劉穎 顧秋楓 林月鈺

支氣管哮喘是一種由多種細(xì)胞及細(xì)胞因子參與的慢性氣道炎癥，其中，嗜酸性粒細(xì)胞是關(guān)鍵的效應(yīng)細(xì)胞，而中性粒細(xì)胞與哮喘發(fā)作的嚴(yán)重程度相關(guān)[1]。白三烯B4(leukotrienes B4，LTB4)作為重要的中性粒細(xì)胞趨化因子，越來(lái)越受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注，報(bào)道大多是局部組織中LTB4濃度的變化，但這易受溫度、分泌物的多少與稀稠、環(huán)境溫度、濕度、兒童的配合程度等因素影響，而血清LTB4水平受以上因素影響小，性質(zhì)穩(wěn)定，更能反應(yīng)體內(nèi)炎癥水平。本文探討血清LTB4在兒童哮喘診治中的臨床意義。

1 臨床資料與方法

1.1 一般資料

選取2010年1月～2011年1月我院哮喘專(zhuān)科門(mén)診收治的哮喘患兒65例作為哮喘組，男38例，女27例。入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡≥5歲；（2）診斷符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)2008年修訂的兒童支氣管哮喘診斷與防治指南[2]；（3）近1周未用過(guò)糖皮質(zhì)激素、茶堿類(lèi)藥物及白三烯受體拮抗劑。按病情分為：(1)輕度發(fā)作組29例，男17例，女12例，平均年齡（9.1±2.8）歲；(2)中度發(fā)作組22例，男13例，女9例，平均年齡（8.5±1.9）歲；(3)重度發(fā)作組14例，男8例，女6例，平均年齡（8.7±2.3）歲。哮喘組中有特應(yīng)體質(zhì)者(濕疹、過(guò)敏性皮炎、過(guò)敏性鼻炎、食物過(guò)敏、藥物過(guò)敏等過(guò)敏性疾病個(gè)人史或家族史)40例。另選同期住院的下呼吸道感染但無(wú)喘息癥狀的5歲以上患兒30例作為對(duì)照組，男17例，女13例，平均年齡（8.5±1.8）歲。均衡性檢驗(yàn)各組在年齡、性別構(gòu)成上差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

1.2 方法

1.2.1 血清標(biāo)本 兩組在就診或入院時(shí)立即采肘靜脈血2ml，將血標(biāo)本2ml緩慢注入非抗凝管內(nèi)，立即放人37℃水浴箱內(nèi)助凝后，以1500r/min，離心10min后提取血清，放入低溫存儲(chǔ)管內(nèi)密封。將血清標(biāo)本置于-80℃低溫冰箱內(nèi)凍藏保存待測(cè)。采用ELISA雙抗體夾心法檢測(cè)血清LTB4濃度，LTB4試劑盒購(gòu)自美國(guó)cayman化學(xué)公司。

1.2.2 肺功能測(cè)定應(yīng)用美國(guó)Piko-1哮喘電子肺功能監(jiān)測(cè)儀分別測(cè)定哮喘患兒PEF及FEV1，測(cè)得值以占預(yù)計(jì)值百分比計(jì)算。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。組間比較采用方差分析、q檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)和直線相關(guān)分析，數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差()表示。

2 結(jié)果

哮喘組患兒血清LTB4平均濃度（67.1±26.8）pg/m1，顯著高于無(wú)喘息組(P＜0.01)。在哮喘組中有特應(yīng)體質(zhì)患兒占61.5%（40/65），其血清LTB4濃度（74.1±28.5）pg／m1，顯著高于非特應(yīng)體質(zhì)患兒(P＜0.01)，見(jiàn)表1。

表1 各組間血清LTB4濃度比較()

表1 各組間血清LTB4濃度比較()

分組 哮喘組 無(wú)喘息組 特應(yīng)體質(zhì)組 非特應(yīng)體質(zhì)組LTB4(pg／m1) 67.1±26.8 29.4±4.9 74.1±28.5 60.0±19.5 N 65 30 40 25 t 7.65 -2.79 P＜0.01 ＜0.01

通過(guò)對(duì)不同發(fā)作程度哮喘患兒之間的比較發(fā)現(xiàn)，哮喘組患兒中哮喘發(fā)作程度愈重，血清LTB4濃度愈高，三組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，急性發(fā)作期哮喘患兒血清LTB4濃度愈高，則肺功能PEF及FEV1占預(yù)計(jì)值的百分比下降愈明顯(P＜0.01)，見(jiàn)表2。通過(guò)直線相關(guān)分析表明，不同發(fā)作程度的哮喘患兒的LTB4與PEF、FEV1值均呈負(fù)相關(guān)(r＝-0.39，-0.41，均P＜0.01)。

表2 不同程度哮喘患兒血清LTB4、PEF及FEV1比較()

表2 不同程度哮喘患兒血清LTB4、PEF及FEV1比較()

分組 輕度 中度 重度 F P 輕度與中度比較 中度與重度比較t P t P LTB4(pg／m1) 45.0±5.4 70.5±11.8 107.9±18.2 327.1 ＜0.01 -9.46 ＜0.01 -6.82 ＜0.01 PEF(%) 73.6±4.2 64.3±5.4 48.2±4.4 135.1 ＜0.01 6.28 ＜0.01 9.14 ＜0.01 FEV1(%) 75.6±4.5 66.1±6.3 49.3±4.1 124.3 ＜0.01 6.56 ＜0.01 8.82 ＜0.01 N 29 22 14

3 討論

白三烯是支氣管哮喘發(fā)作中重要的炎癥介質(zhì)之一，白三烯B4(LTB4)作為白三烯家族的成員之一，是目前已知最強(qiáng)的中性粒細(xì)胞趨化因子和活化因子之一[3-4]。LTB4最早由Borgeat等人于1978年從體外培養(yǎng)的中性粒細(xì)胞內(nèi)分離純化獲得，其化學(xué)全稱(chēng)為5S-12R-二羥基-14-順式8-10-反式-二十碳四烯酸，其主要來(lái)源于活化的巨噬細(xì)胞及中性粒細(xì)胞，血小板、肥大細(xì)胞及氣道上皮在炎癥反應(yīng)中亦可生成少量LTB4[5]，對(duì)中性粒細(xì)胞有很強(qiáng)的趨化作用。在過(guò)敏性反應(yīng)發(fā)生前，炎癥部位組織內(nèi)的LTB4濃度增高，誘發(fā)炎癥細(xì)胞趨向炎癥區(qū)組織，使白細(xì)胞通過(guò)黏附分子的作用黏附于血管內(nèi)皮細(xì)胞，引起血管通透性增高，血漿滲出引起水腫。LTB4在哮喘發(fā)作中的作用已引起許多研究者的關(guān)注，國(guó)外學(xué)者研究證實(shí)：以卵蛋白致敏并激發(fā)制成豚鼠哮喘模型，其肺泡灌洗液中嗜酸性粒細(xì)胞百分?jǐn)?shù)、LTB4水平均明顯升高，而預(yù)先給予LTB4受體拮抗劑，則上述指標(biāo)可下降。另外，LTB4可刺激人外周血單核細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IL-1、TNF-γ和IL-5，亦可使IL-4介導(dǎo)的B細(xì)胞IgE合成增加，參與哮喘細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的調(diào)節(jié)，對(duì)哮喘的氣道炎癥具有激發(fā)和促進(jìn)作用[6]。

本研究通過(guò)對(duì)65例哮喘患兒與無(wú)喘息的下呼吸道感染患兒比較發(fā)現(xiàn)，哮喘組患兒血清LTB4濃度顯著高于無(wú)喘息下呼吸道感染組，證實(shí)了LTB4在兒童哮喘發(fā)作中起了重要作用。目前有關(guān)白三烯與喘息的研究，大多以健康兒童作為對(duì)照，有研究發(fā)現(xiàn)無(wú)喘息呼吸道感染患兒體內(nèi)白三烯濃度高于健康對(duì)照組[7-8]，因此，本研究將無(wú)喘息呼吸道感染患兒作為對(duì)照組，在以往研究的基礎(chǔ)上去除了無(wú)喘息呼吸道感染因素的影響，證實(shí)了在同樣有呼吸道感染條件下，有喘息發(fā)作患兒的LTB4水平高于無(wú)喘息患兒，更進(jìn)一步證實(shí)了LTB4是引起喘息的重要炎癥介質(zhì)之一。

在急性哮喘發(fā)作中，不同的發(fā)作程度，LTB4的水平也有差別，Csoma等[9]研究發(fā)現(xiàn)，過(guò)敏性哮喘患者肺泡灌洗液、誘導(dǎo)痰、血漿及呼出氣中LTB4水平亦明顯高于健康者，有癥狀者高于無(wú)癥狀者，輕度及中-重度持續(xù)發(fā)作者高于輕度間斷發(fā)作者并且濃度與喘息嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。Hanazawa等[10]研究也發(fā)現(xiàn)，哮喘的發(fā)作嚴(yán)重程度與呼出氣中LTB4水平密切相關(guān)。本研究也證實(shí)LTB4與哮喘的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，哮喘病情越重，LTB4生成越多，且與肺功能PEF、FEV占預(yù)計(jì)值的百分比呈負(fù)相關(guān)。因此，檢測(cè)患兒的LTB4濃度變化不僅可以直接評(píng)估氣道炎癥狀態(tài)，也能反映哮喘發(fā)作期的病情程度，可應(yīng)用于肺功能檢查受限的兒童。

特應(yīng)體質(zhì)被認(rèn)為是預(yù)測(cè)哮喘的一項(xiàng)重要指標(biāo)，Piedimonte[11]的研究也提示，特應(yīng)體質(zhì)喘息患兒體內(nèi)的高水平白三烯濃度可能是這部分患兒哮喘高風(fēng)險(xiǎn)的原因。在本研究中發(fā)現(xiàn)，在65例哮喘患兒中有61.5%（40/65）有明確的特應(yīng)體質(zhì)，其LTB4水平較無(wú)特應(yīng)體質(zhì)患兒顯著升高。因此，在臨床工作中應(yīng)詳細(xì)詢(xún)問(wèn)病史，對(duì)這些患兒應(yīng)更加重視。

綜上所述，LTB4在哮喘發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的多個(gè)環(huán)節(jié)起作用，血清LTB4測(cè)定為哮喘的診斷及疾病嚴(yán)重程度判斷，提供了較好的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)，且為選擇LTB4調(diào)節(jié)劑治療兒童哮喘提供了理論依據(jù)。

[1]童夏生，李昌崇.中性粒細(xì)胞分泌功能與支氣管哮喘[J].國(guó)際呼吸雜志，2006，26(1)：45-48.

[2]中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)會(huì)呼吸學(xué)組，中華醫(yī)學(xué)會(huì)《中華兒科雜志》編輯委員會(huì).兒童支氣管哮喘診斷與防治指南(2008年修訂)[J].中華兒科雜志，2008，46(10)：745-753.

[3]Mcmillan R M.Leukotrienes in respiratory disease [J].Paediatr Respir Rev，2001，2(3)：238-244.

[4]劉煥,謝玉.嬰幼兒喘息性疾病血白三烯B4濃度研究[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2009,15(12):4.

[5]Crooks SW，Stockley RA.Molecules in focus Leukotricnc B4.Int J Biochem Cell Bio1,1998,30：173-178.

[6]丁艷苓,姚婉貞.白三烯B4與肺部疾病[J].臨床內(nèi)科雜志，2005，22(11)：790-791.

[7]Gentile DA，F(xiàn)i reman P.Skoner DP Elevation3 of local leukotrieneC4 levels during viral upper respiratory tract infections[J].Annals of Allergy，Asthma and Immunology，2003，91(3)：270-274.

[8]李艷華，方鳳，蔣瑾瑾,等.小兒上呼吸道感染過(guò)程尿白三烯水平的變化[J].江蘇醫(yī)藥，2007，33(3)：302-303.

[9]Csoma Z，Kharitonov SA，Ba1int B，et a1.Increased leukotricnes in exhaled breath condensate in childhood asthmas[J].Am J Crit Care Med,2002,166：l345-l349.

[10]Hanazawa T ,Kharitonov SA,Barnes PJ.Increased nitrotyrosine in exhaled breath condensate of patients with asthma[J].Respir Cr it Care Med,2000,162(4pt):1273-1276.

[11]Piedimonte G，Eenzetti 0，AuaisA.et al.Leukotriene synthesis during respiratory syncytial virus br0nchiolitis：influence of age and atopy[J].Podiatr Pulmonology，2005，40(4)：285-291.