范亞敏， 張立紅， 李鳳俠， 王曉成， 閻澤君

(河北省承德市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科， 河北 承德 067000)

近年來，各種血液分析儀已廣泛應(yīng)用于臨床常規(guī)檢測，對血小板計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性的問題也一直引起關(guān)注和討論。我們在應(yīng)用全自動(dòng)血液分析儀過程中發(fā)現(xiàn)應(yīng)用乙二胺四乙酸(EDTA)二鉀作為抗凝劑對血細(xì)胞形態(tài)和血小板計(jì)數(shù)影響很小，但會(huì)誘導(dǎo)血小板發(fā)生聚集。目前，乙二胺四乙酸(EDTA)二鉀抗凝劑誘導(dǎo)的血小板聚集引起血小板假性減少的相關(guān)報(bào)道較多，但其機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。本文對2009年3月至2010年5月我院應(yīng)用EDTA鹽抗凝劑引起血小板假性減少的14例檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行回顧分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 檢測對象:2009年3月至2010年5月我院住院患者，儀器血小板計(jì)數(shù)＜70×109L-1患者3621例，其中經(jīng)手工鏡檢復(fù)核證實(shí)為血小板聚集引起的假性血小板減少14例。女4例，男10例，年齡1d至-82歲。標(biāo)本來源:骨傷科2例，男性;骨一科2例，男性;神經(jīng)外科2例，男性;消化科2例，女性;婦科2例，女性;循環(huán)內(nèi)科1例，女性;神經(jīng)內(nèi)科2例，男性;兒科1例，女性。

1.2 儀器和試劑

1.2.1 HDORIBA ABX 120 RETIC全自動(dòng)血液分析儀及原裝進(jìn)口配套試劑。

1.2.2 OLYMPUS光學(xué)顯微鏡。

1.2.3 瑞氏－姬姆薩染液購自貝索公司。

1.3 檢測方法:標(biāo)本經(jīng)血液分析儀檢測后，篩選出血小板計(jì)數(shù)＜70×109L-1的標(biāo)本推制血涂片，經(jīng)瑞氏-姬姆薩染液染色后，由經(jīng)驗(yàn)豐富的檢驗(yàn)人員于鏡下觀察血小板有無聚集。對有血小板聚集的標(biāo)本分別用EDTA-K2抗凝劑和枸櫞酸鈉抗凝劑二管同時(shí)重新抽血馬上送檢。

2 結(jié)果

血小板計(jì)數(shù)＜70×109L-1的標(biāo)本3621例，經(jīng)涂片鏡下觀察有血小板聚集14例。神經(jīng)外科2例均為同一患者，此患者住院期間共化驗(yàn)9次血細(xì)胞分析，2次有聚集現(xiàn)象，其他幾次無血小板聚集現(xiàn)象。消化科2例均為同一患者，此患者住院期間的幾次化驗(yàn)有2次聚集現(xiàn)象，其他幾次無發(fā)現(xiàn)血小板聚集現(xiàn)象。此現(xiàn)象可排除單一由EDTA鹽誘導(dǎo)的血小板聚集，說明引起血小板聚集尚有其他機(jī)制的存在。14例血小板假性減少要求重新抽血，立即送檢，有2例應(yīng)用乙二胺四乙酸(EDTA)二鉀抗凝儀器檢測血小板計(jì)數(shù)仍減少，應(yīng)用枸櫞酸鈉抗凝標(biāo)本儀器檢測血小板計(jì)數(shù)正常，其發(fā)生率14.3%。14例血小板假性減少兩種抗凝劑PLT檢驗(yàn)結(jié)果比較見表1

表1 14例血小板假性減少不同抗凝劑的比較

EDTA-K2抗凝劑與枸櫞酸鈉抗凝劑檢測血小板結(jié)果有明顯差異(P＜0.01)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

由于EDTA鹽對血細(xì)胞形態(tài)和血小板計(jì)數(shù)影響很小，國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)推薦使用EDTA-K2做為血細(xì)胞分析用抗凝劑，但在抗凝血涂片檢查中發(fā)現(xiàn)，部分血片中出現(xiàn)大量血小板聚集現(xiàn)象，一般為3個(gè)-5個(gè)血小板聚集一起，或10-20個(gè)血小板聚集一起，更大的聚集可有50-60個(gè)以上，這樣就會(huì)影響血小板的數(shù)量，導(dǎo)致血小板假性減少，而應(yīng)用枸櫞酸鈉抗凝劑的血涂片，PLT呈散在分布，無聚集現(xiàn)象。曾有報(bào)道EDTA可引起血小板聚集，導(dǎo)致血小板假性減少［1］。也有報(bào)道認(rèn)為與血小板表面相關(guān)抗原的自身抗體及血清中抗心磷脂抗體的滴度有關(guān)，血細(xì)胞分析儀對凝集體的結(jié)構(gòu)不能確認(rèn)而使血小板假性減少［2］，也有文獻(xiàn)報(bào)道可能由于EDTA鹽啟動(dòng)了機(jī)體免疫應(yīng)答而導(dǎo)致血小板聚集，為EDTA依賴的假性血小板減少，并伴有假性血細(xì)胞增多［3］。

血小板聚集成團(tuán)現(xiàn)象可能會(huì)造成血小板計(jì)數(shù)的降低和/或WBC計(jì)數(shù)的升高，這些血小板團(tuán)塊可以激發(fā)儀器L1、LL、LL1報(bào)警標(biāo)記，此時(shí)必須分別用EDTAK2抗凝劑和枸櫞酸鈉抗凝劑二管同時(shí)重新抽血馬上送檢，應(yīng)用枸櫞酸鈉抗凝劑樣本只針對血小板計(jì)數(shù)進(jìn)行再分析。14例血小板假性減少標(biāo)本，重新采血，立即送檢，血小板聚集的發(fā)生率比較低，說明送檢時(shí)間以及采血方法是影響血小板計(jì)數(shù)的重要環(huán)節(jié)。血小板計(jì)數(shù)干擾因素有很多，如:小紅細(xì)胞，紅細(xì)胞碎片，白細(xì)胞碎片，以及血小板和紅細(xì)胞的大小分布出現(xiàn)交迭，從而導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)不可靠，總之，致血小板聚集引起血小板假性減少原因復(fù)雜，機(jī)制有待進(jìn)一步分析。我們認(rèn)為為了檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，檢驗(yàn)人員必須加強(qiáng)責(zé)任心，血液分析儀血小板計(jì)數(shù)低于正常的標(biāo)本均應(yīng)手工涂片復(fù)檢，觀察血小板形態(tài)以及有無聚集，及時(shí)與臨床溝通，避免不必要的誤診發(fā)生。

［1］ 羅春麗.臨床檢驗(yàn)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1997.22.

［2］ 郭建，孫蔡英，孫濱.抗凝劑選擇對全血細(xì)胞分析的影響［J］.臨床檢驗(yàn)雜志，1998，16(5):311.

［3］ 宓慶梅，施巍宇，郝婉瑩，等.EDTA依賴性假性血小板減少癥1例［J］.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2004，27(10):719-720.