張軍，祁娟，郭義

（中國醫(yī)科大學(xué) 附屬第一醫(yī)院 1.中國醫(yī)科大學(xué)肺癌中心；2.腫瘤研究所分子靶向治療研究室；3.胸外科，沈陽 110001）

近來研究表明，肝癌衍生生長因子（hepatoma-derived growth factor，HDGF）、去整合素-金屬蛋白酶 9（a disintegrin and metalloprotease9，ADAM9）在多種惡性腫瘤組織中呈現(xiàn)高表達(dá)，其高表達(dá)與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移及預(yù)后相關(guān)。我們的前期研究發(fā)現(xiàn)應(yīng)用siRNA沉默非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）細(xì)胞中HDGF能顯著下調(diào)ADAM9等基因的表達(dá)，抑制NSCLC細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移，推測HDGF可能通過調(diào)節(jié)ADAM9發(fā)揮其促進(jìn)NSCLC侵襲轉(zhuǎn)移作用［1~3］。本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測HDGF蛋白和ADAM9蛋白在手術(shù)切除NSCLC組織標(biāo)本中的表達(dá)情況，探討HDGF和ADAM9在NSCLC中異常表達(dá)、相關(guān)關(guān)系及其在NSCLC侵襲轉(zhuǎn)移及術(shù)后預(yù)后判定中的臨床意義。

1 資料與方法

選取手術(shù)切除NSCLC（158例）及正常對照肺組織（12例）作為研究對象。應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P法檢測HDGF蛋白和ADAM9蛋白在NSCLC組織和正常對照肺組織中的表達(dá)，將肺癌組織中HDGF蛋白和ADAM9蛋白表達(dá)水平與患者性別、年齡、組織學(xué)類型、病理分期、腫瘤原發(fā)灶大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況等臨床病理特征進(jìn)行相關(guān)性分析，并對其表達(dá)水平與NSCLC預(yù)后的關(guān)系進(jìn)行生存分析。

2 結(jié)果

與12例正常對照肺組織相比，在158例NSCLC組織中，HDGF蛋白表達(dá)水平（核表達(dá)平均指數(shù)）顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000）。158例NSCLC中，HDGF高表達(dá)組病例5年生存率顯著低于HDGF低表達(dá)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.009）。應(yīng)用直線相關(guān)分析方法分析HDGF表達(dá)與NSCLC生存時(shí)間的關(guān)系，結(jié)果表明NSCLC中HDGF核表達(dá)指數(shù)與經(jīng)手術(shù)治療NSCLC術(shù)后生存時(shí)間之間呈負(fù)相關(guān)。應(yīng)用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型進(jìn)行多因素分析，引入模型的因素有性別、年齡、組織學(xué)類型、術(shù)后病理分期、T因子、N因子和HDGF表達(dá)等，結(jié)果顯示術(shù)后病理分期和HDGF表達(dá)可以作為經(jīng)手術(shù)治療NSCLC患者預(yù)后判定的獨(dú)立因素（詳見另文報(bào)告［4］）。

分層分析提示，在63例行肺葉切除Ⅰ期NSCLC中，34例（54.0%）呈HDGF低表達(dá)，其5年生存率為84.7%；29例（46.0%）呈HDGF高表達(dá)，其5年生存率為55.6%；HDGF高表達(dá)組病例5年生存率顯著低于HDGF低表達(dá)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.009）。

多因素分析結(jié)果顯示HDGF蛋白表達(dá)可以作為Ⅰ期（肺葉切除）NSCLC的獨(dú)立預(yù)后因素。

在相應(yīng)的 63例行肺葉切除Ⅰ期NSCLC中，34例（54.0%）呈現(xiàn)ADAM9蛋白高表達(dá)；在12例正常對照肺組織中，ADAM9蛋白的表達(dá)均較低（均屬于ADAM9蛋白低表達(dá)組），其ADAM9蛋白高表達(dá)率為0%（0/12）；ADAM9蛋白在NSCLC組織中的高表達(dá)率顯著高于正常對照肺組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.001）。

在63例行肺葉切除Ⅰ期NSCLC中，ADAM9蛋白高表達(dá)組病例5年生存率（56.9%）顯著低于ADAM9蛋白低表達(dá)組（88.7%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.015）。

多因素分析結(jié)果顯示ADAM9蛋白表達(dá)可以作為Ⅰ期（肺葉切除）NSCLC的獨(dú)立預(yù)后因素。

應(yīng)用直線相關(guān)分析方法，檢測HDGF蛋白和ADAM9蛋白在NSCLC組織中表達(dá)的相關(guān)性，結(jié)果表明，在63例Ⅰ期NSCLC中，HDGF蛋白和ADAM9蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)，Pearson 相關(guān)系數(shù) r=0.547（P=0.000）。

3 討論

上述結(jié)果提示：（1）HDGF在中國人NSCLC中呈現(xiàn)高表達(dá)；HDGF高表達(dá)代表預(yù)后不良。HDGF表達(dá)可以作為經(jīng)手術(shù)治療NSCLC患者預(yù)后判定的獨(dú)立因素；（2）ADAM9在NSCLC中呈現(xiàn)高表達(dá)；ADAM9高表達(dá)與Ⅰ期NSCLC患者預(yù)后不良有關(guān)，可以作為Ⅰ期（肺葉切除）NSCLC的獨(dú)立預(yù)后因素；（3）HDGF和ADAM9在Ⅰ期NSCLC中的表達(dá)呈顯著的正相關(guān)關(guān)系，二者均可作為早期NSCLC預(yù)后不良的分子標(biāo)志物，提示HDGF和ADAM9在非小細(xì)胞肺癌侵襲轉(zhuǎn)移過程中具有一致的協(xié)同作用。

［1］Zhang J，Ren H，Yuan P，et al.Down-regulation of hepatoma-derived growth factor inhibits anchorage-independent growth and invasion of non-small cell lung cancer cells［J］.Cancer Res，2006，66（1）：18－23.

［2］Zhang J，Mao L.siRNA targeting hepatoma-derived growth factor（HDGF）inhibits growth of non-small cell lung cancer in xenograft models.Tumor Biology 35：Emerging Molecules，Mechanisms，and Models.Abstract#5135.Proc Amer Assoc Cancer Res，Volume 47，2006.

［3］祁娟，張軍.ADAM9在肺癌組織中的異常表達(dá)［J］.中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，39（8）：670－671.

［4］張軍，祁娟，郭艷，等.HDGF在手術(shù)切除非小細(xì)胞肺癌中的異常表達(dá)及其在術(shù)后預(yù)后判定中的意義［J］.中國肺癌雜志，2011，14（3）：211-218.