游永強(qiáng)，林發(fā)全，龔道元，李子萍

(1、南海官窯醫(yī)院檢驗(yàn)科；2、廣西醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科；3、佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院，廣東 佛山 528000)

胰腺癌惡性程度高、發(fā)展快、預(yù)后差，早期診斷對(duì)胰腺癌的治療和預(yù)后具有十分重要的意義。血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)是一種無創(chuàng)傷而且有效的診斷方法，目前已發(fā)現(xiàn)十幾種胰腺癌相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物[1]，其中CA199和CA242是目前臨床應(yīng)用較多的標(biāo)志物，但對(duì)胰腺癌診斷無論是單項(xiàng)檢測(cè)或兩者聯(lián)合檢測(cè)都不太理想[2]。

癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞黏附分子1(CEACAM1)是新近研究發(fā)現(xiàn)的一種與胰腺癌相關(guān)的標(biāo)志物，對(duì)胰腺癌診斷的敏感性較高[3]。本實(shí)驗(yàn)通過檢測(cè)胰腺癌、慢性胰腺炎和正常對(duì)照人群 CEACAM1、CA242及CA199三種血清腫瘤標(biāo)志物，探討CEACAM1、CA242和CA199單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)胰腺癌診斷價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 檢測(cè)對(duì)象 選取南方醫(yī)科大學(xué)附屬南方醫(yī)院、珠江醫(yī)院、佛山市第一人民醫(yī)院2008年1月至2009年10月體檢病人及住院患者共100人，其中經(jīng)影像學(xué)、病理學(xué)及相關(guān)細(xì)胞學(xué)等確診的胰腺癌患者(胰腺癌組)共50例(男性27人，女性23人)，平均年齡(56.1±7.59)歲；慢性胰腺炎患者(胰腺炎組)50例(男性 29 人，女性 21 人)，平均年齡(51.2±4.21)歲；正常組60例來自正常人群體檢者 (男性32人，女性28人)，平均年齡(50.4±6.34)歲。三組在年齡、性別上無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。其中慢性胰腺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)：在排除胰腺癌的基礎(chǔ)上，有以下4項(xiàng)依據(jù)：①典型的臨床表現(xiàn)(腹痛、胰腺外分泌功能不全等癥狀)；②病理學(xué)檢查；③影像學(xué)上有CP的胰膽改變征象；④實(shí)驗(yàn)室檢查有胰腺外分泌功能不全依據(jù)。胰腺癌的診斷依據(jù)(表1)來自三方面，包括A：病理學(xué)診斷、B：影像學(xué)診斷、C：臨床診斷或手術(shù)探查加影像學(xué)，符合任何一項(xiàng)即可診斷為胰腺癌。

表1 胰腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)

1.2 標(biāo)本采集 空腹采集外周靜脈采血3ml，自然凝固后，3000r/min離心5min分離血清，分裝至EP管，放入-80℃超低溫冰箱備用。

1.3 檢查方法 CEACAM1測(cè)定用ELISA定量分析法，酶標(biāo)測(cè)定儀為Thermo Multiskan Ascent酶標(biāo)儀，試劑盒為Uscn Life Science Inc人CEACAM1 ELISA試劑盒；CA242、CA199均采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法，分析儀器為Roche公司電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，試劑、定標(biāo)及質(zhì)控品均由Roche公司提供，參考值：CA242﹤25U/ml，CA199﹤37 U/ml，小于參考值為陰性，大于或等于參考值為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。血清腫瘤標(biāo)志物濃度結(jié)果用均值士標(biāo)準(zhǔn)差±s)表示，計(jì)數(shù)資料以百分率表示，分別用t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析；各組測(cè)定數(shù)值的顯著性檢驗(yàn)用方差分析；P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 正常組、胰腺炎組及胰腺癌組血清3種腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果 從表2可以看出，正常組血清中3種標(biāo)志物水平很低，胰腺炎組血清中3種標(biāo)志物水平均高于正常組，但與正常組比較無顯著性差異(P＞0.05)，胰腺癌組患者血清 CEACAM1、CA242、CA199水平明顯升高，與正常對(duì)照組和胰腺炎組比較，有高度顯著性差異(P＜0.01)。

表2 正常組、胰腺炎組及胰腺癌組血清3種腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果比較s)

表2 正常組、胰腺炎組及胰腺癌組血清3種腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果比較s)

注：與正常組、胰腺炎組比較，*P＜0.01

分組 例數(shù) CEACAM1(ng/m l)CA242(U/m l)CA199(U/m l)正常組胰腺炎組胰腺癌組60 50 50 1.51±1.34 4.98±1.67 40.51±20.02*12.11±6.30 20.01±7.12 311.05±86.1*17.88±8.32 32.01±10.12 3297.04±78.34*

2.2 確定CEACAM1臨界值

根據(jù)ROC曲線，選取靈敏度和特異度之和最高點(diǎn)為截?cái)嘀?，制定本?shí)驗(yàn)CEACAM1的臨界值為13.84ng/ml，小于臨界值為陰性，大于或者等于臨界值為陽性。

2.3 慢性胰腺炎組與胰腺癌組3項(xiàng)指標(biāo)陽性率比較，見表3。

表3 慢性胰腺炎組與胰腺癌組3項(xiàng)指標(biāo)陽性率比較

根據(jù)臨界值，胰腺癌組CEACAM1表達(dá)陽性率為 88%，與 CA199和 CA242(陽性率 78.1%、80.5%)相比，CEACAM1陽性率稍有增加，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異無顯著性(P＞0.05)。胰腺癌組與慢性胰腺炎組3項(xiàng)指標(biāo)陽性率分別比較，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，結(jié)果顯示差異有顯著性(P＜0.05)。

2.4 血清CEACAM1、CA242和CA199單項(xiàng)和聯(lián)合檢測(cè)對(duì)胰腺癌診斷效能評(píng)價(jià)

敏感性=胰腺癌組測(cè)定指標(biāo)的陽性例數(shù)/胰腺癌組病例數(shù)；特異性=胰腺炎組測(cè)定指標(biāo)的陰性例數(shù)/胰腺炎組病例數(shù)；陽性預(yù)測(cè)值=胰腺癌組測(cè)定指標(biāo)的陽性例數(shù)/胰腺癌組測(cè)定指標(biāo)的陽性數(shù)+胰腺炎組測(cè)定指標(biāo)的陽性例數(shù)；陰性預(yù)測(cè)值=胰腺炎組測(cè)定指標(biāo)的陰性例數(shù)/胰腺癌組測(cè)定指標(biāo)的陰性數(shù)+胰腺炎組測(cè)定指標(biāo)的陰性例數(shù)。3種TM聯(lián)合檢測(cè)，采用平行試驗(yàn)和系列試驗(yàn)作為評(píng)價(jià)計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)。平行試驗(yàn)的陽性標(biāo)準(zhǔn)為：3種TM中任何一項(xiàng)大于或等于參考值或臨界值即為陽性，計(jì)算敏感性、特異性及其他評(píng)價(jià)指標(biāo)；系列試驗(yàn)的陽性標(biāo)準(zhǔn)為：3種TM同時(shí)都大于或等于參考值或臨界值即為陽性，計(jì)算敏感性、特異性及其他評(píng)價(jià)指標(biāo)。從表4可以看出，血清3種腫瘤標(biāo)志物單項(xiàng)檢測(cè)對(duì)胰腺癌診斷的敏感性CEACAM1 ＞CA242＞CA19-9(P ＞0.05)； 特 異 性CA242＞CA19-9＞CEACAM1(P＜0.05)， 陽性預(yù)測(cè)值CA242最高，陰性預(yù)測(cè)值CEACAM1最高。3種TM聯(lián)合，若采用平行試驗(yàn)，可以提高檢測(cè)的靈敏性(92.8%)和陰性預(yù)測(cè)值(83.9%)，但特異性和陰性預(yù)測(cè)值下降；若采用系列試驗(yàn)，可以提高檢測(cè)的特異性(85.4%)和陽性預(yù)測(cè)值(82.1%)，但靈敏性和陽性預(yù)測(cè)值下降。綜合分析各種結(jié)果，3種指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)可以提高診斷效能。

表4 CEACAM1、CA242及CA19-9單項(xiàng)和聯(lián)合檢測(cè)對(duì)胰腺癌診斷價(jià)值比較

3 討論

CA199是曾被稱為胰腺癌診斷的 “黃金標(biāo)志物”，但是，CA199對(duì)胰腺癌的特異性不高，很多疾病，如膽管炎癥、卵巢囊腫、慢性肺部炎癥、糖尿病等，亦可引起CA199的輕度升高，而導(dǎo)致假陽性結(jié)果[4]，本實(shí)驗(yàn)CA199對(duì)胰腺癌診斷的敏感性為78.0%，但特異性為58%，敏感性和特異性較低，與文獻(xiàn)報(bào)告一致[4]，而且CA19-9的表達(dá)和腫瘤的生長(zhǎng)部位無明顯關(guān)系，早期診斷價(jià)值也有限，所以一般不作為胰腺癌的單獨(dú)診斷指標(biāo)。

CA242主要存在于胰腺和結(jié)腸惡性腫瘤細(xì)胞中，CA242對(duì)胰腺癌診斷的敏感性與CA19-9相近，對(duì)胰腺癌診斷比CA199有較好特異性[5]，本實(shí)驗(yàn)CA242對(duì)胰腺癌診斷敏感性為80%，特異性為64%，也證實(shí)了這一點(diǎn)，但單獨(dú)作為胰腺癌診斷的指標(biāo)，還也不能滿足臨床要求。

CEACAM1是近幾年來新發(fā)現(xiàn)的腫瘤相關(guān)因子,在鑒別胰腺癌患者與正常個(gè)體方面較CA199有明顯優(yōu)勢(shì)[6]，CEACAM1逐漸成為胰腺癌腫瘤標(biāo)志物研究的重點(diǎn)[7，8]，但目前國內(nèi)外研究多集中在胰腺癌CEACAM1組織學(xué)表達(dá)和mRNA水平測(cè)定，而關(guān)于血清CEACAM1含量及早期診斷價(jià)值的相關(guān)文獻(xiàn)卻相對(duì)較少。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)CEACAM1在胰腺癌有較高水平和較高比例的表達(dá)，慢性胰腺炎組CEACAM1陽性率亦較高，但和胰腺癌組有顯著性差異，與其他學(xué)者研究結(jié)果相一致[9，10]。結(jié)果提示CEACAM1在胰腺癌有較高水平的表達(dá)，可作為胰腺癌診斷的依據(jù)，對(duì)胰腺癌診斷的敏感性和特異性分別為88.0%和46.0%，結(jié)果提示CEACAM1對(duì)胰腺癌診斷有較高的敏感性，但特異性較低，也不能單獨(dú)作為胰腺癌滿意的診斷指標(biāo)。

迄今為止，仍沒有一種血清腫瘤標(biāo)志物對(duì)胰腺癌的診斷具有滿意的敏感性和特異性，本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)3種指標(biāo)單項(xiàng)和聯(lián)合檢測(cè)，評(píng)價(jià)對(duì)胰腺癌診斷效能，各指標(biāo)的結(jié)果顯示，CEACAM、CA242、CA19-9對(duì)胰腺癌診斷雖均有一定的價(jià)值，但都不十分理想，3種指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)可將診斷的敏感性、特異性分別提高到92.8%(平行試驗(yàn))、 85.4%(系列試驗(yàn))， 均高于3項(xiàng)單獨(dú)檢測(cè)的結(jié)果，因此3種指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)可提高對(duì)胰腺癌的臨床價(jià)值。

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