張金標(biāo),鄭 航,尤長宣,羅榮城

(南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院,廣州 510515)

目前,手術(shù)、化療、放療等手段對肺癌的治療效果仍不盡人意。近年來,分子靶向治療取得了較好的療效。肺癌的發(fā)生、發(fā)展與機(jī)體的免疫狀態(tài)密切相關(guān),而T淋巴細(xì)胞亞群是構(gòu)成機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要因素,但靶向治療對患者免疫狀態(tài)的影響及與療效的關(guān)系研究較少。本研究觀察腺癌患者靶向治療前后外周血C、C、C/C以及C的表達(dá)變化,并探討其意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2008年 10月 ～2010年8月南方醫(yī)院腫瘤科收治并經(jīng)病理檢查證實(shí)的肺腺癌患者30例(肺癌組),男 23例,女7例;年齡 52～73歲;臨床分期為 Ⅲ ～Ⅳ期;均有上皮生長因子受體(EGFR)19或EGFR 21因子突變;PS評分≤2分。所有病例為初治晚期肺癌患者并一線接受易瑞沙靶向治療。健康志愿者 20例作對照組,男、女各 10例,年齡23～32歲。

1.2 靶向治療方法 30例肺腺癌患者接受易瑞沙靶向治療。采用易瑞沙標(biāo)準(zhǔn)治療方案,即 250 mg,口服,1次/d。治療前及治療后 2個月進(jìn)行影像學(xué)檢查,并根據(jù)RECIST標(biāo)準(zhǔn)及肺癌治療的功能性評估(FACT-L)標(biāo)準(zhǔn)來評價療效。

1.3 外周血T細(xì)胞亞群檢測 于靶向治療前1 d清晨及靶向治療2個月后1 d清晨取患者外周血 3ml,用淋巴細(xì)胞分離液常規(guī)分離單個核細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度為(1.5～2)×106/ml。50μl單核細(xì)胞分別加入FITC標(biāo)記的C、PE標(biāo)記的C和PE標(biāo)記的C,避光孵育35m in,PBS洗滌3次,離心沉淀后棄上清,加入PBS 200μl重懸細(xì)胞,用流式細(xì)胞儀檢測。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件。用方差分析對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),均數(shù)比較用t檢驗(yàn)。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對照組與肺癌組治療前外周血T淋巴細(xì)胞亞群比較 見表1。

表1 對照組與肺癌組治療前外周血T淋巴細(xì)胞亞群比較(±s)

表1 對照組與肺癌組治療前外周血T淋巴細(xì)胞亞群比較(±s)

注：與對照組相比,＊P＜0.01,△P＜0.05

2.2 肺癌組治療前后外周血T淋巴細(xì)胞亞群比較見表2。

表2 肺癌組治療前后外周血T淋巴細(xì)胞亞群比較(±s)

表2 肺癌組治療前后外周血T淋巴細(xì)胞亞群比較(±s)

注：與治療前相比,＊P＜0.01,△P＜0.05

2.3 療效 肺癌組治療后臨床獲益 21例,其中18例CD+4上升,17例CD+8下降,19例CD+4/CD+8上升,明顯多于CD+4下降、CD+8上升、CD+4/CD+8下降者(P均＜0.05)。

3 討論

正常人體內(nèi)環(huán)境保持穩(wěn)態(tài),當(dāng)腫瘤發(fā)生時會引起體內(nèi)內(nèi)分泌、免疫系統(tǒng)的變化[1,2]。NK細(xì)胞和 T淋巴細(xì)胞是機(jī)體抗惡性腫瘤的主要功能細(xì)胞。C和CD+8在局部抗腫瘤免疫中處于機(jī)體免疫系統(tǒng)與腫瘤相互作用的最前沿,其組成和功能等在一定程度上反映了機(jī)體抗腫瘤反應(yīng)的性質(zhì)、強(qiáng)度和總體水平[3]。

CD+4細(xì)胞是人體抗腫瘤免疫的重要組成部分,它所產(chǎn)生的IL-2、IL-4、IL-5、INF-1是NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞活化所必需的。另外, CD+4細(xì)胞還可以通過INF-γ介導(dǎo)的機(jī)制直接殺傷腫瘤細(xì)胞[4,5],CD+4細(xì)胞數(shù)量的變化有可能導(dǎo)致整個機(jī)體抗腫瘤免疫的變化。本研究顯示,肺癌患者靶向治療前 CD+4水平低于對照組,而靶向治療后CD+4水平較前回升。

CD+8為抑制性 T淋巴細(xì)胞,可對靶細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒作用,抑制免疫反應(yīng),正常情況下與CD+4保持動態(tài)平衡,維持機(jī)體正常的免疫功能,而它的大幅度上升多意味著免疫功能受抑制。Andreas等[6]應(yīng)用實(shí)時熒光PCR技術(shù)測定31例肺癌患者腫瘤組織中的CD+8,發(fā)現(xiàn)其是癌旁組織的2.5倍。CD+4/CD+8主要反應(yīng)機(jī)體細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)功能。本研究發(fā)現(xiàn),肺癌患者外周血 CD+4/CD+8在靶向治療前高于對照組,靶向治療 2個月后,CD+4、CD+4/CD+8較前明顯提高,而 CD+8細(xì)胞比例下降。提示靶向治療后,肺癌患者受抑制的免疫狀態(tài)得到改善,靶向藥物易瑞沙可能加強(qiáng)了機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)功能。

易瑞沙是一種選擇性EGFR-TKI抑制劑,它可以阻斷EGFR酪氨酸激酶的活性,抑制腫瘤生長、轉(zhuǎn)移及血管生長,使癌細(xì)胞發(fā)生凋亡,目前已成為晚期肺癌的標(biāo)準(zhǔn)二線治療藥物或存在EGFR突變患者的一線治療藥物。肺癌靶向治療研究證實(shí)了易瑞沙能顯著延長EGFR突變患者的PFS,而在2010年的歐洲腫瘤內(nèi)科學(xué)會(ESMO)年會上公布的最終的總生存(OS)結(jié)果卻未顯示出優(yōu)勢。

本研究結(jié)果表明,經(jīng)易瑞沙靶向治療后,大多數(shù)臨床獲益的肺癌患者外周血CD4+上升、CD8+下降、CD4+/CD8+上升,提示患者病情的進(jìn)展可能與 T淋巴細(xì)胞的減少導(dǎo)致的腫瘤細(xì)胞的逃逸有關(guān),病情的改善可能與T淋巴細(xì)胞增多、免疫應(yīng)答增強(qiáng)有關(guān)。

[1]Castiglione F,Piccoli B.Cancer immunotherapy,mathematical modeling and optimal control[J].JTheor Biol,2007,247(4)：723-732.

[2]Buckanovich RJ,Facciabene A.Endothelin B receptormediates the endothelial barrier to T cell hom ing to tumors and disables immune therapy[J].Nat Med,2008,14(1)：28-36.

[3]Hu Z,Lin D,Yuan J,et al.Overexpression of osteopontin is associated with more aggressive phenotypes in human non-small cell lung cancer[J].Clin Cancer Res,2005,11(13)：4646-4652.

[4]曾瑞紅,房桂珍,魏林,等.CD4+T細(xì)胞在腫瘤免疫治療中的應(yīng)用[J].細(xì)胞生物學(xué)雜志,2008,30(1)：30-34.

[5]Zhang S,Bernard D,Khan WI,etal.CD4+T-cell-mediated antitumor immunity can be uncoupled from autoimmunity via the STAT4 /STAT6 signaling axis[J].Eur J Immunol,2009,39(5)：1252-1259.

[6]Andreas T,Mirjana U,Reinhard D,et al.Immune activation status of CD8+T cells in filtrating non-small cell lung cancer[J].Lung Cancer,2004,44(2)：143-147.