摘要：選用固定液為FFAP的石英玻璃毛細(xì)管柱，設(shè)置合適的載氣柱前壓、分流比及程序升溫，采用氣相色譜法測(cè)定花生主要脂肪酸，平行測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.67％～2.11％，而且主要脂肪酸出峰時(shí)間不到10min，只需13min即可完成一次分析。

關(guān)鍵詞：氣相色譜法；脂肪酸；穩(wěn)定性

中圖分類號(hào)：Q503；S565.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A 文章編號(hào)：1001—4942(2010)12—0085—02

油脂中的脂肪酸一般是以甘油酯形式存在，沸點(diǎn)較高，一般采用氣相色譜法進(jìn)行分離和測(cè)定。目前對(duì)植物油、魚油、海洋生物的脂肪酸測(cè)定已有許多相關(guān)文獻(xiàn)。氣相色譜法測(cè)定脂肪酸的穩(wěn)定性是準(zhǔn)確判定脂肪酸的關(guān)鍵步驟。本試驗(yàn)根據(jù)花生中脂肪酸的主要成分設(shè)置了最佳測(cè)定條件，可為分析植物脂肪酸的成分、含量打下基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

試劑：0.5 mol／L NaOH-CH₃OH溶液(分析純)；1：1苯一石油醚混合溶液(分析純)；脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品(Sigma公司)。

安捷倫6890氣相色譜儀，氫火焰檢測(cè)器；固定液為FFAP的石英玻璃毛細(xì)管柱，柱長(zhǎng)25m，柱徑0.32mm。

1.2 脂肪酸的快速甲酯化

將花生干燥后，取500mg左右，研碎后放人10ml具塞試管中，加入苯一石油醚混合溶液2ml，浸提15min后，再加入0.5moL／L NaOH-CH、OH溶液2ml，振搖后置于50水浴約15min，取出后沿管壁加入蒸餾水使有機(jī)層上升至試管上部，靜置分層后，取上層清液1ml作氣相色譜分析。

1.3 色譜操作條件

載氣N₂：81kPa；分流比10：1；燃?xì)釮₃：30ml／min；空氣：400ml／min；進(jìn)樣口：250℃；檢測(cè)器：250℃；程序升溫：180℃(2min)→220℃(3min)，每分鐘升5℃。

2 結(jié)果

2.1 定性及定量分析

采用脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)物作對(duì)照。由于各脂肪酸為同系物，可以視相對(duì)校正因子為1，采取面積歸一化法可測(cè)定脂肪酸組成。從圖1可看出，譜峰分離效果好，能分辨出多種脂肪酸。

2.2 方法的精密度

花生樣品快速甲酯化后，連續(xù)用本方法平行測(cè)定6次，測(cè)定結(jié)果見表1。

由表1結(jié)果可看出，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.67％～2.11％之間，符合色譜定量分析的允許相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍，表明此方法具有較好的精密度和重復(fù)性。

3 討論與結(jié)論

3.1 色譜柱的選擇

考慮到脂肪酸酯類的極性，根據(jù)相似相溶原理，選用交聯(lián)型固定液FFAP，它不僅適于分離脂肪酸酯類，而且熱穩(wěn)定性較好，高溫不易氧化和流失，即便在高溫下操作，基線也只有很小的漂移。

由于花生的脂肪酸組成復(fù)雜，如用填充柱色譜，由于其柱效低，不能良好地分離各組分；而毛細(xì)管柱的柱徑小，柱較長(zhǎng)，因此柱效高，能使脂肪酸組分在柱內(nèi)進(jìn)行反復(fù)分配并得以完全分離。因此選用毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定。

3.2 載氣柱前壓的設(shè)置

載氣壓力設(shè)置過(guò)低，會(huì)使譜峰的半峰寬增加，或出現(xiàn)拖尾峰，分析時(shí)間也較長(zhǎng)；載氣壓力過(guò)高，又會(huì)使相鄰的峰不能完全分離，甚至出現(xiàn)譜峰重合現(xiàn)象，這些情況都會(huì)影響定性定量的準(zhǔn)確性。經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)，當(dāng)設(shè)置載氣柱前壓為81kPa時(shí)，與柱前壓為50kPa時(shí)相比，出峰時(shí)間提前了近一倍，并且不影響出峰數(shù)目及分離效果，能準(zhǔn)確地分離出30多種組分。

3.3 程序升溫的設(shè)置

由于花生的脂肪酸組成很復(fù)雜，如果采用恒溫分析，譜峰無(wú)法得到良好的分離，所以需要設(shè)置程序升溫，使各個(gè)組分按沸點(diǎn)高低依次出峰。多次試驗(yàn)表明，程序升溫180℃(2min)→220℃(5min)，每分鐘升5℃，在此條件下，能分離出10多個(gè)組分，并且主要脂肪酸出峰時(shí)間還不到10min，只需要13min即可完成一次分析。

由測(cè)定結(jié)果可看出，本方法能準(zhǔn)確地分離和測(cè)定花生中的主要脂肪酸，有較好的精密度和較高的可靠性，為脂肪酸組成的測(cè)定篩選提供了一個(gè)穩(wěn)定可行的分析方法。