張錫蓮
(江西省貴溪市人民醫(yī)院檢驗科,江西 貴溪 335400)
匹拉米洞法潛血試驗是基于血紅蛋白中亞鐵血紅素有類過氧化物酶的作用[1],能還原過氧化氫為水,使供氫體無色還原型匹拉米洞氧化成紫色的化合物的化學(xué)性潛血試驗。匹拉米洞法、聯(lián)苯胺法均為中度靈敏的潛血試驗化學(xué)方法,為臨床多用方法,但聯(lián)苯胺法因有致癌作用而被淘汰[2],潛血試驗的免疫學(xué)方法雖然特異性和敏感性都高,但用于胃液的潛血試驗時,會受胃酸的影響,在pH 1~2時可能會使抗原失去活性,而出現(xiàn)假陰性,不適宜用于胃液的潛血試驗[3]。基于這些因素,我院選用了匹拉米洞法做胃液的潛血試驗。但胃酸是否對匹拉米洞法有影響,卻未見相應(yīng)的報道,所以此文就以胃酸對胃液匹拉米洞法潛血試驗的影響進行研究。
1.1 儀器與試劑 F-6124半自動生化分析儀 (德國倍肯公司)、ZX38788 型 20~100μl和 100~1000μl可調(diào)定量加樣器(芬蘭)、匹拉米洞試劑按全國臨床檢驗操作規(guī)程進行配制。鹽酸為實驗用1mol/L鹽酸,蒸溜水為二次蒸溜水。
1.2 標(biāo)本 以血紅蛋白濃度為120g/L的定值全血用蒸溜水先進行439.5倍稀釋成血紅蛋白濃度為273 mg/L的初始標(biāo)本(經(jīng)過實驗過程的稀釋,血紅蛋白的最終濃度為2.73mg/L[4])。
1.3 實驗過程 操作過程見表1。
表1 各管的操作方法
從表2可以看出當(dāng)胃酸濃度達0.1mol/L,也就是pH=1時,該方法的靈敏度最高,而繼續(xù)升高達0.15mol/L,也就是pH=0.82時,靈敏度僅為不含胃酸時的三分之一,并隨著胃酸濃度的增加,靈敏度逐漸降低,如果是以肉眼判斷,則有可能呈現(xiàn)假陰性的結(jié)果。產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因可能是亞鐵血紅素在強酸環(huán)境中的類過氧化物酶作用發(fā)生改變。
表2 各管的試驗結(jié)果
綜上所述用該方法檢測一般的胃液是可行的(正常胃液pH 0.9~1.8,胃酸濃度上限為0.13mol/L[5]),其允許胃酸濃度上限較抗體膠體金法高(抗體膠體金法在低濃度鹽酸0.24mmol/L時即出現(xiàn)假陰性[6]),此免疫學(xué)方法可能由于在酸性壞境中血紅蛋白作為抗原發(fā)生變性所致。但胃出血患者往往因胃酸過多引起,胃酸過多的患者,其胃酸分泌量可達正常人的6倍[7],很有可能超過0.15 mol/L,這時應(yīng)用該方法將導(dǎo)致假陰性。為避免這種情況的發(fā)生,當(dāng)胃液高度可疑潛血陽性而出現(xiàn)陰性的結(jié)果時,或者對標(biāo)本進行稀釋,或者用堿調(diào)節(jié)其pH至可測定范圍,再進行檢測。
[1]江 華.尿潛血試驗陽性復(fù)核流程的建立及應(yīng)用[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2010,28(3):299.
[2]于加珍.匹拉米洞法潛血試驗結(jié)果的觀察[J].微循環(huán)學(xué)雜志,2003,13(1):47.
[3]吳乾虎.胃液潛血檢驗與臨床[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,2005,12(1):52-53.
[4]余悅能.匹拉米洞法化學(xué)法和雙聯(lián)試紙條法檢測糞便隱血方法評價[J].檢驗醫(yī)學(xué),2009,24(3):232-234.
[5]熊立凡,劉成玉.臨床檢驗基礎(chǔ)[M].第4版,北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:251.
[6]任 君,石小平,黃田海.酸對單克隆抗體膠體金隱血試驗檢測的影響[J].西南國防醫(yī)藥,2006,16(3):299.
[7]熊立凡,李樹仁.臨床檢驗基礎(chǔ)[M].第3版,北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:232.