顧 揚(yáng),尹香花,陳 剛

(1.江蘇省蘇北人民醫(yī)院,婦產(chǎn)科,江蘇揚(yáng)州,225001;2.揚(yáng)州大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理教研室,江蘇揚(yáng)州,225001)

卵巢腫瘤是婦科常見(jiàn)病,卵巢惡性腫瘤是婦女生殖道三大惡性腫瘤中5年生存率最低者。瘦素不僅是機(jī)體調(diào)節(jié)能量的重要物質(zhì),而且可以抑制腫瘤細(xì)胞凋亡,促進(jìn)其增殖,增加其對(duì)基底膜的侵襲能力及促進(jìn)血管生成[1-2]。與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。有關(guān)瘦素在卵巢腫瘤組織中表達(dá)鮮有報(bào)道。為初步了解瘦素與卵巢腫瘤的關(guān)系,本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)觀察常規(guī)石蠟包埋的82例卵巢腫瘤組織標(biāo)本中瘦素表達(dá)的情況,現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2003年1月～2008年12月,在本院住院手術(shù)治療的卵巢腫瘤患者的存檔組織中,抽取卵巢惡性腫瘤組織45例(漿液性囊腺癌23例、黏液性囊腺癌16例、惡性畸胎瘤6例),卵巢交界性腫瘤組織13例(交界性漿液性囊腺瘤7例、交界性黏液性囊腺瘤6例),隨意抽取卵巢良性腫瘤組織24例(漿液性囊腺瘤8例、黏液性囊性瘤8例、皮樣囊腫8例),以及卵巢正常組織標(biāo)本18例。卵巢惡性腫瘤患者的平均年齡(44.7±6.5)歲,卵巢交界性腫瘤患者的平均(42.8±7.8)歲,卵巢良性腫瘤患者平均(37.4±9.2)歲。根據(jù)2000年國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)有關(guān)卵巢惡性腫瘤的臨床分期病理分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),45例惡性卵巢腫瘤組織中,Ⅰ期4例、Ⅱ期 7例、Ⅲ期25例、Ⅳ9例;高分化(G1)10例、中分化(G2)19例、低分化(G3)16例。所有患者均行手術(shù)治療,術(shù)前均無(wú)化療及放療史。

1.2 免疫組織化學(xué)方法

取上述石蠟包埋的卵巢腫瘤組織及正常卵巢組織,切片4 μ m,采用鏈霉菌-產(chǎn)生物-過(guò)氧化物(SP)法進(jìn)行免疫組化染色,具體方法參見(jiàn)試劑盒說(shuō)明,試劑盒購(gòu)于北京中核生物技術(shù)有限公司,一抗工作液稀釋度均為1∶100。PBS代替一抗作為陽(yáng)性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)

采用雙盲法閱片,均有2位病理科醫(yī)師獨(dú)立觀察每張切片后一起作出判斷,有爭(zhēng)議的結(jié)果有3位病理科醫(yī)師共同討論決定。細(xì)胞質(zhì)著染棕黃色顆粒者為陽(yáng)性細(xì)胞,每切片于高倍鏡下取4個(gè)不同視野觀察,計(jì)算陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞在全部細(xì)胞總數(shù)的百分率,取其平均值為陽(yáng)性表達(dá)率。按以下方法行半定量分類:<5%的細(xì)胞著染為陰性,≥5%的細(xì)胞著染為陽(yáng)性。

2 結(jié) 果

2.1 瘦素在4種卵巢組織中的表達(dá)

瘦素在卵巢組織、良性卵巢腫瘤組織、卵巢交界性腫瘤和卵巢惡性腫瘤組織中的表達(dá)見(jiàn)表1。它們的陽(yáng)性表達(dá)率有顯著差異性,且呈上升趨勢(shì)(P<0.01)。

表1 瘦素在正常卵巢組織、卵巢良性、交界性和惡性腫瘤組織中的表達(dá)

2.2 卵巢癌組織中瘦素表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系

將45例卵巢癌進(jìn)行臨床統(tǒng)計(jì)分析,根據(jù)年齡、臨床分期、組織分化程度、淋巴結(jié)有無(wú)轉(zhuǎn)移和病理類型分組進(jìn)行陽(yáng)性表達(dá)率的統(tǒng)計(jì)見(jiàn)表2。

表2 卵巢癌組織中瘦素表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,卵巢癌中年齡>45歲和≤45歲的瘦素陽(yáng)性表達(dá)無(wú)明顯差別,晚期(Ⅲ～Ⅳ)顯著高于早期(Ⅰ～Ⅱ)(P<0.05),組織學(xué)G2G3顯著高于G1(P<0.01),淋巴轉(zhuǎn)移顯著高于無(wú)轉(zhuǎn)移(P<0.05),而病理類型中無(wú)明顯差異(P>0.05)。

3 討 論

瘦素是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的肥胖基因所表達(dá)的蛋白產(chǎn)物,主要調(diào)節(jié)機(jī)體脂肪的沉積。但最近研究發(fā)現(xiàn)瘦素在多種惡性腫瘤中廣泛分布,表明瘦素可能是腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要因素,然而有關(guān)瘦素在卵巢癌組織表達(dá)的研究,國(guó)內(nèi)外鮮見(jiàn)報(bào)道。組織中表達(dá)與否是了解瘦素是否參與卵巢癌發(fā)病機(jī)制的基礎(chǔ)。本研究選擇卵巢癌組織中兩種最常見(jiàn)的細(xì)胞學(xué)類型(上皮性腫瘤和生殖細(xì)胞腫瘤)為代表,采用免疫組化方法研究瘦素在卵巢良、惡性組織腫瘤中的表達(dá)情況,結(jié)果顯示瘦素在卵巢良性、交界性、惡性腫瘤組織中陽(yáng)性表達(dá)率逐漸增加,3者間表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義且呈上升趨勢(shì),而卵巢良性腫瘤組織陽(yáng)性表達(dá)率與正常卵巢組織的表達(dá)率差異無(wú)顯著性。由此可見(jiàn),瘦素在卵巢惡性腫瘤組織中的表達(dá)顯著增加,提示瘦素的過(guò)度表達(dá)可能與卵巢惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)[3-4]。

實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)瘦素在晚期卵巢惡性腫瘤的表達(dá)顯著高于早期,在G3、G2中陽(yáng)性表達(dá)顯著高于G1,在有淋巴轉(zhuǎn)移中陽(yáng)性表達(dá)顯著高于無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移,提示瘦素確實(shí)與卵巢惡性腫瘤細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移、疾病的嚴(yán)重程度及預(yù)后密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)還比較了瘦素在卵巢惡性上皮腫瘤組織與惡性生殖細(xì)胞腫瘤的表達(dá)和年齡組表達(dá)情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn)表達(dá)陽(yáng)性率均無(wú)顯著差異,提示瘦素的表達(dá)與年齡及惡性腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞性類型無(wú)關(guān),而這恰好與多種不同組織來(lái)源的惡性腫瘤均表達(dá)瘦素的現(xiàn)象相一致[5-6]。

總之,本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)瘦素與卵巢惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展,侵襲及疾病的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。關(guān)于瘦素在卵巢惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展中作用及作用機(jī)制仍然未完全明了。推測(cè)可能與瘦素可通過(guò)BCL-2表達(dá)抑制細(xì)胞凋亡,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)[7],可促血管內(nèi)皮生成因子(VEGF)表達(dá)[8-9],間接促進(jìn)血管生成,有利于腫瘤組織的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān)。瘦素參與卵巢惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展,這為預(yù)測(cè)卵巢癌的進(jìn)展,指導(dǎo)臨床治療提供重要實(shí)驗(yàn)依據(jù),瘦素可能成為今后判斷卵巢癌預(yù)后有價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物之一及有望在卵巢癌綜合治療中作為新的治療靶標(biāo)。

[1] 張勁松,涂江虹,曾憲升,等.慢性阻塞性肺疾病患者血清瘦素濃度測(cè)定及其臨床意義[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志,2008,12(3):88.

[2] Jaffe T,Schwartz B.Leptin promotes motility and invasiveness in human colon cancer cells by activating multiple signal-transduction pathways[J].Int J Cancer,2008,123(11):2543.

[3] 趙 亮,沈志祥,沈 磊,等.胃腺癌組織瘦素、瘦素受體表達(dá)及其臨床意義[J].武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2006,27(5):569.

[4] 徐連根,周 晶,雷 偉,等.瘦素及其受體在肝癌組織中的表達(dá)及意義[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志,2006,15(5):502.

[5] 白慶陽(yáng),谷俊朝,俞麗鴻.瘦素與乳腺癌的相關(guān)性及其致癌機(jī)理[J].國(guó)際外科學(xué)雜志,2008,35(1):37.

[6] Dixon R A,Davidson S M,Wynne A M,et al.The cardioprotective actions of leptin are lost in the Zucker obese(fa/fa)rat[J].J Cardiovasc Pharmacol,2009,53(4):311.

[7] De Wever O,Lapeire L,De Boeck A,et al.Cellular and molecular mechanisms of cancer cell invasion[J].Verh K A-cad Geneeskd Belg,2010,72(5-6):309.

[8] Chang Y W,Bean R R,Jakobi R.T argeting RhoA/Rho kinase and p21-activated kinase signaling to prevent cancer development and progression[J].Recent Pat Anticancer Drug Discov,2009,4(2):110.

[9] 吳玲玲,余妙真,李 琳,等.瘦素和VEGF的陽(yáng)性細(xì)胞在卵巢子宮內(nèi)膜異位癥中的病理學(xué)研究[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版),2007,28(6):674.