陽澤彬 王金良

急性腦梗死患者血清中基質金屬蛋白酶9和脂蛋白相關磷脂酶A2的動態(tài)改變

陽澤彬 王金良

腦梗死 急性病 基質金屬蛋白酶9 磷脂酶A2 脂蛋白類

腦梗死是多發(fā)病之一，且發(fā)病趨于年輕化。對腦梗死早期診斷的血清標志物的研究受到重視，但真正能反映早期腦梗死的標志物甚少。最近，國外報道血清中基質金屬蛋白酶9（MMP-9）和脂蛋白相關磷脂酶A2（LP-PLA2）升高與缺血性心腦血管疾病，尤其是腦梗死早期發(fā)病關系密切，且可反映患者的治療效果和預后[1]。本文就急性腦梗死患者的此2項指標進行動態(tài)觀察與探討。

1 對象與方法

1.1研究對象 選擇我院2007年6月—2009年5月收治入院的急性腦梗死患者146例（A組），年齡41～66歲，平均（54±12）歲，男88例，女58例。診斷符合2004年全國第4屆腦血管病學術會議修定的《各類腦血管疾病診斷要點》的標準，且均經CT或MRI檢查確定梗死部位與面積。均排除冠心病、感染、肝腎功能不全和自身免疫病等?；颊叩纳窠浌δ苋睋p評分依據1995年全國腦血管病學術會議通過的腦卒中患者的評分標準（NDS）。依據CT或MRI檢查結果和NDS評分將患病嚴重程度分為輕型（0～15分）、中型（16～30分）和重型（31～45分）。患者的腦梗死面積依入院時的首次CT或MRI檢查結果，按Adama分型法分為腔隙性梗死（梗死直徑<1.5 cm）,小梗死（1.5～3.0 cm）和大梗死（直徑>3.0 cm,且累及2個腦解剖部位）。選擇同期入院的年齡和性別匹配的良性胃、腸疾患，外傷，骨折患者50例為非腦梗死疾患組（B組），均排除腦梗死的癥狀與體征。男28例，女22例，平均年齡(54±10)歲。同期健康查體者50例為健康組（C組），男28例，女22例，平均年齡（54±9）歲。3組間性別（χ2=1.22）和年齡（F=0.81）差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。患者均經體檢和常規(guī)生化檢驗排除了高血壓和心、腦血管疾病。

1.2觀察方法 患者均于入院的當日進行治療前采血，并于入院治療后的5、10、15及20 d采血，分離血清，凍存于-40℃待測定。按上述方法完成患者病情嚴重程度、腦梗死面積的判定。

1.3測定方法 用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）法測定血清中2項指標水平。測定用酶標儀為BIO-RAO Model 680，洗板機為Model 1575。MMP-9試劑用美國TPI公司制品。該試劑盒的測定批內變異6.6%,批間變異8.9%。LP-PLA2試劑用美國R&D公司制品。該試劑盒的測定批內變異5.5%,批間變異7.8%。

1.4統(tǒng)計學方法 采用SPSS 12.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計分析。符合正態(tài)分布的計量資料以x ±s表示，組間比較采用單因素方差分析，進一步組間比較用q檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1各組血清中MMP-9和LP-PLA2水平比較 3組間MMP-9比較差異均有統(tǒng)計學意義（均P<0.05）。A組與B、C組間LP-PLA2的比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1。

表1 各組血清中MMP-9和LP-PLA2水平的比較

表1 各組血清中MMP-9和LP-PLA2水平的比較

*P<0.05

組別 n MMP-9 LP-PLA2 A組B組C組F q（1）∶（2）（1）∶（3）（2）∶（3）146 50 50 184.5±30.6 88.6±14.8 76.4±12.6 9.35*16.82*18.24*20.35*450±58 258±56 245±54 3.44*24.48*26.16*1.46

2.2急性腦梗死患者血清中2項指標的動態(tài)變化 1 d與10 d,10 d與20 d間MMP-9和LP-PLA2的差異均有統(tǒng)計學意義，（P<0.05或P<0.01），見表2。

2.3不同嚴重程度急性腦梗死患者血清中2項指標水平比較 MMP-9和LP-PLA2在輕型組和中、重型組的1 d與20 d的組間比較差異有統(tǒng)計學意義（均P<0.05），見表3。

2.4不同梗死面積急性腦梗死患者血清2項指標比較 3組MMP-9和LP-PLA2的1 d和20 d的組間比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表4。

作者單位：300042 天津市公安醫(yī)院檢驗科

表2 急性腦梗死患者血清中2項指標的動態(tài)變化

表2 急性腦梗死患者血清中2項指標的動態(tài)變化

**P<0.01,*P<0.05

時間 MMP-9 LP-PLA2 1 d 5 d 10 d 15 d 20 d F q 1 d∶10 d 10 d∶20 d 184.5±30.6 155.2±22.6 106.5±11.8 102.6±17.7 95.3±16.8 12.65*20.28**25.30*450±58 358±51 346±52 288±54 274±45 4.86*17.41**20.65*n 146 146 146 146 146

表3 不同嚴重程度急性腦梗死患者血清中2項指標水平比較

表3 不同嚴重程度急性腦梗死患者血清中2項指標水平比較

*P<0.05

組別 n MMP-9 1 d 20 d LP-PLA2 1 d 20 d輕型組（1）中型組（2）重型組（3）F q（1）∶（2）（1）∶（3）（2）∶（3）70 44 32 132.8±59.5 140.3±30.8 153.2±21.5 36.8*16.65*18.22*1.84 111.4±47.6 135.2±38.8 152.5±20.6 51.54*10.24*19.65*2.22 290±44 355±48 425±65 66.82*19.56*16.34*1.71 325±42 386±51 436±67 56.2*14.23*11.57*1.09

表4 不同梗死面積急性腦梗死患者血清中2項指標水平比較

表4 不同梗死面積急性腦梗死患者血清中2項指標水平比較

*P<0.05

組別 n MMP-9 1 d 20 d LP-PLA2 1 d 20 d腔隙性梗死組（1）小梗死組（2）大梗死組（3）F q（1）∶（2）（1）∶（3）（2）∶（3）65 38 43 135.8±28.5*143.3±30.5*188.2±41.6*44.55*14.44*15.82*11.46*102.7±27.6 140.2±21.8 174.5±24.2 74.66*21.25*16.34*18.22*286±29 367±46 407±48 84.82*26.28*22.46*18.51*304±40*385±47*422±51*87.67*24.26*27.42*23.45*

3 討論

患者血清中的腦標志物研究已引起國內外的廣泛重視。近年來發(fā)現(xiàn)值得重視的標志物有S100B蛋白、神經元特異性烯醇化酶（NSE）、超敏C反應蛋白（hsCRP）、MMP-9、髓性堿性蛋白（MBP）、血管內皮細胞黏附因子（VCAM）、von Willbrand因子（vWF）和 D 二聚體（D-D）等[1]。國內對MMP-9和LP-PLA2的研究報道尚少。

MMP是依賴鋅和鈣離子的水解酶家族，其中可降解明膠類者有明膠酶A(MMP-2,分子質量72 ku),和明膠酶B（MMP-9,分子質量92 ku）。腦組織損傷時，MMP-9表達上調，并可導致血腦屏障漏出和細胞死亡。

本文發(fā)現(xiàn)急性腦梗死組患者MMP-9在發(fā)病入院的當日即明顯升高，病情越嚴重，梗死面積越大患者血清MMP-9含量越高。Castellanos等[2]觀察250例腦栓塞患者，發(fā)現(xiàn)血清中MMP-9是其獨立相關因素。在鼠卒中模型中，腦缺血后6～24 h即有MMP-9的升高[3]。上述結果與本文的結果一致。一項最新的研究顯示，接受rtPA溶栓治療的卒中患者的MMP-9濃度升高，可能提示“洗脫”現(xiàn)象[4]。超急性的MMP-9濃度升高可作為rtPA治療后出血并發(fā)癥的預測。

本研究發(fā)現(xiàn)急性腦梗死患者LP-PLA2水平升高，梗死面積越大LP-PLA2水平越高。LP-PLA2是分子質量為50 ku的鈣離子非依賴性絲氨酸酯酶，水解氧化的磷脂釋放促炎癥溶血磷脂酰膽堿和氧化脂肪酸。LP-PLA2結合于血循環(huán)中的低密度脂蛋白(LDL)，尤其易與小而密的LDL顆粒結合，其活性可以代表血漿中小而密LDL顆粒的水平，故可促動脈硬化，是心、腦血管病的重要因素[5]。美國FDA已經批準使用LP-PLA2作為冠心病和卒中長期預后風險的指標。鹿特丹一項研究觀察8 000例年齡>55歲的男性和女性，LP-PLA2升高者在平均隨訪時間為6.4年里有110例發(fā)生缺血性卒中[6]。LP-PLA2的檢測可以測質量也可以測活性，活性測定法的結果差異很大[7]。故本文采用質量法。

本文結果表明2項指標均是早期輔助診斷急性腦梗死的有用指標，其共同特點是：在腦梗死的早期血清中即明顯升高，經治療后逐步減少。其水平與腦梗死的嚴重程度和梗死面積有一致關系。

近年來，多種標志物聯(lián)合檢測輔助診斷腦梗死逐漸受到重視。Laskowitz等[8]對130例疑為急性腦梗死的患者在癥狀出現(xiàn)的6 d內檢測D-二聚體、CRP和MMP-9等指標，結果顯示缺血性卒中的敏感性為81%，特異性70%。Whiteley等[9]最近發(fā)表關于預測和診斷缺血性卒中的標志物的系統(tǒng)評價結果顯示，大多數(shù)的生物標志物單獨使用時有較高的敏感性或特異性，但研究設計均有缺陷，包括研究規(guī)模較小，對照人群選擇不當，診斷的分割點不明確等，本文由條件所限也難避免上述缺陷，尚有待進一步深入研究。

[1] Laterza OF,Modur VR,Crimmins Dl,et al.Identification of novel brain biomarkers[J].Clin Chem,2006,52(9):1713-1721.

[2] Castellanos M,Leira H,Serena J,et al.Plasma MMP-9 concentra?tion predict Acute focal ischemia[J].Stroke,2003,34(1):40-46.

[3] Sumli T,Lo EH.Involvement of MMP in thrombolysis-associated hemorrhagic transformation after embolic focal ischemia in rats[J].Stroke,2002,23(2):831-836.

[4] Horstmann S,Kalb P,Koziol J,et al.Profiles of matrix metalloprotein?ases and their inhibitors,and laminin in stroke patients:influence of different therapies[J].Stroke,2003,34(11):2165-2170.

[5] Gazi I,Lourida ES,Filipatos T ，et al.Lipoprotein-associated phos?pholipase A2 activity is a marker of small,dense LDL particles in human plasma[J].Clin Chem,2005,51(10):2264-2273.

[6] Oei HH,van der Meer IM,Hofman A,et al.Lipoprotein-associated phospholipase A2 activity is associated with risk of coronary heart disease and ischemic stroke:the Rotterdam Study[J].Circulation,2005,111(3):570-575.

[7] Ballantyne CM,Hoogeveen RC,Bang H，et al.Lipoprotein-associat?ed phospholipase A2,high sensitivity C-reactive protein,and risk for incident coronary heart disease in middle-aged men and women in the ARIC study[J].Arch Intern Med，2005，165（9）:2479-2484.

[8] Laskowitz DT,Blessing R,Floyd J,et al.Panel of biomarkers pre?dicts stroke[J].Ann N Y Acad Sci,2005,1053(10):30.

[9] Whiteley W,Chong WL,Sengupta A,et al.Blood markers for the prognosis of ischemic stroke:a systematic review[J].Stroke,2009,40（5）:e380-389.

（2010-04-19收稿2010-08-31修回）

（本文編輯 魏杰）