李蘭英

湖北省麻城市中醫(yī)醫(yī)院，湖北 麻城 438300

茶葉是人們?nèi)粘Ｉ钪凶畛Ｒ姷娘嬃希鼘θ祟惥哂卸喾矫娴谋＝」δ?。如：茶葉可以抗炎癥、防癌;茶葉還具有抗衰老、改善血循環(huán)的狀態(tài)、促進(jìn)消化功能、阻止亞硝酸鹽在體內(nèi)合成、抗尼古?。?]等作用。同時(shí)茶葉還可殺菌，抑制致齲菌合成不溶性葡聚糖［2]有良好的防齲功能。綠茶能抑制變形鏈球菌的研究已做了很多，茶葉中的提取物茶多酚可抑制多種細(xì)菌已有報(bào)道［3、4]。但茶葉的產(chǎn)地不同，加工、炮制方法不同其內(nèi)在成分也會(huì)有所變化。不同茶葉的水浸液對口腔致病菌有何影響尚未見報(bào)道。我們選用普通綠茶、龍井茶、紅茶、茉莉花茶、紫陽茶、烏龍茶6種常見茶葉的水浸液對齲齒致病菌和牙周炎可疑致病菌進(jìn)行研究，探討飲用不同的茶防齲的作用及防牙周病的可能性。

1 材料和方法

1.1 材料 茶葉：普通綠茶 (杭州茶廠，一級袋裝);龍井茶茶 (福州茶廠，羅星塔牌);紫陽茶 (紫陽天然富硒茶廠);烏龍茶 (福建安溪茶廠，安溪鐵觀音)。

細(xì)菌：牙齦卟啉單胞菌 (Porphynomonas gingivalis，P．g，47A －1); 中間 普氏 菌 (Prevatellaintermedia，P．i，ATCC25611);變形鏈球菌 (Streptococcus mutans，S．m，Ingbritt c型);具核梭桿菌 (Fusobacterium nucleatum，F(xiàn)．n，ATCC 10953)。

1.2 方法

1.2.1 茶葉水浸液制備 取4.8g茶葉浸泡于100ml蒸餾水中，攪拌，煮沸后，在無菌狀態(tài)下靜放1h后，過濾，進(jìn)行倍比稀釋為 5個(gè)濃度 (即 48mg/ml、24mg/ml、12mg/ml、6mg/ml、3g/ml)。

1.2.2 菌液制備 變鏈菌選用MSB固體培養(yǎng)基，37℃微厭氧培養(yǎng)48h后，取2接種環(huán)菌放入2mlMS液體培養(yǎng)基中，37℃微厭氧培養(yǎng)24h后待用;牙齦卟啉單胞菌、中間普氏菌、具核梭桿菌選用CDC固體培養(yǎng)基，37℃厭氧培養(yǎng)5天后，取2接種環(huán)菌放入2mlCDC液體培養(yǎng)基中，37℃厭氧培養(yǎng)48h后待用。

抑菌試驗(yàn)：將牙齦卟啉單胞菌、中間普氏菌、具核梭桿菌液均勻涂布于CDC固體培養(yǎng)基表面 (變鏈菌用MSB固體培養(yǎng)基)，均勻放上5個(gè)不銹鋼管 (內(nèi)徑：6mm，外徑：8mm，高：10mm)，分別加入不同濃度的茶水浸液，37℃厭氧 (變鏈微厭氧)培養(yǎng)48h后，測量不銹鋼管周圍的抑菌環(huán)直徑大小 (陰性對照為注射用水，直徑小于10mm的為陰性)，測抑菌環(huán)的最大直徑和最小直徑取均值，每組抑菌試驗(yàn)重復(fù)3次，取均值。

2 結(jié)果

各種茶葉不同濃度水浸液的抑菌結(jié)果。

3 討論

我國是產(chǎn)茶大國，民間飲茶歷史悠久，飲茶的優(yōu)及與人體健康關(guān)系已有了多方面的研究。近年來茶葉防齲的研究發(fā)展很快，早期防齲研究認(rèn)為茶葉中含有的氟元素起重要作用，可降低釉質(zhì)中羥基磷灰石的溶解，改善晶體結(jié)構(gòu)，使已脫鈣的釉質(zhì)再礦化，氟元素還可抑制致齲菌生長，抑制酶的活性，減少細(xì)菌對釉面的吸附等［5]。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，茶葉中還有很多其它物質(zhì)，也能防齲［6]。國內(nèi)外已對茶葉的多種有效成分進(jìn)行分析及純化，并逐步深化研究茶葉的功效及作用機(jī)制。

實(shí)驗(yàn)選用的變形鏈球菌是公認(rèn)的主要致齲菌，可引起牙齒任何部位的齲損;選用的牙齦卟啉單胞菌、中間普氏菌、具核梭桿菌是牙周炎的可疑致病菌，在牙周病的發(fā)病和病情進(jìn)展中起重要作用;選這4種菌作為齲病、牙周病的代表菌。

本研究證明普通綠茶、龍井茶、紅茶、茉莉花茶、紫陽茶、烏龍茶較高濃度的水浸液 (24mg/ml)均對變鏈菌有抑菌作用;普通綠茶、紅茶、茉莉花茶、烏龍茶的水浸液在飲用濃度 (12mg/ml)對變鏈菌有抑菌作用 (飲用濃度：普通袋裝茶葉多為3克/包，沖泡250ml1杯的水中);只有普通綠茶水浸液在低于飲用濃度 (6mg/ml)仍對變鏈菌有抑菌作用。與謝小梅等［2]對綠茶水浸液抑制變鏈菌的結(jié)果比較，優(yōu)于其實(shí)驗(yàn)后果，其報(bào)道最佳濃度為13.5g/L。普通綠茶和紅茶水浸液在12mg/ml的濃度對具核梭桿菌有很好的抑菌效果;普通綠茶和茉莉花茶的水浸液濃度在48mg/ml對牙齦卟啉單胞菌有抑菌作用。高濃度 (48mg/ml)的普通綠茶水浸液對牙齦卟啉單胞菌、中間普氏菌、變形鏈球菌、具核梭桿菌均有抑菌作用;只有普通綠茶水浸液在飲用濃度即對變鏈菌和具核梭桿菌有抑菌作用。這說明飲茶不僅能防齲，對牙周炎的預(yù)防可能也有一定作用。

茶葉的抑菌機(jī)制與其中含的有效抑菌成分有關(guān)，茶葉中茶多酚和茶色素對口腔主要致病菌的抑菌作用的報(bào)道已很多［3、4、7]，綠茶的主要抗菌殺菌物質(zhì)是綠茶多酚 (Chinese green tea polyphenois，CTP)，占茶葉干重的 25%［8、9]，其具有較強(qiáng)的抗菌消炎作用［1]，可抑制口腔中變形鏈球菌、粘性放線菌、唾液鏈球菌等多種細(xì)菌的生長［3、4、10]，臨界抑菌濃度為0.25%～0.55%，濃度增加，抑菌效果也增強(qiáng)，機(jī)理為凝固蛋白質(zhì)，CTP能與菌體蛋白質(zhì)結(jié)合而導(dǎo)致細(xì)菌死亡［1]。使用0.2%的綠茶茶多酚溶液漱口刷牙還可以有效地抑制牙菌斑的形成，且?guī)缀醪划a(chǎn)生耐藥性［8]。而烏龍茶中提取的酚類化合物 (Oolong tea extract，OTE)抑菌作用更強(qiáng)，其活性成分為烏龍茶所獨(dú)有［11]。紅茶抑菌功效國外也正在研究。茶葉中含有豐富的無機(jī)礦物質(zhì)元素，有報(bào)道氟元素可抑制致齲菌生長［5]，有些金屬鹽如：鋅、銅、汞、鎳對口腔致齲菌有良好的殺滅作用［12]，還有一些揮發(fā)性物質(zhì)，如：烴、醇、酮、醛、醚、酸等，有中度抗菌活性，抗菌譜廣，能抑制多種細(xì)菌，特別是變鏈菌生長，其中，橙花叔醇 (nerolidol) 抗菌力最強(qiáng)［9]。

茶葉的產(chǎn)地不同，制作工藝、炮制方法不同，茶葉中抑菌的有效成分也有所改變，普通綠茶抑菌效果高于其它茶葉，粗制的老葉綠茶抑菌作用強(qiáng)于精制嫩葉綠茶 (即普通綠茶優(yōu)于龍井茶)，可能茶葉的成熟度與成分有所變化，有報(bào)道老茶葉氟含量高［13]，但對CTP含量有無變化尚無報(bào)道。紫陽茶也是一種綠茶，它產(chǎn)于陜西省紫陽縣，是我國已發(fā)現(xiàn)的2個(gè)天然富硒產(chǎn)茶區(qū)之一［1]，它雖然含有豐富的硒元素，對預(yù)防心血管疾病、防癌有一定作用，但抑菌并非最佳;有報(bào)道指出其可促齲病發(fā)生［5]。

總之，目前已知茶葉中約含有600多種化學(xué)成分，有些成分的作用和機(jī)理尚不清楚，這些物質(zhì)同存于茶葉中，并協(xié)同發(fā)揮抑菌作用。本研究通過實(shí)驗(yàn)證明茶葉水浸液可抑制口腔多種致病微生物，有可能改善口腔微生態(tài)環(huán)境。飲茶能有效地降低齲病的發(fā)生，可否預(yù)防牙周疾病還有待深入研究。