陸奎英，周 艷，吳 艷，馮恒榮，包廣宇

(揚(yáng)州市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 揚(yáng)州 225001)

凝血酶原時(shí)間(PT)是檢測維生素K(Vitamin K)依賴因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ及Ⅴ和纖維蛋白原活性的指標(biāo)。它不僅適用于外源性凝血途徑的先天性凝血疾病及獲得性出血性疾病的診斷，也可用于判斷肝病病情，同時(shí)還是臨床上口服抗凝劑治療監(jiān)測的首選指標(biāo)。但長期以來，實(shí)驗(yàn)室間凝血酶原時(shí)間檢測結(jié)果一致性較差。引起PT結(jié)果室間可比性差的原因很多，本文旨對(duì)抗凝劑的濃度影響進(jìn)行探討。

1 材料與方法

1.1 對(duì)象 我院2008年10月份門診口服抗凝劑治療監(jiān)測的患者及小手術(shù)患者計(jì)46例。

1.2 方法 所有研究對(duì)象抽取靜脈血各1.2ml分別加入到A組為含0.2ml3.2%枸櫞酸鈉(109mmol/L)和B組含0.2ml3.8%枸櫞酸鈉 (119mmol/L)抗凝管內(nèi)(采血量為60%)。抽取靜脈血各1.6ml分別加入到C組為含0.2ml3.2%枸櫞酸鈉 (109mmol/L)和D組含0.2ml3.8%枸櫞酸鈉(119mmol/L)抗凝管內(nèi)(采血量為80%)離心后分離血漿。 抽取靜脈血各1.8ml分別加入到對(duì)照組E組為含0.2ml3.2%枸櫞酸鈉(109mmol/L)和對(duì)照組F組含0.2ml3.8%枸櫞酸鈉(119mmol/L)抗凝管內(nèi)(1：9 抗凝)。 Sysmex CA-7000全自動(dòng)血凝儀檢測PT。試劑由上海太陽生物技術(shù)有限公司提供。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用x±s表示，六組間均數(shù)比較采用非配對(duì)t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

46份標(biāo)本PT結(jié)果分別為：A組17.4±0.21(s)，B組 23.8±0.56(s)，C 組 17.0±0.27(s)，D 組 20.9±0.32(s)，E組 16.8±0.26(s)，F(xiàn) 組 17.9±0.31(s)。 對(duì)照組 E 組、F組之間無顯著差異 (P＞0.05)，A組、C組與對(duì)照組E組、F組之間無顯著差異(P＞0.05);B組、D組之間有顯著性差異(P＜0.05)，B組、D組與對(duì)照組E組、F組之間有顯著差異(P＜0.05)。結(jié)果見表1。

表1 兩種濃度抗凝劑檢測PT比較±s)

表1 兩種濃度抗凝劑檢測PT比較±s)

組別 n PT(s)A組B組C組D組E組F組46 46 46 46 46 46 17.4±0.21 23.8±0.56 17.0±0.27 22.9±0.32 16.8±0.26 17.9±0.31

3 討論

PT檢測中常用的抗凝劑有兩種，分別為3.2%枸櫞酸鹽 (109mmol/L)和3.8%枸櫞酸鹽(119mmoL/L)。兩種抗凝劑抗凝全血進(jìn)行PT檢測時(shí)，均要求抗凝劑和血液的比例為1:9，但是臨床工作中由于操作人員不同，真空采血管的質(zhì)量等原因，往往比例很難控制[1]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明使用3.8%和3.2%枸櫞酸鹽抗凝標(biāo)本時(shí)，如果抗凝劑與血液的比例達(dá)不到1:9時(shí)，使用3.8%枸櫞酸鹽抗凝的標(biāo)本PT檢測時(shí)間比3.2%枸櫞酸鹽抗凝的標(biāo)本PT檢測時(shí)間平均延長約6.0s左右。

使用3.8%枸櫞酸鹽抗凝的標(biāo)本中如果采血量少于80%會(huì)導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)顯著差異，使用3.2%枸櫞酸鹽抗凝的標(biāo)本即使采血量僅達(dá)到60%檢測結(jié)果也不會(huì)出現(xiàn)顯著差異。美國2001年的血凝實(shí)驗(yàn)室室間調(diào)查顯示也證明了：使用3.2%枸櫞酸鹽抗凝的標(biāo)本受血量影響小只要滿足采血量超過60%檢測結(jié)果不會(huì)出現(xiàn)顯著差異[2]。

3.8 %枸櫞酸鹽抗凝的標(biāo)本中PT檢測時(shí)間會(huì)延長,其結(jié)果與臨床表現(xiàn)不符。在早期室間調(diào)查中發(fā)現(xiàn)3.8%抗凝抗凝的標(biāo)本如果采血量少于80%PT檢測時(shí)間會(huì)延長,約有17%的患者出現(xiàn)7s以上的偏差[3]。因此，世界衛(wèi)生組織都推薦使用3.2%枸櫞酸鹽作為PT檢測的抗凝劑[3]。探其原理可能與血漿中鈣離子濃度有關(guān)：因?yàn)镻T在檢測過程中血漿重新鈣化，由于抗凝劑相對(duì)用量的多少直接影響血漿鈣濃度，而血漿鈣濃度的高低則影響凝血功能檢測結(jié)果，因此血漿中鈣濃度是凝血功能檢測至關(guān)重要的因素[4]。當(dāng)血液與抗凝劑比為9:1時(shí)血漿中枸櫞酸鹽濃度為正常水平，所謂血液與抗凝劑比為9:1實(shí)際上是抗凝劑與正常紅細(xì)胞壓積血液的血漿之比[5]。當(dāng)采血量不足時(shí)血漿量就少，血漿中枸櫞酸鹽濃度相對(duì)增高，血漿中鈣離子濃度相對(duì)不足，即使在檢測過程中加入了鈣離子仍然不能滿足反應(yīng)所需要的鈣離子濃度從而影響PT檢測結(jié)果,使檢測結(jié)果延長。相對(duì)于少量的血漿量而言含有3.8%枸櫞酸鹽濃度比3.2%枸櫞酸鹽濃度要高，對(duì)PT檢測結(jié)果影響就大[6]。

綜上所述，為減少采血量對(duì)檢測結(jié)果的影響用3.2%枸櫞酸鈉(109mmol/L)作為抗凝劑來檢測凝血酶原時(shí)間更適合于臨床使用。

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