席文華，黃新根

(江西省豐城市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 豐城 331100峽江縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科)

高膽紅素血癥是新生兒時期的常見病，臨床上常對患高膽紅素血癥的患兒測血清鈣。我們發(fā)現(xiàn)用熒光滴定法測定血清總鈣時其值明顯降低，但患兒并無低血鈣的臨床癥狀及體征，推測可能為高膽紅素血癥對血清總鈣測定的影響。為此本實(shí)驗(yàn)分別用熒光滴定法、比色法測血清總鈣，并同時測其游離鈣以探討膽紅素的干擾。

1 材料和方法

1.1 混合血清 取健康新生兒血清10份，總量10ml，混合搖勻。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)膽紅素液 Sigma產(chǎn)品，選用既能完全溶解膽紅素，又不影響血鈣測定的0.01mol/L的NaOH液配成855μmol/L膽紅素，然后將其稀釋成不同梯度的標(biāo)準(zhǔn)液。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 熒光滴定法測血清總鈣用CORING公司Callcium Analyzer940，比色法測血清總鈣用CORING400E型自動生化分析儀，試劑盒由臺灣BGH生化公司提供。血清游離鈣測定用CORING Ca2+/pH Analyzer 634。

實(shí)驗(yàn)所用的試劑用去離子水配制：所用的試管、滴管均經(jīng)洗液浸泡，去離子水沖洗。

2 結(jié)果

將一份混合血清分成7管，分別加入同一體積不同濃度的膽紅素標(biāo)準(zhǔn)液，每管所含膽紅素的濃度分別為 0、171、257、342、428、513、684μmol/L。 每管分別用三種方法測血清總鈣或游離鈣2次取均值，其結(jié)果見表1。

表1 不同方法測定血清鈣的比較

結(jié)果顯示血清游離鈣測定和比色法測定總鈣不受膽紅素的干擾。而熒光滴定法測總鈣受膽紅素濃度影響較大[1]。熒光滴定法所測總鈣均值與膽紅素濃度呈顯著負(fù)相關(guān)，回歸方程式y(tǒng)=1.5259-0.0007x，相關(guān)系數(shù) γ=-0.93，P＜0.01。

3 討論

熒光滴定法測定總鈣簡便、所需樣品量少，重復(fù)性也較好。但膽紅素對熒光滴定法測定總鈣存在明顯干擾。故測高膽紅素患兒的總鈣時，應(yīng)選用比色法測定或直接測定血游離鈣。大量的研究表明，在許多病理情況下，總鈣并不能很好地反映機(jī)體內(nèi)鈣

平衡狀態(tài)，有31%的病例，總鈣和游離鈣的變化不相平行[2]。在我們的臨床觀察中也發(fā)現(xiàn)，以總鈣值判斷新生兒血鈣狀態(tài)很易出現(xiàn)“假性低鈣”現(xiàn)象，這是因?yàn)樾律鷥旱目傗}值受膽紅素或血清白蛋白的影響，因此國外有專家提出，低鈣血癥應(yīng)以血游離鈣值進(jìn)行定義。

[1]譚 為,周衛(wèi)東.標(biāo)本溶血對干化學(xué)生化分析儀測定結(jié)果的影響[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2010,28(2):34.

[2]鄭鐵生.鈣、磷、鎂的代謝及調(diào)節(jié)[M].見周 新,府偉靈主編:臨床生物化學(xué)檢驗(yàn),北京:人民衛(wèi)生出版社,2007,7:288-294.