正常生長發(fā)育。

在本次實驗食物利用率的結(jié)果分析中，各實驗組食物利用率顯著性低于對照組，說明灌胃普洱生茶、普洱熟茶和綠茶對實驗大鼠的食物利用率有影響。因為大鼠飼料的攝入量沒有差異性，而灌胃普洱生茶、普洱熟茶和綠茶抑制了實驗大鼠體質(zhì)量的增加，從而對大鼠的食物利用率造成了影響，其結(jié)果符合動物生長規(guī)律。

在本次實驗糞鈣和糞磷的結(jié)果分析中，各實驗組糞鈣含量均顯著低于對照組(P＜0.05)；除高劑量普洱生茶組和普洱熟茶組糞磷含量顯著低于對照組外(P＜0.05)，其他實驗組與對照組相比無明顯差異(P＞0.05)，但大部分實驗大鼠組糞磷含量較對照組低，說明灌胃普洱生茶、普洱熟茶和綠茶不會促進實驗大鼠體內(nèi)鈣磷離子從糞便中的排出，相反隨劑量的升高糞便中鈣磷離子的含量降低。此外，雖然本實驗高劑量的普洱生茶、普洱熟茶和綠茶的食物利用率較低，但相反的是高劑量的普洱生茶、普洱熟茶和綠茶組實驗大鼠糞便中鈣磷離子的含量并未高于對照組。影響鈣磷排出的因素很多，其中包括鈣、磷的攝入量和二者的比例，其原因有待進一步研究[13-17]。

在本次實驗鈣磷表觀吸收率的結(jié)果分析中，各實驗組鈣磷表觀吸收率與對照組相比無顯著差異(P＞0.05)，說明灌胃普洱生茶、普洱熟茶和綠茶對鈣磷表觀吸收率沒有影響，這與鈣磷的攝入量與排出量呈一致關(guān)系。

本實驗通過對普洱生茶和普洱熟茶以及綠茶的研究發(fā)現(xiàn)普洱生茶、普洱熟茶和綠茶不會促進實驗大鼠體內(nèi)鈣磷離子從糞便中的排出，對鈣磷表觀吸收率沒有影響，這與鈣磷的攝入量與排出量呈一致關(guān)系。因此在本實驗條件下，本批次普洱生茶和普洱熟茶以及綠茶不會促進實驗大鼠體內(nèi)鈣磷的流失。

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Effect of Pu’er Tea on Metabolism of Calcium and Phosphorus in Rats

YANG Lan-lan1，HOU Yan2，XIAO Rong3,*，SHAO Wan-fang2，GONG Jiang1，QIN Ting-fa2
(1. College of Animal Science and Technology, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201, China；2. College of Longrun Pu’er Tea, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201, China；3. College of Food Science and Technology, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201, China)

In this paper, the effect of pu’er tea on metabolism of calcium and phosphorus in rats was investigated. A total of 100 male Wistar rats were randomly divided into 10 groups for 10 rats in each group. The first group was designated as the control group administered with pure water by gavage. Nine groups were designated as treatment groups with daily oral administration of fermented pu’er tea, unfermented pu’er tea and green tea extract at the dosages of 0.5, 1.0 g/(kg·d) and 2.0 g/(kg·d), respectively. After 90 days consecutive treatment, the rats were sacrificed and metabolic index of pu er tea on calcium and phosphorus in rats were determined. Results indicated that calcium content in stool of each experimental group was significantly lower than that in the control group (P＜0.05). Except for unfermented and fermented pu’er tea groups at high dosage, calcium contents in stool of other experimental groups had no significant difference (P＞0.05), compared with the control group. Compared with the control group, apparent absorption rates of calcium and phosphorus in experimental groups had no significant difference (P＞0.05). Therefore, the moderate consumption of fermented pu’er tea, unfermented pu’er tea and green tea had no effect on metabolism of calcium and phosphorus in rats.

pu’er tea；calcium；phosphorus；metabolism；rats

TS207.3

A

1002-6630(2011)03-0219-04

2010-05-25

“十一五”國家科技支撐計劃項目(2007BAD58B04)；云南省教育廳科學(xué)研究基金項目(08Y0182)

楊蘭蘭(1988—)，女，碩士研究生，研究方向為動物食品質(zhì)量與安全。E-mail：453317877@163.com

*通信作者：肖蓉(1965—)，女，教授，學(xué)士，研究方向為食品安全性和功能性評價。E-mail：xiaorong91515@163.com