摘要：根據(jù)各藥劑的藥效范圍和理化特性選擇了11種單劑及其部分復(fù)配劑進(jìn)行了室內(nèi)藥劑篩選試驗(yàn)。結(jié)果表明：72％農(nóng)用硫酸鏈霉素及氧氯化銅：消菌靈=1：1對(duì)煙草青枯病的抑菌效果較好，且藥效穩(wěn)定。

關(guān)鍵詞：

中圖分類號(hào)：S435.72 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A 文章編號(hào)：1001—4942(2010)0g—0076—03

煙草青枯病[Pseudomonas solarlacearul'n(E.F Smith)Dowson]，于1880年在美國首次報(bào)道，現(xiàn)已成為世界各產(chǎn)煙區(qū)最主要的病害之一，是威脅世界煙草生產(chǎn)的一大毀滅性病害。在中國，此病在河南、山東、江蘇、云南、廣西、河北、湖南、廣東、福建等地普遍發(fā)生。近年來，煙草青枯病在山東有逐年加重的趨勢，且常與黑脛病并發(fā)，使危害更加嚴(yán)重。本試驗(yàn)選擇了11種單劑及其部分復(fù)配制劑進(jìn)行室內(nèi)篩選，以確定各種藥劑的抑菌效果，為煙草青枯病的綜合防治提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1供試病菌

煙草青枯病病原菌：采自山東省主產(chǎn)煙區(qū)，并由本實(shí)驗(yàn)室分離保存。

1.2供試藥劑 72％農(nóng)用硫酸鏈霉素可溶性粉劑(華北制藥集團(tuán)制劑有限公司)、90％新植霉素可溶性粉劑(四川省廣漢農(nóng)豐化工廠)、77％可殺得2000可濕性粉劑(美國國信公司)、10％細(xì)菌殺可溶性粉劑(石家莊曙光制藥廠)、50％氧氯化銅可濕性粉劑(上海華亭化工廠有限公司)、25％多菌靈可濕性粉劑(四川國光農(nóng)化有限公司)、3％克菌康可溶性粉劑(廈門凱利生物制品有限公司)、50％消菌靈水溶性粉劑(南京農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)農(nóng)藥廠常州分廠)、60％百菌通可濕性粉劑(齊齊哈爾市億達(dá)高科技化工研究所)、30％DT可濕性粉劑(齊齊哈爾市化工研究所)、40％菌核凈可濕性粉劑(浙江省溫州市鹿城植保化學(xué)廠)。

1.3試驗(yàn)方法

l. 3.1不同單劑對(duì)煙草青枯病菌的抑制效果活化病原菌，用無菌水配成濃度約為3×108cfu／ml的細(xì)菌懸浮液。將滅菌的100 ml NA培養(yǎng)基加熱溶化完全，冷卻至45~C左右，迅速吸取10ml細(xì)菌懸浮液注入培養(yǎng)基內(nèi)，充分混勻后迅速倒入培養(yǎng)皿，制成平板，待凝固后備用。

將各藥劑配置成100倍的母液，再分別用無菌水稀釋到200、400倍，將蘸有各種藥劑的直徑為6 mm的無菌濾紙圓片平放于制好的平面培養(yǎng)基中央，重復(fù)3次，蘸有無菌水的無菌濾紙片作為對(duì)照。將培養(yǎng)皿置于生化培養(yǎng)箱內(nèi)(27±1)℃培養(yǎng)，分別于24、48 h檢查抑菌效果，并用十字交叉法測量抑菌圈直徑并觀察透明度。

1.3.2復(fù)配藥劑對(duì)煙草青枯病痛原菌的抑制效果篩選抑菌效果好的單劑經(jīng)優(yōu)化組合進(jìn)行復(fù)配，濃度比為1：l，用無菌水稀釋到400倍，進(jìn)行抑菌效果測定，方法同1.3.1。

藥劑抑菌效果的穩(wěn)定性可以用抑菌圈直徑縮小率來表示：

抑菌圈縮小率(％)：(第一次測量直徑一第二次測量直徑)／第一次測量直徑×100

2 結(jié)果與分析

2.1不同單劑對(duì)煙草青枯病菌的抑制效果

試驗(yàn)結(jié)果(表1)表明：供試藥劑大多數(shù)對(duì)青枯病菌有抑制作用，不同藥劑之間的抑菌作用有較明顯差異，根據(jù)24、48 h抑菌效果的測定，其中農(nóng)用硫酸鏈霉素效果最好且穩(wěn)定，且隨著稀釋倍數(shù)的增大，抑菌效果變化不大，其中24 h時(shí)100倍液抑菌圈直徑為27.5 mn'l，透明度高，400倍液抑菌圈直徑為26.O mm。新植霉素、氧氯化銅、可殺得效果次之，24 h抑菌圈直徑在12.1—16.7mm之間，多菌靈、克菌康、消菌靈、百菌通、DT抑菌效果差，24 h抑菌圈直徑在6.5—10.1mm之間；細(xì)菌殺和DT在低濃度下無抑菌效果；菌核凈無抑菌效果。

2.2復(fù)配藥劑對(duì)煙草青枯病菌的抑制效果

選擇了抑菌效果及抑菌圈透明程度中等以上的單劑復(fù)配進(jìn)行抑菌效果的測定，結(jié)果(表2)表明，復(fù)配劑Ⅻ對(duì)煙草青枯病病原菌抑制效果最好，400倍液24 h抑菌圈直徑達(dá)16.5 mm，且透明度高，變化率低，抑菌圈縮小率為1.2％，穩(wěn)定性好。復(fù)配劑I、Ⅳ、Ⅶ、Ⅱ抑制效果次之，24 h抑菌圈直徑在12.8一14.8／11／11之間，且透明度高。藥劑X、Ⅲ、Ⅵ、Ⅷ、V、Ⅺ、Ⅸ抑菌效果依次降低，24 h抑菌圈直徑在8.8一12.4 ml之間，抑菌圈縮小率大，抑菌效果差。

3 結(jié)論與討論

通過對(duì)各種藥劑藥效范圍和作用特點(diǎn)的分析，選擇了11種單劑進(jìn)行室內(nèi)抑菌試驗(yàn)。結(jié)果表明：72％農(nóng)用硫酸鏈霉素、50％氧氯化銅、90％新植霉素、77％可殺得、50％消菌靈、3％克菌康、25％多菌靈對(duì)煙草青枯病菌均有抑制效果，但差別明顯，隨著稀釋倍數(shù)增大，抑菌效果降低，且穩(wěn)定性較差。其中72％農(nóng)用硫酸鏈霉素穩(wěn)定性高，1(90倍液抑菌圈直徑為27.5 mla'l，400倍液抑菌圈直徑為26.0 mm，隨稀釋倍數(shù)的增大，抑菌效果變化不大。

為了選擇更有效的藥劑，對(duì)抑菌效果較好的單劑進(jìn)行了復(fù)配，挑選抑菌效果較好的復(fù)配劑進(jìn)行400倍液的藥效試驗(yàn)。結(jié)果表明：復(fù)配劑Ⅻ、I、Ⅳ、Ⅶ、Ⅱ抑制效果較好，其中藥劑Ⅻ400倍液抑菌圈直徑為16.5 mm，透明度高，穩(wěn)定性好，抑菌圈縮小率為1.2％。

室內(nèi)毒力測定抑菌圈直徑大的和抑菌圈直徑變化小的，其田間藥效較好。抑菌圈直徑雖然大，但隨著時(shí)間的變化縮小得較快，田間藥效則不理想。單獨(dú)考察農(nóng)藥的抑菌圈是不全面的，綜合考慮抑菌圈和抑菌圈的變化情況可以反映出田間藥效的好壞。

綜合考慮各種藥劑抑菌圈直徑的大小、透明度和抑菌圈直徑變化?？梢钥闯觯?2％農(nóng)用硫酸鏈霉素的效果最為理想，抑菌圈直徑最大，透明度高，穩(wěn)定性好。復(fù)配藥劑Ⅻ次之，抑菌圈縮小率低，較為穩(wěn)定。

關(guān)于針對(duì)細(xì)菌的抑菌活性生物測定試驗(yàn)報(bào)道很多，但目前還沒有一個(gè)能夠精確測定細(xì)菌抑菌效果的標(biāo)準(zhǔn)生物測定方法，通過一般的測定方法只能夠得到抑菌圈大小和藥劑計(jì)量的線性關(guān)系。鑒于以上原因，關(guān)于復(fù)配劑的效果是否與單劑相比具有拮抗、加和或增效作用就很難衡量，更不可能用精確的數(shù)據(jù)來表達(dá)。同時(shí)由于本試驗(yàn)結(jié)果是通過室內(nèi)毒力測定得出，各藥劑的防治效果還需要通過盆栽試驗(yàn)和田間試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。