劉和平，宋春萍

(1、江西省宜春市人民醫(yī)院；2、江西省宜春市中心血站 336000)

目前臨床上認(rèn)為引起新生兒溶血病(HDN)的原因較多，其中母嬰ABO血型不合是常見因素。早期診斷、早期治療對避免造成嚴(yán)重后果具有重要意義，在實(shí)驗(yàn)診斷HDN中，傳統(tǒng)試管酶試驗(yàn)(TCT)檢測法操作步驟多、時間長、重復(fù)性較差，易出現(xiàn)假陰性，難以廣泛應(yīng)用。近年來，微柱凝膠卡式檢測法(MGCT)因其靈敏度高，特異性好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠而被應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室，成為常規(guī)實(shí)驗(yàn)診斷的重要手段，為紅細(xì)胞疾病診斷、治療監(jiān)測、預(yù)后判斷等提供了準(zhǔn)確依據(jù)。我們比較了TCT和MGCT在ABO血型不合HDN檢測中的應(yīng)用結(jié)果，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 2008年1月至2010年10月本院臨床送檢的擬診母嬰ABO血型不合HDN的血標(biāo)本210例，其中190名患兒出生后1～5d皮膚鞏膜黃染，血清膽紅素高于正常值，Hb降低，伴有HDN的臨床癥狀、體征，初步診斷為HDN。

1.2 儀器與試劑 長春博德微柱凝膠卡，多特異性抗球蛋白、單抗-IgG、單抗-C3(上海血液中心，批號20080101)標(biāo)準(zhǔn)A、B血清試劑和標(biāo)準(zhǔn)5%A、B、O紅細(xì)胞懸液(上海血液生物公司，批號20080106)，專用離心機(jī)、孵育器由長春博德提供。

1.3 方法 1)首先分別用母親及新生兒抗凝血作ABO及Rh血型鑒定，再進(jìn)行ABO和HDN檢測?？骨虻鞍自囼?yàn)進(jìn)行的HDN 3項(xiàng)試驗(yàn)按照《臨床輸血技術(shù)規(guī)程》操作。微柱凝膠卡式法的3項(xiàng)試驗(yàn)按說明書操作。對抗球蛋白試驗(yàn)和MGCT進(jìn)行HDN 3項(xiàng)試驗(yàn)時，同時設(shè)立陰、陽性對照。2)同時比較兩種方法在所需時間、靈敏度、操作要求和室間上的差異。其中計(jì)算靈敏度時，假定以MGCT法檢測放散液陽性的標(biāo)本為真實(shí)陽性，計(jì)算其他方法的相對靈敏度。

1.4 結(jié)果判斷 3項(xiàng)試驗(yàn)同時陽性可確診陽性，否則以釋放試驗(yàn)陽性為診斷標(biāo)準(zhǔn)，而且直抗及游離試驗(yàn)1項(xiàng)或2項(xiàng)陽性者判定為HDN可疑陽性，若DAT和/或游離抗體陰性，結(jié)合臨床具體分析。TCT以肉眼/或顯微鏡下可見的凝集為陽性反應(yīng)；MGCT以紅細(xì)胞聚集在凝膠帶上部或凝膠中為陽性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 MGCT和TCT檢測結(jié)果的陽性率比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2種方法檢測結(jié)果的比較(見表1)。

表1 MGCT和TCT的方法學(xué)比較

2.2 MGCT和TCT的方法學(xué)比較(見表2)。

表2 MGCT和TCT的方法學(xué)比較

2.3 兩種方法凝集強(qiáng)度的比較 TCT直抗試驗(yàn)、游離試驗(yàn)及釋放試驗(yàn)陽性血樣，采用MGCT法全部檢出為陽性。MGCT同時檢出31例TCT直抗陰性；30例TCT游離試驗(yàn)陰性，30例TCT釋放試驗(yàn)陰性血樣，結(jié)果判斷時MGCT比TCT檢測的凝集強(qiáng)度普遍要高 1+～2+。

3 討論

ABO-HDN是臨床最為常見的一類母嬰血型不合溶血病，可引起高膽紅素血癥、貧血等臨床癥狀，雖然通常ABO-HDN的臨床后果沒有RhD-HDN那么嚴(yán)重，但其發(fā)生率遠(yuǎn)高于后者，若不及時治療，嚴(yán)重者也可引起核黃疸，對新生造成不良影響[1]。我們檢測的210例臨床標(biāo)本中，經(jīng)跟蹤調(diào)查，排除其它可能引起HDN的疾病，再結(jié)合母嬰血型、實(shí)驗(yàn)診斷和臨床癥狀發(fā)展，最終可確診為ABO-HDN的標(biāo)本為190例。以TCT法最終確診的ABO-HDN例數(shù)為160例，與臨床符合率僅76.2%，而MGCT法確診結(jié)果與臨床診斷符合率則達(dá)90.5%。以往傳統(tǒng)TCT法檢測HDN，能較敏感地檢出紅細(xì)胞上的不完全抗體和補(bǔ)體，但操作步驟繁雜，耗時久，對技術(shù)人員操作要求高，難度大，重復(fù)性較差，且在操作過程易出現(xiàn)假陰性結(jié)果，對臨床治療造成延誤，難于廣泛推廣應(yīng)用。MGCT技術(shù)省略了洗滌的步驟，操作相對簡單，并且具有血清用量少，反應(yīng)靈敏度高，結(jié)果可以長期保存，能夠反復(fù)觀察等優(yōu)點(diǎn)，其各梯度的凝集強(qiáng)度一目了然，結(jié)果比較客觀，不同操作人員在結(jié)果的判斷上相對TCT差異較小[2]。在靈敏度方面，MGCT所檢測的效價(jià)比TCT提高2～4倍。從這兩項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果可知，采用不同的檢測方法對同一名患者進(jìn)行檢測，所得到的結(jié)果會有較大的差異，對疾病的判斷和治療會造成不利影響。因而采用高靈敏度的方法對ABO-HDN進(jìn)行準(zhǔn)確的檢測對疾病的早期診斷和治療具有重要意義。

[1]李 勇,馬學(xué)嚴(yán).實(shí)用血液免疫學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,2006:411-414.

[2]趙祥勝.柱凝技術(shù)檢測孕婦血清IgG抗體水平[J].臨床輸血與檢驗(yàn),2000,2(3):32-33.