王偉詩

我院Sysmex CA 530全自動血凝儀廣泛應(yīng)用于臨床各科,為疾病的診斷、治療、預(yù)后提供了快速準(zhǔn)確的試驗(yàn)數(shù)據(jù)。進(jìn)口原裝試劑準(zhǔn)確性、精確性都很高,但價(jià)格昂貴。目前國產(chǎn)試劑應(yīng)用更為廣泛,使用國產(chǎn)試劑所做數(shù)據(jù)是否準(zhǔn)確,在使用國產(chǎn)試劑時(shí)應(yīng)當(dāng)注意什么。對此,筆者進(jìn)行了比對試驗(yàn)與觀察,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與與方法

1.1 材料 每天選取 8份患者標(biāo)本(枸櫞酸鈉 1：9抗凝,真空管采取靜脈血,3 000 r/min離心 10min取血漿[1],正常值與異常值兼顧),共檢測 5 d,得到 40組數(shù)據(jù)[2]。

1.2 方法 使用Sysmex CA530全自動血凝儀,分別以原裝配套的Dade-Behring血凝試劑及上海太陽生物技術(shù)有限公司的血凝試劑(太陽生物)檢測每份標(biāo)本的血漿凝血酶原時(shí)間(PT)、活化的部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、血漿纖維蛋白原(Fg)及由PT值演算得出的國際標(biāo)準(zhǔn)化比值(INR)。以上檢測在 4 h內(nèi)完成。所選檢測項(xiàng)目均為省臨檢中心開展室間質(zhì)評的項(xiàng)目,兩套PT試劑的國際敏感指數(shù)分別為0.99(Dade-Behring)和1.01(太陽生物),皆以Dade-Behring的校準(zhǔn)品定標(biāo),Fg試劑以各自的標(biāo)準(zhǔn)品定準(zhǔn)。PT與APTT采用凝固法, Fg采用Clauss方法。每日做室內(nèi)質(zhì)控,質(zhì)控品是省臨檢中心分發(fā)的Dade-Behring質(zhì)控品(正常值)。

1.3 臨床評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 參照美國CLIA'88規(guī)定的室間質(zhì)量評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(T±15%),以%SE＜CLIA'88規(guī)定的室間質(zhì)量評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的1/2(T±7.5%)為臨床可接受標(biāo)準(zhǔn),以醫(yī)學(xué)決定水平處的系統(tǒng)誤差來判斷非原裝試劑是否可以接受[3]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有檢測結(jié)果的組間差異均采用t檢驗(yàn),統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用Microsoft Office Excel 2007進(jìn)行處理。

2 結(jié)果

2.1 2種試劑檢測結(jié)果比較 2種試劑在PT、INR和Fg 3種項(xiàng)目上檢測結(jié)果無顯著性差異,而APTT差異明顯,見表1。

表1 Dade-Behring與太陽生物檢測結(jié)果比較(±s)

表1 Dade-Behring與太陽生物檢測結(jié)果比較(±s)

注：與Dade-Behring比較,＊P＞0.05,＊＊P＜0.01。

試劑 PT INR APTT Fg Dade-Behring17.2±7.18 1.41±0.58 38.3±14.79 2.94±1.10太陽生物 17.0±6.89＊ 1.42±0.58＊ 40.8±12.55＊＊2.87±1.10＊

2.2 2種試劑間的相關(guān)性分析 檢測40組數(shù)據(jù)的PT、INR、APTT及Fg,Dade-Behring與太陽生物間的相關(guān)系數(shù)為：PT：0.9862,INR：0.9862,APTT：0.9517,Fg：0.9818。

2.3 2種試劑間的回歸方程 以Dade-Behring血凝試劑作為標(biāo)準(zhǔn),太陽生物與其在PT、INR、APTT、Fg 4個項(xiàng)目上的回歸方程,見表 2。

表2 Dade-Behring與太陽生物間的回歸方程

2.4 太陽生物臨床可接受性能的評價(jià) PT的醫(yī)學(xué)決定水平X1=10.5sec,X2=15sec;INR的醫(yī)學(xué)決定水平X1=0.9,X2= 1.25;APTT的醫(yī)學(xué)決定水平X1=20sec,X2=40sec;Fg的醫(yī)學(xué)決定水平X1=1.70 g/L,X2=4.10 g/L。將其分別代入回歸方程得相應(yīng)的Y值,系統(tǒng)誤差SE=|Y-X|,%SE=|Y-X|/ X＊100%。其結(jié)果,見表 3。

表3 太陽生物臨床可接受性能的評價(jià)(ˉx,%)

3 討論

凝血篩選試驗(yàn)是各級醫(yī)療機(jī)構(gòu)基本上都開展的檢查項(xiàng)目。目前,隨著各地經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,購入全自動血凝儀的醫(yī)療單位也越來越多。凝血篩選試驗(yàn)的自動化、標(biāo)準(zhǔn)化不僅使檢查結(jié)果在臨床使用的可信度得到保證,而且使得不同實(shí)驗(yàn)室間的數(shù)據(jù)具有了可比性。目前,國內(nèi)血凝儀被國外幾大廠商所壟斷,其原裝試劑具有可溯源性、穩(wěn)定性高、線性范圍大等諸多優(yōu)點(diǎn),但價(jià)格昂貴。國內(nèi)多數(shù)醫(yī)院還是在使用國產(chǎn)試劑,而這些試劑的產(chǎn)品質(zhì)量可謂參差不齊,對這類試劑的質(zhì)量評估就成了保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵因素之一。

本次比對試驗(yàn)顯示,太陽生物在PT、INR及Fg 3個項(xiàng)目上與原裝試劑的檢測結(jié)果無顯著性差異,相關(guān)性好,在臨床使用上是可接受的。而APTT的檢測在兩種試劑間則存在顯著差異,進(jìn)一步分析,其與原裝試劑的相關(guān)性良好,所存在的系統(tǒng)誤差在臨床使用上也是可接受的。究其原因,是由于影響APTT試劑的因素相對較多引起的。不同廠家,使用的磷脂(部分凝血活酶)及活化劑是不同的。人體內(nèi),內(nèi)源性凝血從FⅪ的活化到FⅡa的生成一系列連鎖反應(yīng)都需要在血小板膜磷脂表面進(jìn)行,磷脂種類的不同所帶來的促凝活性的差異必然會影響體外試驗(yàn)的結(jié)果[4]。上海瑞金醫(yī)院的王鴻利及王學(xué)鋒教授的研究發(fā)現(xiàn),三種激活劑：白陶土、硅藻土和鞣花酸對凝血因子、肝素及狼瘡抗凝物質(zhì)的敏感性存在較大差異[5]。目前國際上在APTT試劑方面尚無標(biāo)準(zhǔn)化方案,這給檢測結(jié)果的比對帶來了難度。有人提出將APTT測定值(秒)轉(zhuǎn)化為患者與對照APTT測定值比率報(bào)告,使不同方法結(jié)果間更具可比性[6]。這不失為一個較好的建議。

結(jié)合上述分析可看出,由于試劑標(biāo)準(zhǔn)化的問題,在使用非原裝試劑時(shí),對試劑的評估是不可或缺的環(huán)節(jié)。通過比對試驗(yàn)可有效發(fā)現(xiàn)與原裝試劑存在的差異,評價(jià)其在臨床上的可接受度,是為臨床提供可靠結(jié)果的質(zhì)量保證之一。

[1] 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京：東南大學(xué)出版社,2006：210.

[2] 王毓三,主編.醫(yī)院檢驗(yàn)科建設(shè)管理規(guī)范[M].南京：東南大學(xué)出版社,2003：54.

[3] 王敏敏,謝 琦,盧 忠.不同型號儀器測定凝血酶原時(shí)間的可比性研究[J].浙江臨床醫(yī)學(xué),2008,10(7)：882-883.

[4] 周瑞豐,包承鑫.血小板膜磷脂促凝活性的研究進(jìn)展[J].中華血液學(xué)雜志,1998,19(9)：494.

[5] 王學(xué)峰,胡曉波,程勝利,等.APTT檢測試劑敏感性比較[J].中華血液學(xué)雜志,2001,22(3)：159-160.

[6] 楊 惠,劉 敏.APTT測定值和APTT測定值比率的臨床應(yīng)用價(jià)值的探討[J].血栓與止血學(xué),2003,9(1)：10-12.