劉發(fā)河，曾海蓮，鄭小江，楊春媚

(廣東茂名市人民醫(yī)院檢驗科，廣東 茂名 525011)

肝纖維化是指由各種致病因子所致肝內(nèi)結(jié)締組織異常增生，導(dǎo)致肝內(nèi)彌漫性細(xì)胞外基質(zhì)過度沉淀的病理過程，是肝硬化的前期病變，是可逆的，隨著肝纖維化的進(jìn)一步發(fā)展為肝硬化時則較難逆轉(zhuǎn)，因此對肝纖維化的早期診斷對臨床治療有重大意義。肝活檢是診斷肝纖維化的金標(biāo)準(zhǔn)，但是肝纖維化在肝內(nèi)分布不均勻，而肝穿刺組織僅占全肝的五萬分之一，容易造成漏診、誤診，且肝活檢是創(chuàng)傷性檢查，疼痛及其他并發(fā)癥使許多患者不愿接受檢查，因此探索以非創(chuàng)傷性檢查替代肝穿刺活檢成為當(dāng)務(wù)之急。雖然目前已有30多種血清肝纖維化指標(biāo)，以及近幾年國內(nèi)外學(xué)者通過ROC曲線及回歸分析獲得多種肝纖維化診斷的數(shù)學(xué)模型[1，2]，但仍不理想。本文對112例肝纖維化患者及50名健康體檢者的HA、C-Ⅳ、LN、AST/ALT、PLT 進(jìn)行檢測比較，探討其對肝纖維化的診斷意義，報告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取本院2009年11月至2011年1月住院的112例肝纖維化患者，男81例，女31例，年齡28～78歲，平均43.3歲。所有患者經(jīng)肝組織病理活檢診斷符合2000年全國病毒性肝炎防治方案慢性肝炎炎癥分級(Grade,G)、纖維化分期(Stage，S)標(biāo)準(zhǔn)，S1：匯管區(qū)擴(kuò)大伴纖維增生；S2：匯管區(qū)周圍纖維化或纖維隔形成，小葉結(jié)構(gòu)保留；S3：纖維隔伴小葉結(jié)構(gòu)紊亂，無肝硬化；S4：早期肝硬化。其中S1期38例，S2期30例，S3期21例，S4期23例，肝組織標(biāo)本由本院肝科醫(yī)師穿刺送病理科分期。另選正常健康體檢者50例作為對照組，其中男性32例，女性18例，年齡在25～66歲之間，平均為38.2歲。

1.2 標(biāo)本處理，受檢對象均抽取清晨空腹血三管，一管用EDTA抗凝檢測血常規(guī)，其他兩管分離血清：一管用于肝功能檢測；另一管放-20℃保存待檢測HA、C-Ⅳ、LN。

1.3 試驗方法 HA、C-Ⅳ、LN采用競爭性放射免疫法，試劑來自上海海研醫(yī)學(xué)生物技術(shù)有限公司，嚴(yán)格按照使用說明書操作，用γ放射儀檢測；AST，ALT用AU2700檢測，試劑采用上?？迫A東菱診斷用品有限公司；PLT采用BECKMAN的LH750檢測。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 結(jié)果用x±s表示，組間采用t檢驗，檢測指標(biāo)的相關(guān)性采用直線相關(guān)分析，數(shù)據(jù)用SPSS 10.0軟件統(tǒng)計處理，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HA、C-Ⅳ、LN、AST/ALT 比值與肝纖維化的嚴(yán)重程度成正相關(guān)，隨肝纖維化病情的發(fā)展逐漸升高，PLT則與肝纖維化病情呈負(fù)相關(guān)，各指標(biāo)與正常對照組相比有顯著差異，用t檢驗(P＜0.05)有統(tǒng)計學(xué)意義，且在肝纖維化分期組間也存在統(tǒng)計學(xué)差異。見表1。

2.2 肝纖維化指標(biāo)與AST/ALT比值及PLT的相關(guān)性肝纖維化三項指標(biāo)(HA、C-Ⅳ、LN)均與AST/ALT比值或 PLT 有相關(guān)性(P＜0.05)，甚至顯著相關(guān)(P＜0.01)，見表2。

表1 檢測指標(biāo)在肝纖維化各期與正常對照組中檢測結(jié)果(x±s)

表2 血清肝纖維化指標(biāo)與AST/ALT比值及PLT的相關(guān)性(γ)

3 討論

血清HA、C-Ⅳ、LN水平檢測可以動態(tài)觀察肝纖維化病情演變情況以及臨床治療效果，有助于提高肝纖維化診斷的準(zhǔn)確性和可靠性[3]，本檢驗結(jié)果表明HA、C-Ⅳ、LN在肝纖維化中明顯升高，與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，其升高程度與肝臟纖維化程度有關(guān)，這與近年來國內(nèi)學(xué)者的報告結(jié)果相一致[3，4]。

透明質(zhì)酸(HA)是由內(nèi)間質(zhì)細(xì)胞合成的一種大分子葡萄胺多糖，是構(gòu)成肝細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分之一，主要在肝臟代謝，可較準(zhǔn)確的反映肝內(nèi)已生成的肝纖維量及肝細(xì)胞受損，研究表明[5，6]，HA水平與肝纖維化分期正相關(guān)程度較高，本文數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計檢驗也體現(xiàn)出HA隨肝纖維化的發(fā)展而明顯升高，組間有顯著差異是有統(tǒng)計學(xué)意義，血清HA含量出現(xiàn)不同程度的升高可以反映肝纖維化的嚴(yán)重程度，其對判斷慢性肝病的肝纖維化有重要價值。血清C-Ⅳ為構(gòu)成基底膜主要成分反映基底膜膠原更新率，在肝纖維化時出現(xiàn)較早，有利于肝纖維化的早期診斷，本文數(shù)據(jù)顯示，C-Ⅳ水平隨肝纖維化加重逐漸升高，明顯高于對照組 (P＜0.001)，S1-S4各期間也有顯著差異 (P＜0.005)，可以較好的反映肝纖維化的分期。LN在S2-S4期進(jìn)展中有比較明顯的升高，對中晚期的肝纖維化診斷有較大意義。

血清AST和ALT活性測定是國內(nèi)外廣泛應(yīng)用的反映肝細(xì)胞損傷指標(biāo)，在肝纖維化肝功能受損時，AST，ALT往往升高，雖然兩者升高的程度不一定相同，但它們之間的比值與肝功能損傷及肝纖維化程度有相關(guān)性，本研究結(jié)果顯示，在肝纖維化分期S1-S4中，AST/ALT比值也呈梯度升高，各組間比較有統(tǒng)計性差異，與正常對照組有顯著差異，和HA、C-Ⅳ、LN間都具有很好的相關(guān)性，與肝纖維化呈正相關(guān)，且AST、ALT檢測簡單方便快速，基層醫(yī)院都可以做，應(yīng)用廣泛。

本實驗中，PLT與肝纖維化分期呈負(fù)相關(guān)，隨著慢性肝病纖維化的進(jìn)展，血小板破壞增加，導(dǎo)致PLT計數(shù)減少，S1-S4分期比較有顯著差異 (P＜0.01)，與報道[7，8]相一致，PLT檢測在一定條件下可以反映肝纖維化的嚴(yán)重程度，通過統(tǒng)計，發(fā)現(xiàn)PLT與肝纖維化指標(biāo)也具有較高的相關(guān)性。

綜上所述，肝臟是多種物質(zhì)合成和代謝的場所，本文通過對AST/ALT，PLT及肝纖維化指標(biāo)的檢測及統(tǒng)計，發(fā)現(xiàn)它們與肝纖維化分期有密切關(guān)系，聯(lián)合檢測這些指標(biāo)有利于肝纖維化的診斷。

[1]蔣忠勝,溫小風(fēng).慢性肝病纖維化非創(chuàng)傷性診斷模型的研究進(jìn)展[J].肝臟,2008,13(5):430-433.

[2]Ghang MG,Doo E Assessment of Liver fibrosis:Palpate,poke of pulse[J].Hepatology,2005,42(4):759-762.

[3]徐隆長,湯 雄.血清透明質(zhì)酸、Ⅲ型前膠原、IV型膠原、層粘連蛋白水平與肝纖維化的關(guān)系[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2009,27(3):322-328.

[4]黎 明,郎梅春,吳錦瑜.224例肝硬化化患者肝纖維化四項血清學(xué)指標(biāo)檢測結(jié)果分析[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2010,28(3):329-333.

[5]陳永鵬,馮筱榕,吳愛華,等.血清透明質(zhì)酸聯(lián)合血小板準(zhǔn)確預(yù)測代償性乙肝肝硬化[J].廣東醫(yī)學(xué),2009,30(2):223-226.

[6]李 忻,劉 玲,李加新.肝炎患者血清肝纖維化指標(biāo)及PAPP指數(shù)檢測在肝纖維化診斷中的價值[J].海南醫(yī)學(xué),2009,20(10):16-18.

[7]辛?xí)喳?楊 晴,王 瑩,等.血小板參數(shù)檢測在肝纖維化診斷中的應(yīng)用[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥,2009,16(9):80-81.

[8]趙 兵,楊 晴.乙肝患者血小板參數(shù)與肝纖維化的關(guān)系[J].實用醫(yī)學(xué)雜志,2007,23(8):1175-1176.