張海波 葉景郁

(唐山市第三醫(yī)院 河北 唐山 063100)

內(nèi)皮素與腦血管病的臨床研究

張海波 葉景郁

(唐山市第三醫(yī)院 河北 唐山 063100)

目的探討急性腦卒中患者血漿中內(nèi)皮素(ET)濃度變化與腦卒中的關(guān)系。方法篩選40名除外心腦血管疾病及其他系統(tǒng)疾病的健康人為對(duì)照組,將40例隨機(jī)選擇新入院的腦梗死和腦出血(CT證實(shí))各20例作為實(shí)驗(yàn)組,分成腦梗死組和腦出血組,進(jìn)行放免測(cè)定。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組腦梗死組血漿ET1濃度2.98～3.87pg/mL,平均ET1值為3.059pg/mL。腦出血組血漿ET1濃度2.98～5.87pg/mL,平均血漿ET1值為4.8605pg/mL。腦出血的平均ET值高于腦梗死的平均ET值(t=7.3842,P<0.001)。腦梗死的ET值與對(duì)照組的ET值差別不顯著,三者的血漿ET值均與年齡、性別無關(guān)。

內(nèi)皮素 腦梗死 腦出血

內(nèi)皮素(Endothelin,ET)微血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌的具有強(qiáng)烈縮血管作用的多肽類物質(zhì),由21個(gè)氨基酸組成,在體內(nèi)有3種(ET1,ET2,ET3),廣泛分布在機(jī)體的心血管系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng),ET通過升高神經(jīng)組織細(xì)胞內(nèi)的鈣濃度和激活興奮性氨基酸而影響血管張力和神經(jīng)系統(tǒng)功能,其生物學(xué)意義既促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的有絲分裂和平滑肌細(xì)胞增殖及縮血管作用。

1 臨床資料

1.1 一般資料

篩選40名除外心腦血管疾病及其他系統(tǒng)疾病的健康人為對(duì)照組,年齡19～71歲,男女之比為2∶1.8,平均血漿ETn-1值為3.42pg/mL,另外隨機(jī)選擇新入院的腦梗死和腦出血(CT證實(shí))各20例,在入院用藥前采肘靜脈血5mL,將血置于含10%EPTA60uL和100uL抑肽酶試管中混勻,4C3000rpm離心10min,取出血漿2mL加0.1%TPA6毫升混勻,30Hrpm X 20min離心,取上清溶液加入預(yù)先處理好的(30mL蒸餾水含0.1%TFA的75%乙腈,再加30mL蒸餾水洗脫sep-pakc18層析柱(waters),而后用30mL蒸餾水沖洗,再加入含0.1%TFA的75%乙腈洗脫并收集,將收集溶液吹干,-30℃保存測(cè)定時(shí)用緩沖液A(0.1MH7.4的PRS內(nèi)含0.1%BSA,0.1%NaH3/0.1%NaCL、0.1%tritorx-100)復(fù)溶待測(cè)。

1.2 ET-1抗血清

應(yīng)用解放軍總醫(yī)院老年病研究室產(chǎn)品ET-1抗血清最終滴度為1∶66000。

1.3 125I-ET-1的制備

解放軍總醫(yī)院老年病研究室產(chǎn)品,標(biāo)記物的比度為1350ci/mmol。

1.4 放免測(cè)定

將100uL復(fù)溶血樣或標(biāo)準(zhǔn)液與抗體置于緩沖液A中,在4℃浮華20～24h,總反應(yīng)體積為300uL,最后用的抗體加PEC法分離結(jié)合和游離的125I-ET-1,據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品管的B/BD面分?jǐn)?shù)計(jì)算,每毫升血漿中ET-1免疫活性物質(zhì)以pg/mL表示。

1.5 標(biāo)準(zhǔn)品

ET-1為美國(guó)(Peninsula Lobaralo ralories,INC)。

2 結(jié)果

腦梗死組年齡47～74歲,平均年齡62.05歲,男10例,女10例,血漿ET1濃度2.98～3.87pg/mL,平均血漿ET1值為3.509pg/mL.腦出血組年齡41～73歲,平均年齡61.25歲,男10例。女10例,血漿ET1濃度2.98～5.87pg/mL,平均血漿ET1值為4.8605pg/mL。腦出血的平均ET值高于腦梗死的平均ET值(t=7.3842,P<0.01)。

3 討論

本組20例腦梗死病人,測(cè)定期用藥前的血漿ET1濃度,均值3.50pg/mL,與40例正常人血漿ET濃度對(duì)照值3.42pg/mL,無明顯差異,此可能為例數(shù)少,ET1神經(jīng)組織中含量少或其他原因有待進(jìn)一步研究,國(guó)外報(bào)告ET1多分布在機(jī)體心血管系統(tǒng),ET2、ET3多分布中樞神經(jīng)系統(tǒng)。當(dāng)心肌梗死時(shí),血漿中ET濃度升高,從而促進(jìn)心、腎、腦的缺血性損傷,同時(shí)由于血栓素和環(huán)化酶的作用,促進(jìn)腦血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌ET。國(guó)外報(bào)告急性缺血性腦血管病(ICVD)患者的血漿ET1增高,可能為應(yīng)激反應(yīng)是周身血管系統(tǒng)內(nèi)皮細(xì)胞分泌ET增多,腎上腺素可誘發(fā)ET釋放,受損區(qū)域內(nèi)神經(jīng)組織和局部血管受損,受損血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生ET增多,ET1從受損的微血管的內(nèi)皮細(xì)胞溢出,使血漿ET1增高。

本文20例腦出血病人的血漿ET1的含量高于腦梗死組合對(duì)照組有顯著差異(P<0.01).分析其原因可能為:(1)腦局部出血所致全身性應(yīng)激反應(yīng);(2)局部出血血管內(nèi)皮細(xì)胞受損使腎上腺素、凝血酶、轉(zhuǎn)變生長(zhǎng)因子(TGFB)等增多,促進(jìn)ET生成;(3)出血塊中其他縮血管物質(zhì)刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放ET;(4)血管內(nèi)皮細(xì)胞受損刺激ET釋放;(5)其他血管活性物質(zhì)引起血管痙攣,使血和內(nèi)皮細(xì)胞受到刺激大量釋放ET,由于腦出血的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷不僅刺激ET的合成和釋放,同時(shí)還能增加血管對(duì)ET3反應(yīng)性,產(chǎn)生血管痙攣其結(jié)果促進(jìn)神經(jīng)組織細(xì)胞缺血缺氧而壞死,其機(jī)制可能為ET1增加細(xì)胞內(nèi)肌醇-1,4,5-三磷酸(IP3)及細(xì)胞內(nèi)游離鈣濃度,IP3引起細(xì)胞內(nèi)鈣離子釋放和ET激活細(xì)胞外鈣內(nèi)流,PKC(蛋白激酶)引起血管收縮。

[1]貢心燕.內(nèi)皮素-一類新的血管收縮肽[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)藥學(xué)分冊(cè),1993，1:7.

[2]楊金升.血管內(nèi)皮細(xì)胞與腦血管病[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)腦血管疾病分冊(cè),1993，1:1.

R54

A

1674-0742(2011)08(c)-0096-01

2011-06-18