方建紅 姜晶 王桂喜 李玲

(青島市城陽人民醫(yī)院婦產(chǎn)科 山東青島 266109)

早期自然流產(chǎn)的原因較為復雜,有害因素干擾早期胚胎發(fā)育是導致流產(chǎn)的重要原因之一。近些年,隨著HPVB19檢測手段的提高,HPVB19與不良妊娠結(jié)局的關(guān)系日益受到重視。曾有報道HPVB19可能與早期自然流產(chǎn)有關(guān)[1]。為了探討HPVB19感染與妊娠早期自然流產(chǎn)的關(guān)系,本文通過ELISA方法檢測早期自然流產(chǎn)孕婦和正常人工流產(chǎn)孕婦血清中HPVB19-IgM及IgG的含量,比較兩者之間的差異,報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

(1)對象:選取2009年8月至2009年12月于我院門診檢查確診的早期自然流產(chǎn)患者52例作為研究組。研究組的52例均有1～3次不明原因流產(chǎn)史,平均年齡為(27.0±2.2)歲,流產(chǎn)時妊娠天數(shù)為(38～83)d,平均(62.13±21.20)d,同時以同期、同地隨機選取人工流產(chǎn)的健康孕婦45例作為對照組,平均年齡為(24.9±1.6)歲,流產(chǎn)時妊娠天數(shù)為(45～81)d,平均為(63.25±20.07)d,2組年齡和妊娠天數(shù)具有可比性(P＞0.05),所有病例均行實驗室診斷排除了染色體、免疫因素、弓形蟲、巨細胞病毒、單純皰疹病毒感染等原因引起的流產(chǎn)。(2)標本:無菌留取上述研究對象靜脈血2～3mL,凝固后分離血清,-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試劑及方法

HPVB19-IgM及IgG的檢測:采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)方法檢測,試劑盒購自德國IBLHamburg公司。主要步驟:(1)待檢血清1∶100稀釋,取100μL加入重組HPV B19抗原包被的反應孔中,并加入類風濕因子吸附劑5μL用以降低假陽性率,37℃孵育1h;(2)洗滌后加過氧化物酶標記羊抗人IgM及IgG多克隆抗體100μL;(3)加TBM底物液100μL并終止;(4)結(jié)果判定以標準抗體液吸光度±20%標準差(s)為界限值,待檢孔吸光度大于上限為陽性。

1.3 統(tǒng)計學處理

統(tǒng)計學軟件采用SPSS 16.0,采用Fisher確切概率法檢驗、χ2檢驗,危險度表示為OR值、95%CI的形式,P＜0.05認為有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 2組HPVB19-IgM的檢驗結(jié)果

在研究組52例早期自然流產(chǎn)的孕婦中,HPVB19-IgM陽性者為12例,陽性率為23.08%,而對照組45例孕婦血清中HPVB19-IgM陽性者僅為3例,陽性率只有6.67%,2組間差異有統(tǒng)計學意義,P=0.046。研究組HPVB19-IgM陽性的概率是對照組的4.20倍(95%CI 1.10-15.99)。

2.2 2組HPV B19-IgG的檢驗結(jié)果

在研究組52例早期自然流產(chǎn)的孕婦中,HPVB19-IgG陽性者為17例,陽性率為32.69%,而對照組45例孕婦血清中HPVB19-IgG陽性者為13例,陽性率28.89%,2組間差異無統(tǒng)計學意義,χ2=0.16,P=0.69。

4 討論

自然流產(chǎn)的發(fā)病率占全部妊娠的10%～15%,多數(shù)為早期流產(chǎn)[2]。導致流產(chǎn)的原因很多,遺傳基因缺陷是最常見的原因,46%～54%的自然流產(chǎn)與胚胎染色體異常有關(guān),此外免疫、內(nèi)分泌、解剖、感染及理化環(huán)境等因素均與流產(chǎn)的發(fā)生有關(guān)。其中,感染因素特別是HPVB19感染越來越受到人們的關(guān)注。

HPVB19隸屬于細小病毒科紅細胞病毒屬成員,為單股負鏈無包膜DNA病毒,DNA約長5600bp,是體積最小、結(jié)構(gòu)最為簡單的DNA病毒之一。Cossart于1975年首次偶然在編號為B19的獻血員血液中發(fā)現(xiàn)的[3]。與其他病毒性感染相似,感染HPVB19后會出現(xiàn)特異性抗體B19V-IgM,此抗體是近期感染的重要證據(jù),一般B19V-IgM在感染B19V后3～10d出現(xiàn),30d達高峰,持續(xù)3～4個月;B19V-IgG于感染后2周出現(xiàn),持續(xù)數(shù)年,而單獨檢測B19V-IgG對診斷近期感染無意義,僅可證明曾經(jīng)感染過B19V,并對B19V感染有一定的免疫力[4]。故本研究通過監(jiān)測B19V-IgM和B19V-IgG來了解孕婦近期及以往感染HPVB19的狀況。

研究證明HPV B19的宿主細胞是紅細胞的祖細胞,其通過與紅系祖細胞上P抗原受體結(jié)合而進入細胞,使紅系造血細胞受到破壞,可引起傳染性紅斑、急性再生障礙性貧血、血小板減少性紫癜等多種疾病。HPVB19感染呈世界性分布,人類感染后多數(shù)呈亞臨床感染,這種感染具有自限性。感染的臨床表現(xiàn)因宿主免疫學和血清學狀態(tài)不同而不同。近來的研究證明P抗原不僅存在于紅系祖細胞,還可以存在于巨噬細胞、內(nèi)皮細胞、部分孕婦的胎盤細胞和胎兒肝臟及心肌細胞上。感染了HPVB19的孕婦可能會出現(xiàn)病毒血癥、皮疹、淋巴節(jié)腫大、關(guān)節(jié)炎、皮膚紅斑、丘疹、非特異性低熱、白細胞降低等。1984年Brown首次報道HPVB19可通過胎盤屏障,進入羊膜腔感染胎兒[5],胎兒感染HPVB19后可能累及胎兒造血系統(tǒng),使紅系造血細胞受到破壞,胎兒發(fā)生造血危象、嚴重貧血、水腫及神經(jīng)系統(tǒng)畸形等,尤其是在孕早期感染HPV B19可引起胎兒水腫和死胎[6]。關(guān)于早期自然流產(chǎn)與HPVB19感染的關(guān)系曾有一些報道,認為兩者之間存在某些聯(lián)系[1,7],瑞典的研究發(fā)現(xiàn),感染HPVB19的孕婦患早期流產(chǎn)的風險性是未感染組的3.76倍[8]。我們尚沒有本地區(qū)大規(guī)模的HPVB19感染率的相關(guān)數(shù)據(jù),但是通過我們區(qū)域性52例妊娠早期自然流產(chǎn)的調(diào)查,發(fā)現(xiàn)患者血清中HPVB19VIgM陽性率為23.08%,明顯高于對照組的6.67%(P＜0.05);研究組近期感染HPVB19V的概率是對照組的4.20倍(95%CI 1.10-15.99),表明妊娠早期自然流產(chǎn)與近期HPVB19存在密切聯(lián)系。

綜上所述,妊娠期前后 HPVB19感染與妊娠不良結(jié)局有密切關(guān)系。不僅與胎兒畸形、胎兒水腫、死胎等有關(guān),也是妊娠早期自然流產(chǎn)的原因之一。因此,預防HPVB19感染以及孕前或孕早期HPVB19-IgM的篩查對預防不良妊娠結(jié)局的發(fā)生和優(yōu)生優(yōu)育有重要意義。參考文獻

[1]吳福根,林峰.人細小病毒B19感染對胎兒的影響[J].中國婦幼保健,2005,20(8):1023.

[2]樂杰.婦產(chǎn)科學[M].第6版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:89～92.

[3]CossartYE,Cant B,Field AM,et al.Parvovirus-like particle in human sera[J].Lancet,1975,1(7898):72.

[4]Cubel RCN,Oliveira SA,Brown DWG,et al.Diagnosis of parvoviurs B19infection by detection of specific immunoglobulin Mantibody in saliva[J].J Clin Microbiol,1996,34(1):205～207.

[5]Brown T,Anand A,Ritchie LD,et al.Intrauterine parvovirus infectionassociated with hydrops fetalis[J].Lancet,1984,2(8410):1033.

[6]de Jong EP,de Haan TR,Kroes AC,et al.Parvovirus B19 infection in pregnancy[J].J Clin Virol,2006,36(1):1～7.

[7]Shmoys S,Kaplan C.Parvovirus and pregnancy[J].Clin Obstet Gynecol,1990,33(2):268～275.

[8]Johansson S,Buchmayer S,Harlid S.Infection with Parvovirus B19 and Herpes viruses in early pregnancy and risk of second trimester miscarriage or very preterm birth[J].Reproductive toxicology,2008,26(3～4):298～302.