曹婉維 劉少璇 郭永誼 王曉鴻

CyclinE和 P27、P53在皮膚癌中的表達(dá)及相關(guān)性

曹婉維 劉少璇 郭永誼 王曉鴻

目的 探討細(xì)胞周期蛋白 E(CyclinE)和 P27、P53在皮膚癌中的表達(dá)及相關(guān)性。方法 應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)30例皮膚癌組織中 CyclinE和P27、P53的表達(dá)情況。分析三者與皮膚癌Broders標(biāo)準(zhǔn)分級(jí)之間的關(guān)系,以及 CyclinE與 P27、P53的相關(guān)性。結(jié)果 皮膚癌組織 CyclinE、P27表達(dá)與對(duì)照組比較顯著升高(χ2=12.05;χ2=25.15,P＜0.05)。在各級(jí)鱗癌組織間比較,CyclinE和 P53表達(dá)差異明顯(χ2=9.84;χ2=8.85,P＜0.05);P27在鱗癌組織中的陽(yáng)性率較對(duì)照組低(χ2=3.98,P＜0.05),P27在鱗癌組織各級(jí)間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.16,P＞0.05)。結(jié)論 CyclinE、P27、P53在皮膚鱗癌中有異常表達(dá),在皮膚鱗癌中的發(fā)生發(fā)展中可能起一定作用。

細(xì)胞周期蛋白 E;P27;P53;皮膚癌

皮膚鱗狀細(xì)胞癌(skin squamous cell carcinoma,SCC)是從正常皮膚的基底細(xì)胞發(fā)生的惡性腫瘤,其發(fā)生是多基因多步驟積累損害的結(jié)果,其中基因的異常表達(dá)起著非常重要的作用[1]。細(xì)胞周期調(diào)控基因在腫瘤細(xì)胞發(fā)生與發(fā)展中起重要作用。我們應(yīng)用免疫組織化學(xué)法研究細(xì)胞周期蛋白E(CyclinE)在皮膚鱗狀細(xì)胞癌(皮膚鱗癌)的表達(dá),以及 P27、P53表達(dá)的相關(guān)性,探討三者與皮膚鱗癌的發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院 2008年 1月到2010年 1月收治,經(jīng)病理組織學(xué)確診且術(shù)后標(biāo)本蠟塊保存完好的皮膚鱗狀細(xì)胞癌患者的組織標(biāo)本蠟塊 30例。男 20例,女 10例,年齡為 35～72歲,平均年齡 53.1歲。按 Broders標(biāo)準(zhǔn)分級(jí):I級(jí) 16例,II級(jí) 12例,III級(jí) 2例。所有病例術(shù)前均未接受過(guò)化療和放射治療。外科手術(shù)中切除的正常人皮膚組織24例作為對(duì)照組。

1.2 檢測(cè)試劑 CyclinE、P27、P53及 S-P(廣譜)免疫組化試劑盒均購(gòu)于福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。

1.3 檢測(cè)方法 采用免疫組織化學(xué) SP法,高溫修復(fù)(枸椽酸)抗原,操作方法按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行,DAB顯色。以 PBS代替一抗作陰性對(duì)照。

1.4 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn) 顯色后陽(yáng)性細(xì)胞為細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒為陽(yáng)性。顯微鏡下找陽(yáng)性最強(qiáng)的視野檢測(cè)10個(gè)獨(dú)立高倍視野(×400倍),根據(jù)陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞染色程度及所占百分比,判為陰性(-),細(xì)胞不著色;低表達(dá)(+),細(xì)胞呈淡黃色,細(xì)胞數(shù)≤25%;中度表達(dá)(++),細(xì)胞呈黃色,細(xì)胞數(shù) 26%～50%;高表達(dá)(+++),細(xì)胞見棕黃色顆粒,細(xì)胞數(shù)＞50%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行分析,CyclinE與P27、P53在皮膚鱗狀細(xì)胞癌組織的表達(dá)及其相關(guān)性采用 χ2檢驗(yàn)和Spearman等級(jí)相關(guān)法。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CyclinE與P27、P53在皮膚鱗狀細(xì)胞癌組織中表達(dá)及與Broders標(biāo)準(zhǔn)分級(jí)之間的關(guān)系 CyclinE在正常人皮膚鱗狀細(xì)胞細(xì)胞核內(nèi)未見陽(yáng)性表達(dá)。CyclinE和 P53在鱗癌組織中表達(dá)較對(duì)照組高,兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.05;χ2=25.15,P＜0.05)。同時(shí)在各級(jí)鱗癌組織間比較,CyclinE和P53表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=9.84;χ2=8.85,P＜0.05)。P27在鱗癌組織中的陽(yáng)性率較對(duì)照組低,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.98,P＜0.05),P27在鱗癌組織各級(jí)間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.16,P＞0.05)。見表 1。

2.2 皮膚鱗狀細(xì)胞癌組織 CyclinE與 P27、P53表達(dá)的相關(guān)性分析 30例皮膚鱗癌中,CyclinE與P27表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性(r=-0.823,P＜0.05);CyclinE與 P53呈正相關(guān)性(r=0.768,P＜0.05)。

表 1 皮膚鱗狀細(xì)胞癌組織中周期蛋白 E、P27、P53免疫組化結(jié)果(例數(shù))

3 討論

皮膚癌的發(fā)生率在近幾十年有所增加。紫外線照射在人皮膚腫瘤中的作用已得到流行病調(diào)查的確認(rèn)。此外,也與種族、電離輻射、經(jīng)常接觸砷、瀝青等有關(guān)。皮膚癌的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)多基因多步驟的過(guò)程,在分子水平上有癌基因的激活,抑癌基因的失活,腫瘤抑制基因的異常,凋亡機(jī)制發(fā)生缺陷等,這在皮膚癌的預(yù)防、早期診斷及治療的分子策略方面提供新的思路[2,3]。

Bito等[4]檢查了CyclinE在正常人皮膚、鱗癌中的表達(dá),發(fā)現(xiàn)在角化不良細(xì)胞內(nèi)較高表達(dá),而在鱗癌中的表達(dá)較少,認(rèn)為 CyclinE表達(dá)下調(diào)在角化細(xì)胞腫瘤形成方面起一定作用。然而有研究[5]發(fā)現(xiàn),CyclinE在皮膚鱗癌組織中高表達(dá)。

本研究顯示,CyclinE在皮膚鱗癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率較正常人對(duì)照組高,且與分化和度呈相關(guān)性,分化程度越低,陽(yáng)性表達(dá)率越高,提示 CyclinE在皮膚鱗癌組織分化轉(zhuǎn)化中起作用。這與李靈等[6]的研究結(jié)果相同。

本研究顯示,P27在皮膚鱗癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)較正常人對(duì)照組低,提示可能組織在癌變過(guò)程中 P27的陽(yáng)性表達(dá)及表達(dá)程度在衰減,從而失去對(duì)細(xì)胞增殖的負(fù)性調(diào)控作用,導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。在皮膚鱗癌組織分級(jí)間表達(dá)強(qiáng)度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示P27可能與皮膚鱗癌組織腫瘤細(xì)胞分化無(wú)關(guān)。

P53在正常人皮膚組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為 100%,表達(dá)強(qiáng)度較低,但較正常人對(duì)照組高,表明 P53在分級(jí)間表達(dá)強(qiáng)度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,是反映皮膚鱗癌腫瘤細(xì)胞的惡性程度的指標(biāo)。

本研究進(jìn)一步證實(shí)了 CyclinE、P27、P53在皮膚鱗癌中有異常表達(dá),在皮膚鱗癌中的發(fā)生發(fā)展中可能起一定作用。三者的相關(guān)性,有待進(jìn)一步研究。

[1] 耿國(guó)軍,劉林嶓.C-erbB-2、P16、nm23-H1與皮膚鱗狀細(xì)胞癌的關(guān)系.河南腫瘤學(xué)雜志,2005,18(1):74-76.

[2] 馬文麗,鄭文嶺.分子腫瘤學(xué).北京:科學(xué)出版社,2003:76-80.

[3] 李明鳴,劉林嶓,馬長(zhǎng)路.NF-κb/p65,p-IκBa,IκKa在皮膚 SCC和BCC中的表達(dá)和意義.中國(guó)美容醫(yī)學(xué),2006,15(12):1339-1341.

[4] Bito T,Ueda M,Ito A.etal.Less expression of Cyclin E in cutaneoussquamous cell carcinomas than in begnign and premalignant keratinocytis lesions.Jcutan pathol,1997,24:305-308.

[5] 曲才杰,史同新,林桂銘.P27和細(xì)胞周期蛋白 E在Bowen病及皮膚鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá).中華皮膚科雜志,2006,39(2):71-73.

[6] 李靈,李利,張誼芝.細(xì)胞周期蛋白 E、P27、增殖細(xì)胞核抗原在皮膚鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá).中華皮膚科雜志,2006,39(11):656.

Correlation of CyclinE,P27 and P53 protein expressions in skin cancer

CAOWan-wei,LIU Shao-xuan,GUO Yong-yi,et al.Department of Pathology,The Fifth Affiliated Hospital of Syb Yat-sen University,Zhuhai 519000,China

Objective To investigate the expression and their relationship of CyclinE,P27,P53 skin cancer.Methods Theexpression of CyclinE,P27,P53 in cancer tissueswereassessed by immunohistochemical method.The relationship between these three and the Broders standard classification,and the correlation of CyclinE and P27,P53WEREANALYZED.Results Expression of CyclinE,P27 in skin squamous cell carcinoma was significantly higher than in control group(χ2=12.05;χ2=25.15,P＜0.05).P27 in squamous cell carcinomawas lower than those in the controlgroup(χ2=3.98,P＜0.05).Compared between squamous cell carcinoma atall levels,expression of CyclinE and P53 was significantly different(χ2=9.84;χ2=8.85,P ＜0.05)and expression of P27 was notsignificantly different(χ2=1.16,P＞0.05).Conclusion There is abnormalexpression of CyclinE,P27 and P53 in skin squamous cell carcinoma.The abnormal expression p lay a role in the development of squamous cell carcinoma in the skin.

CyclinE;P27;P53;Skin cancer

王曉鴻 E-mail:david_20070424@126.com

519000中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院病理科(曹婉維劉少璇 王曉鴻),檢驗(yàn)科(郭永誼)