吳勵(lì)梅 李 林 黎運(yùn)西 連 蔚

（廣東省佛山市順德區(qū)第一人民醫(yī)院，廣東佛山528300）

目前，全球大約有20%的育齡夫婦面臨著生育障礙的問題[1]，對(duì)于精子活動(dòng)率及形態(tài)的分析已成為目前研究的重點(diǎn)之一。性交后試驗(yàn)又稱宮頸黏液功能檢查（post-coital,PCT），是患者夫婦一般檢查正常，經(jīng)過促排卵治療，指導(dǎo)同房后進(jìn)行的宮頸黏液檢查，以檢測宮頸黏液的功能及精子在穿透宮頸黏液的過程中是否存在異常，是不孕癥常用檢查方法之一[2]。對(duì)于PCT陽性者，說明夫婦性生活正常、宮頸黏液功能正常、卵巢雌激素分泌和宮頸黏液反應(yīng)性正常，說明精子可以穿透宮頸黏液，具有正常的生育能力，可除外宮頸因素作為不孕原因的可能性。因此，對(duì)2009年1月～2010年12月筆者所在醫(yī)院收治患者性交后宮頸黏液中的精子活動(dòng)率和形態(tài)進(jìn)行了分析，以了解宮頸黏液對(duì)男性精子的影響，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2009年1月～2010年12月筆者所在醫(yī)院不孕癥?？崎T診不孕夫婦103對(duì)，年齡22～39歲，平均32歲，其中原發(fā)性不孕患者61例，繼發(fā)性不孕患者42例。女方均通過常規(guī)婦科檢查證實(shí)至少有一側(cè)輸卵管通暢并有排卵，男方精液常規(guī)檢查基本正常。

1.2 研究方法

1.2.1 排卵時(shí)間的預(yù)測以及PCT日的確定 患者自月經(jīng)周期后第6～8天開始，采用上海（日本）阿洛卡醫(yī)用儀器有限公司（ALOKA SSD-3500彩色陰道B超儀陰道探頭對(duì)卵泡的大小進(jìn)行監(jiān)測。當(dāng)卵泡直徑＞14mm時(shí)，采用膠體金法監(jiān)測尿LH峰，同時(shí)采用Insler Score法行宮頸黏液評(píng)分（CMS）[3]，當(dāng)卵泡＞18mm或?qū)m頸黏液評(píng)分（CMS）＞10分，尿LH峰出現(xiàn)時(shí)，即可行PCT。

1.2.2 PCT方法及其結(jié)果的判定 在行性交試驗(yàn)前，男方禁欲3～7d，患者要避免陰道盥洗，性交前將膀胱排空，性交后抬高臀部休息1h左右，于9～12h內(nèi)就診取樣。先用不帶針頭的結(jié)核菌素注射器在陰道后穹窿部吸取混合黏液進(jìn)行鏡檢，以鑒定在陰道內(nèi)是否存在射精，用干棉球擦去宮頸表面的黏液，再將與另一個(gè)注射器相連的聚乙烯導(dǎo)管插人宮頸管內(nèi)1.5～2cm處，抽取黏液0.1～0.2mL，并立即將部分黏液制成濕滴片，室溫下鏡檢。每一玻片分別系統(tǒng)地觀察至少5個(gè)視野，對(duì)活動(dòng)精子數(shù)目計(jì)數(shù)，依據(jù)人民衛(wèi)生出版社《臨床診療指南:輔助生殖技術(shù)與精子庫分冊(cè)》，活動(dòng)精子數(shù)＞20個(gè)/高倍視野為陽性正常。記錄并計(jì)算精子活動(dòng)率。

1.2.3 精子形態(tài)學(xué)分析 對(duì)PCT陽性宮頸黏液標(biāo)本推片經(jīng)乙醚酒精固定后，采用改良的巴氏染色法進(jìn)行染色，再封片鏡檢，依據(jù)WHO的標(biāo)準(zhǔn)[4]進(jìn)行精子形態(tài)學(xué)分析：計(jì)數(shù)200個(gè)精子，分別計(jì)算正常形態(tài)精子和頭部、中段、尾部缺陷的百分率。由兩名實(shí)驗(yàn)室專業(yè)人員閱片。受試男子禁欲3～7d，手淫法采集精液標(biāo)本（常規(guī)標(biāo)本）送檢，按照WHO技術(shù)規(guī)范[5]進(jìn)行操作對(duì)精液進(jìn)行精子活動(dòng)率和形態(tài)學(xué)分析。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

對(duì)PCT陽性標(biāo)本與常規(guī)標(biāo)本中的精子活動(dòng)率和精子形態(tài)學(xué)分別進(jìn)行比較分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理和分析，其中計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 PCT陽性標(biāo)本與常規(guī)標(biāo)本精子活動(dòng)率的比較

103例患者的PCT陽性標(biāo)本與常規(guī)標(biāo)本對(duì)比分析，PCT陽性標(biāo)本中精子a級(jí)活動(dòng)率和（a+b）級(jí)活動(dòng)率均明顯提高，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 PCT陽性標(biāo)本與常規(guī)標(biāo)本精子活動(dòng)率的比較（±s）

表1 PCT陽性標(biāo)本與常規(guī)標(biāo)本精子活動(dòng)率的比較（±s）

注：*P＜0.05

標(biāo)本 n a級(jí)（%） （a+b）級(jí)（%）PCT陽性標(biāo)本 103 32.54±7.18* 59.33±7.48*常規(guī)標(biāo)本 103 16.35±6.84 41.87±8.46

2.2 PCT陽性標(biāo)本與常規(guī)標(biāo)本精子形態(tài)學(xué)的比較

與常規(guī)標(biāo)本相比，PCT陽性標(biāo)本中精子正常形態(tài)的比率明顯提高，可達(dá)75.73%，精子異常形態(tài)明顯降低，僅為24.27%，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 PCT陽性標(biāo)本與常規(guī)標(biāo)本精子形態(tài)學(xué)的比較[n（%）]

3 討論

PCT是檢測精子與宮頸黏液相容性的試驗(yàn)之一，雖然關(guān)于試驗(yàn)的檢查時(shí)間，判斷標(biāo)準(zhǔn)目前還存在爭議，但PCT已在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，并成為目前臨床常用的檢查精子在通過宮頸屏障的過程中是否存在異常[6]的重要方法。PCT陽性結(jié)果說明：（1）不孕夫婦具備正確的性交技術(shù)；（2）宮頸黏液具備正常輸送精子及貯存精子功能；（3）卵巢具有適當(dāng)?shù)拇萍に毓δ?；?）男性配偶具有正常生育能力。當(dāng)PCT試驗(yàn)陰性時(shí)，要根據(jù)具體情況進(jìn)行分析原因，如：患者的排卵時(shí)間是否掌握準(zhǔn)確，患者是否存在宮頸炎癥、免疫抗體、子宮內(nèi)膜異位癥等臨床癥狀，或是男性是否存在影響因素等。可以結(jié)合尿LH檢測重新選擇最佳時(shí)機(jī)進(jìn)行復(fù)查，同時(shí)也可進(jìn)采用精子宮頸黏液接觸試驗(yàn)做為輔助檢查[7]，以便于及時(shí)采用有效的治療方法，提高患者夫婦的受孕率。

本研究中，103例PCT結(jié)果陽性患者的宮頸黏液標(biāo)本與常規(guī)標(biāo)本比較，PCT陽性標(biāo)本結(jié)果中：精子a級(jí)活動(dòng)率和（a+b）級(jí)活動(dòng)率均明顯提高，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表明排卵期宮頸黏液PH7.0～8.5是精子在宮頸黏液中泳動(dòng)和生存的最佳PH，保護(hù)其免受陰道不利環(huán)境的影響，有利于精子穿透；宮頸黏液對(duì)精子有濾過效應(yīng)[5]，活動(dòng)力差的精子被滯留在宮頸口，活動(dòng)力好的精子進(jìn)入宮頸管并得以啟動(dòng)獲能，活力愈加增強(qiáng)。精子正常形態(tài)的比率明顯提高，精子異常形態(tài)比率明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表明宮頸黏液對(duì)正常形態(tài)的精子具有很強(qiáng)的篩選作用，存優(yōu)汰劣。本研究結(jié)果與此前國內(nèi)外有關(guān)報(bào)道相一致，再次證明宮頸黏液對(duì)精子的生存與功能起至關(guān)重要的第一道關(guān)卡作用。

[1] 王巖，陳克林，蔣哲鋒. 女性不孕癥宮頸黏液抗精子抗體與生殖道支原體感染檢測結(jié)果分析[J]. 黑龍江醫(yī)學(xué)，2002，26（2）：116.

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[7] 周慶娥，劉冬娥，張瓊，等. 性交后試驗(yàn)在預(yù)測生育力的臨床意義[J]. 醫(yī)學(xué)臨床研究，2006，23（6）：932-933.