蔣浩海,徐立群,黃志軍

(江蘇省鹽城市第一人民醫(yī)院普外科,江蘇鹽城,224000)

影響胃癌的預(yù)后的因素可以分為臨床的,組織病理的及細胞分子生物學(xué)等多方面。近年部分生物標(biāo)志物在腫瘤的診斷、治療及預(yù)測復(fù)發(fā)等方面發(fā)揮了重要作用,本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測 MMP-3、MMP-9、VEGF 和 Ki-67蛋白在胃癌組織中的表達,為判斷胃癌預(yù)后提供客觀指標(biāo)。

1 資料與方法

2002年01月至2004年12月期間經(jīng)病理確診,并在鹽城市第一人民醫(yī)院進行手術(shù)治療的有完整病歷資料、隨訪資料和術(shù)后病理資料的119例病例,隨訪時間均在60個月以上。本組資料中:男73例,女46例。年齡分布在32～88歲,腫瘤位于胃竇幽79例,胃體10例,胃底賁門24例,累及全胃3例,殘胃癌3例。Borrmann大體分型為:Ⅰ、Ⅱ型為12例,Ⅲ、Ⅳ型為 92例。腫瘤的直徑≤4 cm的69例,>4 cm的50例。行遠端切除的為70例,近端切除的為21例,全胃切除的為10例,聯(lián)合切除為18例。行D1手術(shù)12例,D2式76例,D2以上13例,行D0手術(shù)18例。行聯(lián)合臟器切除的為18例。有圍手術(shù)期輸血52例,無圍術(shù)期輸血67例。病理組織學(xué)高分化10例,中分化42例,低分化67例。脈管內(nèi)有有癌栓19例,無癌栓100例。腫瘤浸潤至粘膜或粘膜下(T1)15例,浸潤至肌層或漿膜下(T2)24例,穿透漿膜層(T3)66例。未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移49例,1～6個淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的38例,7～15個淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移25例,15個以上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移7例。TNM分期:Ⅰa期13例,b期19例,Ⅱ期23例,Ⅲa期19例,Ⅲb期18例,Ⅵ期27例。術(shù)后化療滿6療程的50例,手術(shù)后化療不滿6療程的69例。

方法和免疫組織化學(xué)實驗步驟:主要試劑MMP-3、MMP-9、VEGF 和 Ki-67多克隆抗體。免疫組化采用LAB VISION 2D全自動免疫組化染色儀,ELIVISION二步法進行染色。綜合考慮切片中陽性細胞所占觀察細胞數(shù)的百分比和陽性細胞著色強度2項指標(biāo),半定量判定結(jié)果。每例切片選取粘膜細胞密集的區(qū)域,連續(xù)觀察20個高倍視野,每個視野計數(shù)50個細胞,通過計算著色細胞所占比例而分級。按著色細胞百分數(shù)計分,<20%為0分,20%～50%為1分,≥50%為2分。按著色強度計分,無著色為0分,淡黃色顆粒為1分,棕黃色顆粒為2分。將色細胞百分數(shù)計分與著色強度計分相乘,總計分0分為陰性(-),1～2分為弱陽性(+),4分為強陽性( )。

2 結(jié) 果

2.1 隨訪結(jié)果和生存狀況

119例患者的總的1年生存率92.4%,3年生存率67.0%,5年生存率50.4%。119例胃癌患者的隨訪時間最短的為5個月,最長的為89個月,平均隨訪時間為47.7月。至隨訪截止日期,死亡病例為59例,生存病例為60例。60例生存病例中已復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的有3例,57例為無瘤生存。隨訪時間5～89個月,中位隨訪時間為46個月,平均隨訪時間為47.7月。

2.2 影響胃癌預(yù)后的單因素分析

單因素分析表明:腫瘤最大直徑、病理組織分級、Borrmann分型、TNM 分期、腫瘤的浸潤深度、手術(shù)方式、手術(shù)根治度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、有無遠處轉(zhuǎn)移、圍術(shù)期輸血情況、化療療程、腫瘤組織中MMP-3、和Ki-67的表達是影響其術(shù)后生存的因素(見表1)。

表1 臨床指標(biāo)對預(yù)后影響的單因素分析

2.3 影響胃癌預(yù)后的多因素分析

對有意義的單因素分析結(jié)果行Cox多因素回歸分析,分析表明:Borrmann分型、病理組織分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM 分期、手術(shù)根治度、化療療程、腫瘤組織中MMP-3的表達是影響胃癌患者預(yù)后的因素(詳見表2)。

3 討 論

本組病例統(tǒng)計分析結(jié)果與Nakamura等[1]報道一致:Borrmann分型Ⅲ、Ⅵ型較Ⅰ、Ⅱ型預(yù)后差。本研究顯示組織學(xué)類型是腫瘤的獨立預(yù)后因素之一。本研究中單因素和多因素分析都顯示TNM分期是胃癌的重要的預(yù)后指標(biāo)。Yokota等[2]通過對根治術(shù)的胃腺癌的標(biāo)本進行多因素回歸分析發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)陽性數(shù)是預(yù)測胃癌預(yù)后的獨立指標(biāo),本研究發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移是胃癌患者預(yù)后的獨立因素。最新的臨床試驗顯示D2手術(shù)可以降低局部復(fù)發(fā)率,提高患者生存率[3]。大部分研究認為胃癌根治術(shù)可以提高患者的遠期生存率,淋巴結(jié)清掃能夠改善患者的預(yù)后,并指出淋巴結(jié)的清掃范圍是胃癌手術(shù)的關(guān)鍵[4]。本研究數(shù)據(jù)顯示化療滿六個療程的患者生存率隨時間的推移明顯高于化療未滿六個療程的患者。最近兩個隨機的臨床對比實驗揭示了化療時胃癌手術(shù)患者的最大的保護性因素[5-6]。

表2 臨床指標(biāo)對預(yù)后影響的Cox多因素回歸分析

在組織學(xué)上,基底膜完整性的破壞被認為是惡性腫瘤侵襲開始的標(biāo)志。腫瘤細胞可誘導(dǎo)腫瘤周圍基質(zhì)內(nèi)宿主細胞分泌MMP。MMP能降解基底膜成分、破壞局部組織結(jié)構(gòu)、增加腫瘤誘導(dǎo)的血管形成,在腫瘤發(fā)展和侵襲的各個階段均起重要作用[7]。MMP-3蛋白主要在胃粘膜的細胞質(zhì)中表達,呈棕黃色顆粒。因此測定腫瘤組織中的MMP-3的表達對預(yù)測腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)有著重要的臨床意義。多因素分析結(jié)果提示腫瘤組織中MMP-3的表達是胃癌預(yù)后的一個重要指標(biāo)。Mercapide等[8]用基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑GM6001作用于腫瘤細胞后發(fā)現(xiàn),MMP-3分泌減少,腫瘤細胞浸潤和轉(zhuǎn)移能力明顯減弱。因此,免疫組化分析MMP-3在胃癌癌中的表達為使用廣譜或選擇性MMP抑制劑治療胃癌奠定了理論基礎(chǔ),提示MMP-3可能成為胃癌治療的一個新靶點。聯(lián)合腫瘤組織免疫組織化學(xué)指標(biāo)MMP-3蛋白主要在胃粘膜的細胞質(zhì)中表達可作為胃癌臨床評價腫瘤生物學(xué)行為及判斷預(yù)后的有用指標(biāo)之一。

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