李實(shí),李國(guó)峰,劉瑰琦

(1.牡丹江林業(yè)管理局種子站,黑龍江 牡丹江 157009;2.大海林林業(yè)局;3.黑龍江省牡丹江林業(yè)科學(xué)研究所)

楊黃(Phellinus vaniniiLjup.),又名楊樹(shù)桑黃,分類學(xué)研究表明:廣義上的“楊黃”包括生長(zhǎng)在楊樹(shù)上7種真菌,它們分屬于擔(dān)子菌門、擔(dān)子菌綱,銹革孔菌目、銹革孔菌科的4個(gè)屬中,分別是光核纖孔菌、團(tuán)核纖孔菌、輻射纖孔菌、華木層孔菌、窄蓋木層孔菌、瓦尼木層孔菌和腫紅皮孔菌[1]。

20世紀(jì)90年代中期,韓國(guó)與日本研究人員發(fā)現(xiàn)其天然提取物對(duì)腫瘤等有出色的抑制作用,體外實(shí)驗(yàn)證實(shí),楊黃提取物可誘導(dǎo)癌細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞死亡程序,同時(shí)具有較強(qiáng)的抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移作用[2]。更令人振奮的是其提取物長(zhǎng)期大量服用對(duì)人體無(wú)毒無(wú)害。其水浸物主要是多糖類物質(zhì),其致癌機(jī)理尚不明確,由于天然數(shù)量稀少,難以形成來(lái)源供貨,而日本韓國(guó)將其PL2、PL5等菌絲進(jìn)行發(fā)酵提取物凍干后用于醫(yī)用[3]。我省楊黃等這些珍稀功能性藥用菌數(shù)量逐漸減少,為了保護(hù)森林資源及藥源提供的連續(xù),筆者開(kāi)展了楊黃的人工栽培試驗(yàn),歷時(shí)3年對(duì)野生資源、菌種分離、純化、栽培試驗(yàn)等相關(guān)技術(shù)進(jìn)行系列研究。

1 生物學(xué)特性

1.1 形態(tài)特點(diǎn)

野生楊黃子實(shí)體為多年生,平伏至無(wú)柄蓋形,鮮時(shí)無(wú)特殊氣味,干后變?yōu)閳?jiān)硬木質(zhì),菌蓋均為蹄形,子實(shí)體大小不均,厚度3～5cm,最大幅寬達(dá)10cm左右。菌蓋表面紅褐色至灰褐色,略粗糙,后期光滑,上有不規(guī)則的同心環(huán)帶。楊黃孔口表面黃褐色至褐色,有折光效應(yīng),菌肉呈褐色至暗褐色,木栓質(zhì),管口每毫米6～8個(gè)。菌蓋上表面近期形成一層黑色薄殼,厚度為1～1.5mm,菌管多層且分層明顯。實(shí)層中通常有大量剛毛存在,剛毛錐形,黑褐色;擔(dān)孢子卵形至廣橢圓形,淡黃色,厚壁,光滑。楊黃為二系菌絲系統(tǒng),菌絲無(wú)鎖狀聯(lián)合,生殖菌絲不常見(jiàn),無(wú)色,薄壁,偶爾分枝,常簡(jiǎn)單分隔,骨架菌絲占多數(shù),金黃色及黃褐色,很少分枝。

1.2 生態(tài)習(xí)性

野生楊黃多發(fā)生在封閉度較高,近水源的天然林或林間陰濕草甸叢中,在自然界只生長(zhǎng)在山楊和香楊活立木、樹(shù)樁或倒木上,生長(zhǎng)于樹(shù)干胸往上8～50cm,倒伏在林區(qū)或草叢中3年以上的楊樹(shù)樹(shù)干背陰側(cè)面,發(fā)生地多位于山的中下腹緩坡地帶,陰坡陽(yáng)坡均分布,但陽(yáng)坡地子實(shí)體較大。

1.3 菌絲形態(tài)及生長(zhǎng)條件

菌絲生長(zhǎng)淡白色,略帶黃色,適生溫度范圍 15～23℃,適宜 pH 值在 6.0～7.0,生長(zhǎng)周期較短,生長(zhǎng)20d后出現(xiàn)黃褐色細(xì)絨狀菌絲,而生長(zhǎng)3周的菌種,代謝豐富而出現(xiàn)黃褐色斑點(diǎn)。

2 楊黃袋料人工栽培試驗(yàn)

2.1 引種地點(diǎn)

地點(diǎn)選擇大海林市太平溝林場(chǎng),當(dāng)?shù)剞r(nóng)民購(gòu)置一支菌管(楊黃1#),筆者從野生(興凱湖采集)分離組織培養(yǎng)得到楊黃2#。母種試管于2006年分離純化后得到。50支用于接種生產(chǎn),配方為PDA培養(yǎng)基。

2.2 原種的栽培袋的營(yíng)養(yǎng)

2.2.1 原料配方

闊葉樹(shù)木屑78%、麥麩子20%、石膏1%、pH值自然、含水量55%～65%,裝高瓶。

2.2.2 栽培袋配方

(1)硬雜木屑78%、米糠17.5%、豆餅粉2.5%、石灰0.5%、石膏1%、pH值自然、含水量60%左右;

(2)硬雜木屑50%、楊樹(shù)木屑28%、玉米粉18%、豆餅粉2%、蔗糖1%、石膏1%。

2.2.3 栽培袋的營(yíng)養(yǎng)

每年3月末,將以上培養(yǎng)料攪拌均勻,加水使含水量達(dá)到60%～65%,采用17cm×33cm的聚乙烯塑料袋,用無(wú)棉蓋及棉花球封口。常壓100℃滅菌8～10h,出鍋后冷卻在30℃以下轉(zhuǎn)移至接種箱接種。接種時(shí)用量加大,利用菌絲快速封面,防止污染發(fā)生。接完菌后將袋轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室培養(yǎng)40～50天后,菌絲全部長(zhǎng)滿菌袋,培養(yǎng)室溫度控制在20～26℃,菌袋長(zhǎng)滿后,不用加溫,棚內(nèi)建設(shè)完成后進(jìn)行割口出黃管理階段。具體試驗(yàn)情況見(jiàn)表1:

表1 栽培袋培養(yǎng)情況統(tǒng)計(jì)

由表1綜合分析,這兩種品種在袋料期培養(yǎng)沒(méi)有明顯的長(zhǎng)勢(shì)差別形態(tài)特異,但在培養(yǎng)料的選擇不同時(shí)略表現(xiàn)不同,硬闊加豆餅長(zhǎng)勢(shì)最好并且生長(zhǎng)快,而硬闊加麩皮相對(duì)較差,生長(zhǎng)速度較慢且周期相差3～5d。

2.3 入棚及子實(shí)體管理試驗(yàn)

由于選擇地段在林下空地,氣溫條件較為低溫、濕潤(rùn),5月到6月下地割口進(jìn)入棚內(nèi)開(kāi)始出黃階段。割口之前將菌袋表面用高錳酸鉀溶液消毒,每袋割2～3個(gè)月牙形長(zhǎng)3～5cm、寬1.5～2.5cm左右的口,脫去環(huán)蓋,將口扎好倒置或直立在棚內(nèi)預(yù)先做好的菌架上,注意保持溫度,3～5d后等待菌絲愈合即可噴細(xì)水保濕。下地15～20d左右開(kāi)始出現(xiàn)黃色基質(zhì)。為了便于黃體之間的通風(fēng),要求擺放袋料之間行距30cm,袋距30cm。前期子實(shí)體原基生長(zhǎng)較慢,待室外溫度達(dá)到25～30℃時(shí),棚內(nèi)溫度25℃左右時(shí)子實(shí)體的生長(zhǎng)速度加快。為了保持濕度我們?cè)谂飪?nèi)進(jìn)行適度噴水,使相對(duì)濕度控制80%以上,早晚各通風(fēng)0.5～1h,等到室內(nèi)溫度超過(guò)30℃時(shí)就開(kāi)始在棚上澆水,用水泵澆冷水,這時(shí)注意避免陽(yáng)光直接照射菌袋,檢查菌袋是否有污染或倒?fàn)?、褐變現(xiàn)象,棚內(nèi)控制在遮陰網(wǎng)雙層75%遮陰條件下,并且濕度、溫度、光線能維持良好的控制。經(jīng)過(guò)管理2個(gè)月就進(jìn)入采收階段。其試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)見(jiàn)表2:

表2 栽培出黃及積溫試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)表

從表2可以看出 2007年和 2008年楊黃產(chǎn)量較高,平均產(chǎn)量達(dá)到24g/袋干,而2009年產(chǎn)量較少,平均產(chǎn)量約為20g/袋干,而從不同母種來(lái)源來(lái)看,楊黃1#和楊黃2#在產(chǎn)量上沒(méi)有太大差別,從表1和表2綜合來(lái)看,闊葉20%+豆餅的培養(yǎng)料為最佳選擇,并且從菌袋進(jìn)棚到最終出黃都記錄了每天的平均氣溫,從積溫情況來(lái)看,積溫的高低并不是影響楊黃產(chǎn)量的最大因素,而氣溫波動(dòng)性可能是影響其產(chǎn)量因素中的一個(gè)。

[1] 戴玉成.對(duì)藥用真菌楊黃種類的再認(rèn)識(shí)[J].菌物學(xué)報(bào),2007,26(增刊):1-6.

[2] 秦俊哲.桑黃功效成份研究的新進(jìn)展[J].食用菌,2008(5):1-2.

[3] 葛青.桑黃子實(shí)體多糖的分離純化及單糖組成研究[J].食品科學(xué),2008,29(9):291-294.