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        麻疹患兒T細胞亞群以及相關(guān)細胞因子研究

        2011-02-26 05:08:14潘曉芬劉玉玲林國模
        海南醫(yī)學(xué) 2011年14期

        潘曉芬,劉玉玲,林國模

        (中山市博愛醫(yī)院兒科,廣東 中山 528400)

        麻疹患兒T細胞亞群以及相關(guān)細胞因子研究

        潘曉芬,劉玉玲,林國模

        (中山市博愛醫(yī)院兒科,廣東 中山 528400)

        目的了解麻疹患兒的免疫狀態(tài)變化。方法采用流式細胞儀以及ELISA法檢測疹初、疹后患者體內(nèi)CD4+T、CD8+T、TL-2、TL-4、TL-6、TL-10水平,再與健康兒童比較。結(jié)果麻疹患兒出疹早期CD4+T水平低于正常,CD8+T水平輕微上升,出疹后CD4+T/CD8+T逐步恢復(fù)正常,TL-2出疹早期上升明顯(P<0.05),疹后有下降但仍維持較高水平(P<0.05),CD8+T、TL-4、TL-6水平出疹早期低于正常,出疹后上升(P<0.05),TL-10疹初、疹后均維持較高水平(P<0.05),T細胞亞群和相關(guān)細胞因子變化趨勢與性別、年齡無關(guān),但年齡越小的患者,出疹早期CD4+T/CD8+T比值越低,疹后越高。結(jié)論麻疹患兒存在暫短、可逆的免疫抑制,TH1/TH2共同參與麻疹免疫,TL-2早期升高明顯,提示以TH1為主,后期TL-4、TL-6明顯上升提示TH2發(fā)揮重要作用,TL-10可能參與了這種免疫調(diào)控,患兒年齡愈小,免疫紊亂可能越嚴(yán)重。

        麻疹;T淋巴細胞亞群;細胞因子;兒童

        麻疹屬呼吸道急性傳染性疾病,未接種人群普遍易感,我國自減毒活疫苗廣泛使用以來,其發(fā)病率已顯著降低,但局部地區(qū)仍有散發(fā)流行。近年來由于人口流動增加,漏種情況十分普遍,導(dǎo)致發(fā)病例數(shù)有上升趨勢。2004年珠三角地區(qū)麻疹抗體流行病學(xué)調(diào)查顯得本地區(qū)有局部爆發(fā)流行可能[1]。針對這種情況,了解麻疹患者出疹前后的免疫狀況以期合理的治療顯得十分重要,為此本次試驗研究了麻疹患兒出疹前后的T細胞亞群以及相關(guān)細胞因子水平,為臨床診治提供指導(dǎo)。

        1 資料與方法

        1.1 入選標(biāo)準(zhǔn) 選擇2008年2月至2010年10月間來我院兒科住院的麻疹患兒,男性45例,女性18例;平均(5.6±1.2)歲,最大12歲,最小年齡5個月,年齡組分布為5~24個月30例,2~6歲22例,>6歲11例。入選標(biāo)準(zhǔn)符合:①麻疹疹斷標(biāo)準(zhǔn)[2];②無麻疹疫苗接種病史,既往無麻疹病史;③院外未使用抗生素以及抗病毒藥物;④無繼發(fā)感染。對照組為30名來我院保健門診檢查健康兒童,平均(6.6±1.5)歲。

        1.2 試驗方法 麻疹患兒入院當(dāng)日以及出疹后4 d各采靜脈血3 ml,加入肝素,離心1 500 r/min 2 min,分離血清與血漿,采用流式細胞儀(Fascalibur流式細胞儀器,美國BD公司)檢測T淋巴細胞亞群(),參照陳杰等[3]報道的方法。離心后的血清采用細胞因子試劑盒檢測(深圳晶美生物工程有限公司),具體方法依說明書。對照組檢測方法同上述。

        1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 實驗數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件統(tǒng)計,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 疹初與疹后T細胞亞群以及相關(guān)細胞因子檢查情況 麻疹患者T細胞在疹初下降,而在出疹后恢復(fù)正常,T細胞疹初有輕微上升,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。TL-2疹初明顯上升,疹后雖有下降但仍高于正常。TL-10在疹初、疹后均維持較高水平,TL-4、TL-6在疹后快速上升。檢測結(jié)果見表1。

        表1 疹初、疹后T細胞亞群與細胞因子檢出情況(±s)

        表1 疹初、疹后T細胞亞群與細胞因子檢出情況(±s)

        項目對照組(n=30) CD4+T(%)CD8+T(%)TL-2(μg/l)TL-4(μg/l)TL-6(μg/l)TL-10(μg/l)麻疹組(n=63)疹初35.3±2.1* 25.6±3.7 24.6±1.1* 2.8±1.4 4.1±1.5 7.6±1.5*疹后40.3±1.9 23.2±2.7 15.0±1.1* 5.4±1.2* 9.0±1.1* 9.7±1.9* 39.2±1.7 22.5±2.1 7.2±1.1 3.1±0.9 4.9±1.3 3.7±0.7

        2.2 各年齡段患者T細胞亞群與細胞因子疹初、疹后檢出情況 不同年齡段的患者,疹初、疹后T細胞亞群與細胞因子變化趨勢基本一致,年齡越小的患者,疹初T比例最低,出疹后最高,但不同年齡組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。檢測結(jié)果見表2。

        2.3 不同性別患者T細胞亞群與細胞因子疹初、疹后檢出情況 不同性別患者疹初、疹后T細胞亞群與細胞因子變化趨勢一致,無明顯性別差異。檢測結(jié)果見表3。

        表2 不同年齡段患者疹初、疹后T細胞亞群與細胞因子檢出情況(±s)

        表2 不同年齡段患者疹初、疹后T細胞亞群與細胞因子檢出情況(±s)

        項目>6歲(n=11)2~6歲(n=22)CD4+T(%)CD8+T(%)TL-2(μg/l)TL-4(μg/l)TL-6(μg/l)TL-10(μg/l)5~24個月(n=30)疹初34.9±3.9 26.0±6.7 23.2±3.1 2.9±1.6 4.3±1.5 7.4±2.5疹后41.1±3.9 22.4±5.1 14.6±5.1 5.9±1.7 8.6±2.5 10.4±4.2疹初35.7±4.7 25.1±4.5 26.5±4.8 2.8±1.8 3.5±1.7 7.6±2.8疹后39.8±5.4 23.5±4.1 15.9±5.7 4.9±1.8 9.5±3.7 9.1±3.8疹初35.5±4.9 25.7±5.1 24.5±5.8 2.8±1.8 4.8±2.7 8.2±3.1疹后39.1±4.3 24.5±4.7 14.1±6.8 5.1±2.3 9.1±3.5 9.0±3.6

        表3不同性別患者疹初、疹后T細胞亞群與細胞因子檢出情況(±s)

        表3不同性別患者疹初、疹后T細胞亞群與細胞因子檢出情況(±s)

        項目 男(n=45)出疹前35.4±3.7 25.7±4.1 24.9±3.1 2.7±1.4 4.2±1.6 7.5±2.3 CD4+T(%)CD8+T(%)TL-2(μg/l)TL-4(μg/l)TL-6(μg/l)TL-10(μg/l)出疹后40.5±2.1 22.9±2.8 14.9±4.1 5.3±1.5 8.8±1.6 9.4±2.4女(n=18)出疹前35.2±3.1 25.2±5.1 23.7±4.1 2.8±1.9 3.9±2.0 7.8±3.0出疹后39.9±4.3 24.1±3.7 15.5±3.9 5.5±2.2 9.4±2.5 10.3±3.5

        3 討論

        麻疹病毒屬副黏病毒,人類是唯一的自然宿主,感染后激發(fā)機體特異性免疫應(yīng)答,形成持久免疫力,此過程中T細胞發(fā)揮了重要作用,它是免疫應(yīng)答的關(guān)鍵細胞,胸腺缺失或發(fā)育不良的患者臨床表現(xiàn)更為嚴(yán)重[4]。T細胞依據(jù)其表面不同分子的表達,分為T以及NK細胞,其中細胞為輔助T細胞,參與機體細胞免疫與體液免疫,決定機體的整個免疫狀況。研究顯示,感染的早期階段下降,而T不變甚至?xí)黾?,引起T比值下降,機體免疫功能輕度抑制[5],本次研究也觀察到出疹早期下降以及輕度上升,出疹后恢復(fù)正常。既往認為是麻疹病毒感染后引起抑制性因子IL-4水平上升所致[2],但本次研究的結(jié)果卻顯示出疹早期IL-4水平低于正常,類似情況還見于巨細胞病毒以及呼吸道合包病毒感染早期階段,提示這種輕度免疫抑制可能是機體對病毒感染的一種非特異性免疫應(yīng)答,分泌的限制性Ts因子可能是早期免疫抑制的主要原因[6]。

        細胞因子由免疫細胞分泌,以自分泌以及旁分泌的形式發(fā)揮作用,因子之間相互拮抗、相互協(xié)調(diào),形成免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)。IL-2主要由TH1細胞分泌,促進T細胞各亞群的增殖、活化,誘導(dǎo)TH0細胞向TH1細胞轉(zhuǎn)化,促進TH1免疫發(fā)展。IL-4、6主要由TH2細胞分泌,誘導(dǎo)B細胞活化、增殖,促進TH2免疫。此外,IL-4還可促進Th0細胞向Th2細胞分化;IL-6刺激抗體分泌。這些因子水平的高低,反映了機體的免疫狀況。國內(nèi)愈蕙曾報道[7],成人麻疹免疫是TH1/TH2免疫共同參與的結(jié)果,本次研究也證實了這一點。在出疹的早期階段,IL-2水平遠高于正常,而IL-4、6低于正常,提示此階段TH1免疫占優(yōu)勢,出疹后4 d,IL-4、6水平明顯上升,高效價抗體已廣泛生產(chǎn),TH2發(fā)揮主導(dǎo)的作用,但值得注意的此時IL-2雖然較前有下降,但仍然高于正常,提示TH1免疫仍發(fā)揮著重要的作用,這種狀況可能更有利感染細胞內(nèi)的清除,但不清楚的這種高水平的IL-2可以維持多長時間。IL-10也由TH2細胞產(chǎn)生,作用除了抑制巨噬細胞的抗原遞呈和輔助T細胞應(yīng)答功能外,還可抑制Th0細胞向Th1細胞分化及細胞因子產(chǎn)生,在本次研究中一直處于較高水平,有研究認為這種高水平的IL-10來源于體內(nèi)的Trg細胞,其作用可能在于調(diào)節(jié)TH1/TH2免疫,此外還可能限制免疫反應(yīng)的進一步擴大,減少自身免疫性損傷,但能否成為判斷麻疹嚴(yán)重程度的指標(biāo)尚需進一步研究。

        另外,本次試驗也首次對不同年齡段、不同性別的麻疹患者T細胞亞群以及相關(guān)細胞因子進行了比較,發(fā)現(xiàn)麻疹患者T細胞亞群以及相關(guān)細胞因子變化趨勢與年齡、性別無關(guān),但年齡越小的患者,出疹早期體內(nèi)T比值越低,而疹后越高。提示年齡越小的患者免疫功紊亂可能越嚴(yán)重。

        綜上所述,麻疹患兒存在暫短、可逆的免疫抑制,這種抑制可能是機體對病毒感染的一種非特異性免疫反應(yīng)。TH1/TH2共同參與麻疹免疫,早期以TH1為主,后期TH2發(fā)揮重要作用,TL-10在麻疹免疫中發(fā)揮重要調(diào)控作用,年齡越小的患者,免疫功能紊亂可能越嚴(yán)重。

        [1]鄭煥英,劉 冷,郭 雪,等.珠江三角洲地區(qū)2004年流動兒童麻疹免疫狀況血清流行病學(xué)調(diào)查與分析[J].中國計劃免疫,2006,12 (1)∶35-37.

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        Changes of T cell subsets and related cytokines in children with measles.

        PAN Xiao-fen,LIU Yu-ling,LIN Guo-mo.Department of Pediatrics,Zhongshan Boai Hosptial Affiliated to Southern Medical University,Zhongshan 528400,Guangdong,CHINA

        ObjectiveTo investigate the immunization status in children with measles rash.MethodsFlow cytometry and ELISA was employed to investigate the changes of CD4+T,CD8+T,TL-2,TL-4,TL-6,TL-10 in early rash and after rash,and then compared with those in healthy children.ResultsT decreased,whileT increased in early rash,and returned to normal after rash.TL-2 increased significantly in early rash(P<0.01),and decreased after the rash,but still maintained high level(P<0.05).TL-4,TL-6 was low and increased immediately after the rash(P<0.05),and TL-10 always maintained a high level in early rash and after rash(P<0.05).All the changes had no relation with gender and age,but in younger patients,the younger the patients,the greaterT declined may be in the early rash.ConclusionThere is the brief reversible immunosuppression in children with measles,TH1 dominates the early while TH2 plays an important role after rash.TL-10 plays an important regulatory role in children with measles immunization.Immune disorders may be more serious in younger patients

        Measles;T lymphocyte subsets;Cell factor;Children

        R511.1

        A

        1003—6350(2011)14—095—03

        潘曉芬(1975—),女,廣東省興寧市人,主治醫(yī)師,學(xué)士。

        2011-04-10)

        ·檢驗與臨床·

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