摘要：首次嘗試用丙酮、氯仿溶劑對問荊地上部進行提取，以蘿卜、萵苣、馬唐、稗草為試驗材料，測定不同溶劑的問荊提取物對4種供試植物生長發(fā)育的影響。結(jié)果表明：對供試植物株高抑制作用，丙酮提取物的基本順序是：萵苣＞馬唐＞蘿卜＞稗草，氯仿提取物的基本順序是：萵苣＞馬唐＞稗草＞蘿卜；對供試植物根長的抑制作用，丙酮、氯仿提取物的基本順序都是萵苣＞稗草＞馬唐＞蘿卜。

關(guān)鍵詞：問荊；提取物；抑制率

中圖分類號：S482.49 文獻標(biāo)識號：A 文章編號：1001—4942(2010)12—0036—03

問荊(Equisetum arvense L)為厥類植物門木賊科木賊屬植物，多年生草本，別名節(jié)節(jié)草、益母草、空心草、筆頭草。問荊廣泛分布在北溫帶及北寒帶，在我國東北、華北、西北、西南各省區(qū)均有分布，是個豐富的自然資源。全草入藥，性味苦平，清熱利尿，消腫抗炎，清肝明目，鎮(zhèn)痛止血。我國北方部分麥田、玉米田、大豆田因連年化學(xué)除草已選擇出僅有問荊和某種旱田作物的群落形式。問荊的水提取物含黃酮醇類化合物，可顯著降低家兔血壓。問荊乙醚提取物為主要組分的鎮(zhèn)痛靈注射液，具有較強的鎮(zhèn)痛作用。俄羅斯的科學(xué)家發(fā)現(xiàn)問荊的水提取物可以抑制30多種雜草種子的萌發(fā)，可以用來開發(fā)既環(huán)保，又無污染的植物源除草劑。為了進一步開發(fā)利用問荊中的生物活性物質(zhì)，從中尋找具有防除作用的先導(dǎo)化合物，作者采用了不同有機溶劑對問荊地上部進行了提取，選用蘿卜、萵苣、馬唐、稗草4種植物進行了活性篩選。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 樣品的準(zhǔn)備 將問荊地上部通風(fēng)自然陰干，用粉碎機粉碎成粉末，過40目標(biāo)準(zhǔn)篩，冰箱中低溫保存，備用。

1.1.2 提取溶劑 丙酮、氯仿(國藥集團化學(xué)試劑有限公司)。

1.1.3 供試植物 蘿卜(大連青蘿卜)、萵苣(現(xiàn)代舞裙)，購于種子市場；馬唐、稗草種子，采于延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院試驗農(nóng)場。

1.2 方法

1.2.1活性成分提取 備用樣品分2份，每份20g，用濾紙包封，分別放入索氏提取器，分別加入250ml丙酮、氯仿，水浴加熱，在略高于沸點溫度回流4h，回收溶劑，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至浸膏，在恒溫水浴鍋中把有機溶劑揮發(fā)干凈，再用冷凍干燥機將浸膏干燥成粉狀，4℃冰箱中保存待用。

提取率(％)=提取干物質(zhì)質(zhì)量／樣品重量×100

1.2.2 除草劑試驗的測定方法 挑選籽粒飽滿的4種植物種子若干，用紗布包好放在流動水中6h，待種子吸水充足后，放于50℃左右的溫水中進行表面消毒，殺滅種子表面的大部分病菌。取2種有機溶劑和干燥的提取物，把溶液稀釋成3個濃度，即500、259、125mg／L，每個濃度6ml，用移液槍吸取各濃度的藥液4ml，分別置于放有濾紙的培養(yǎng)瓶中，重復(fù)3次。將加有藥液的培養(yǎng)瓶置于通風(fēng)廚中3～4h，讓溶劑充分發(fā)揮后，濾紙即為藥膜。用同樣的方法分別取4ml相同有機溶劑處理濾紙作為對照。選取消毒的種子放到藥膜上，每皿50粒，每個處理共150粒；然后每個皿加水6ml，放入27℃光照培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)7天，測定株高、根長，計算抑制率。

抑制率(％)=(對照的株高或根長－處理的株高或根長)／對照的株高或根長×100

2 結(jié)果與分析

2.1 不同有機溶劑的提取率

經(jīng)DPS多重比較分析，2種有機溶劑對問荊地上部的提取率差異顯著，氯仿的提取率為4.45％，明顯大于丙酮的提取率(2.72％)。根據(jù)相似相溶原理，可以推斷，問荊地上部中化學(xué)物質(zhì)親脂性的較多，而親水性者較少。

2.2 丙酮提取物對4種供試植物株高的抑制作用

由表1可以看出，問荊的丙酮提取物中含有對這4種植物株高生長的抑制活性物質(zhì)，其中對蘿卜、萵苣、馬唐、稗草的ECso分別是1342.15、22104.53、19958.28、449.88mg／L。對植物株高生長抑制作用的基本順序是：萵苣＞馬唐＞蘿卜＞稗草。對萵苣的抑制效果明顯高于其它3種植物的抑制效果。

2.3 丙酮提取物對4種供試植物根長的抑制作用

由表2可以看出，問荊的丙酮提取物中含有對這4種植物根長生長的抑制活性物質(zhì)，其中對蘿卜、萵苣、馬唐、稗草的ECso分別是3007.88、370246.92、32909.07、123269.70mg／L。對植物根長抑制作用的基本順序是：萵苣＞稗草＞馬唐＞蘿卜。對萵苣的抑制效果明顯高于其它3種植物的抑制效果。

2.4 氯仿提取物對4種供試植物株高的抑制作用

由表3可以看出，問荊的氯仿提取物中含有對這4種植物株高生長的抑制活性物質(zhì)，其中對蘿卜、萵苣、馬唐、稗草的ECso分別是1327.43、1181526.27、446471.14、176689.97mg／L。對植物株高生長抑制作用的基本順序是：萵苣＞馬唐＞稗草＞蘿卜。對萵苣的抑制效果明顯高于其它3種植物的抑制效果。

2.5 氯仿提取物對4種供試植物根長的抑制作用

由表4可以看出，問荊的氯仿提取物中含有對這4種植物根長生長的抑制活性物質(zhì)，其中對蘿卜、萵苣、馬唐、稗草的ECso分別是2471.94、527987.90、40769.26、73920.46mg／L。對植物株高生長抑制作用的基本順序是：萵苣＞稗草＞馬唐＞蘿卜。對萵苣的抑制效果明顯高于其它3種植物的抑制效果。

3 結(jié)論與討論

在化學(xué)提取流程中，選用何種有機溶劑能夠最大限度地提取和分離出抑制活性物質(zhì)至關(guān)重要。本研究選用丙酮、氯仿兩種有機溶劑，采用索氏提取法對問荊地上部的活性成分進行了提取和活性測定。根據(jù)相似相溶的原理，推測活性成分中親脂性化合物較多，兩種有機溶劑的提取物對萵苣的抑制效果明顯強于其它3種植物。至于活性物質(zhì)的具體結(jié)構(gòu)與活性的關(guān)系等問題，尚需進一步分離和生物活性跟蹤測定。