初 洋，倪新江，姜海華，鄭 麗

（煙臺(tái)大學(xué)化學(xué)生物理工學(xué)院，山東 煙臺(tái) 264005）

姬菇（Pleurotus cornucopiae）、榆黃蘑（Pleurotus citrinopleatus）、鮑魚(yú)菇（Pleurotus abalonus）都隸屬于真菌門(mén)、擔(dān)子菌綱、同擔(dān)子菌亞綱、傘菌目、側(cè)耳科、側(cè)耳屬，是目前人工栽培的食、藥兼用的食用菌，在國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)深受歡迎[1－4]。菌絲體和子實(shí)體的解剖學(xué)性狀是真菌分類的重要鑒別特征。但關(guān)于食用菌菌絲體和子實(shí)體的解剖學(xué)資料還比較缺乏，其研究方法也很少報(bào)道。為了解側(cè)耳屬食用菌菌絲體和子實(shí)體的解剖結(jié)構(gòu)并探索真菌子實(shí)體解剖學(xué)研究中的技術(shù)和方法，以姬菇、榆黃蘑和鮑魚(yú)菇的菌絲體和子實(shí)體為材料進(jìn)行了研究。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 菌種

姬菇、榆黃蘑、鮑魚(yú)菇，購(gòu)于江蘇天達(dá)食用菌有限公司。

1.2 培養(yǎng)基配方

母種采用PDA培養(yǎng)基。原種及栽培料采用棉籽殼培養(yǎng)基：棉籽殼78%、麥麩20%、蔗糖1%、硫酸鈣1%，料水比為 1∶1.5。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 栽培方法

母種和原種制作方法按常規(guī)，栽培采用17 cm×34 cm聚丙烯袋，接入原種，25℃恒溫培養(yǎng)30 d左右，菌絲滿袋后移入菇房開(kāi)袋出菇。

2.2 菌絲的插片培養(yǎng)及顯微結(jié)構(gòu)觀察

將母種切割成小塊接種到PDA平板上，在距離菌種塊0.5 cm左右處，斜插入滅菌的蓋玻片倒置培養(yǎng)3 d～5 d，待菌絲生長(zhǎng)到蓋玻片上后輕輕拔起蓋玻片進(jìn)行染色制片。制片固定用FAA固定液，染色用蘇木精和曙紅染色。切片制好后用數(shù)碼顯微系統(tǒng)觀察、拍照。

2.3 子實(shí)體顯微結(jié)構(gòu)觀察

子實(shí)體成熟后將帶菌褶的子實(shí)體，切割成5 mm見(jiàn)方的小塊用Licent氏固定液固定，用石蠟包埋法制片，染色用蘇木精和曙紅染色。切片制好后用數(shù)碼顯微系統(tǒng)觀察、拍照。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 菌絲體解剖學(xué)比較

3種食用菌菌絲體解剖學(xué)比較見(jiàn)圖1～圖6。

圖1 姬菇菌絲

圖2 榆黃蘑菌絲

圖3 鮑魚(yú)菇菌絲

圖4 姬菇菌絲顯微結(jié)構(gòu)（1 000×）

圖5 榆黃蘑菌絲顯微結(jié)構(gòu)（1 000×）

圖6 鮑魚(yú)菇菌絲顯微結(jié)構(gòu)（1 000×）

由圖1～圖3可見(jiàn)姬菇菌絲生長(zhǎng)較濃密、潔白、邊緣整齊明顯呈放射狀生長(zhǎng)，而榆黃蘑和鮑魚(yú)菇菌絲生長(zhǎng)較稀、較弱，鮑魚(yú)菇生長(zhǎng)到一定時(shí)期會(huì)形成分生孢子并分泌黑色液滴。由圖4～圖6可見(jiàn)，3種食用菌菌絲均具有鎖狀聯(lián)合，隔膜明顯，姬菇和榆黃蘑菌絲粗壯，直徑3 μm～8 μm，鮑魚(yú)菇菌絲較細(xì)，直徑2 μm～4 μm，姬菇較密，分枝較多，榆黃蘑和鮑魚(yú)菇分枝較少。

3.2 子實(shí)體解剖學(xué)比較

3.2.1 子實(shí)體形態(tài)特征觀察

子實(shí)體形態(tài)特征觀察見(jiàn)圖7～圖9。

圖7 姬菇子實(shí)體

圖8 榆黃蘑子實(shí)體

圖9 鮑魚(yú)菇子實(shí)體

由圖7、圖8可見(jiàn)，姬菇和榆黃蘑子實(shí)體覆瓦狀叢生，菌蓋光滑，邊緣內(nèi)卷，半圓形，基部下凹呈漏斗狀，菌蓋直徑3 cm～6 cm，菌柄較長(zhǎng)側(cè)生，圓柱狀內(nèi)實(shí)，菌褶白色平滑，較密，延生至菌柄，姬菇菌蓋灰色，榆黃蘑菌蓋黃色。由圖9可見(jiàn)，鮑魚(yú)菇菌袋表面覆蓋著分生孢子分泌的黑色液體，子實(shí)體群生，菌蓋表面有疣狀突起，黑褐色，邊緣平展，扇形，直徑5 cm～12 cm，菌柄較短側(cè)生，菌褶延生，間距較寬，邊緣灰黑色內(nèi)白色。

3.2.2 菌褶解剖學(xué)性狀比較

菌褶解剖學(xué)性狀比較情況見(jiàn)圖10～圖12。

圖10 姬菇菌褶（1 000×）

圖11 榆黃蘑菌褶（1 000×）

圖12 鮑魚(yú)菇菌褶（1 000×）

由圖10～圖12可見(jiàn)，姬菇子實(shí)層厚度為24.1 μm～30.8 μm，擔(dān)子（3.86～4.39）μm×（8.98～10.87）μm，擔(dān)子梗長(zhǎng)4.28 μm～5.65 μm。 榆黃蘑子實(shí)層 厚度為 52.4 μm～70.6 μm，擔(dān)子（6.51～8.23）μm×（8.12～9.77）μm，擔(dān)子梗長(zhǎng)3.21 μm～4.15 μm。 鮑魚(yú)菇子實(shí)層厚度為 58.5 μm～64.79 μm，擔(dān)子（9.56～13.21）μm×（44.91～47）μm，擔(dān)子梗長(zhǎng)11.29 μm。姬菇子實(shí)層較薄且疏松，而榆黃蘑和鮑魚(yú)菇子實(shí)層厚且緊密，姬菇的擔(dān)子近圓球形，較短，排列緊密，榆黃蘑和鮑魚(yú)菇擔(dān)子為球棒形，姬菇和榆黃蘑的擔(dān)孢子梗細(xì)長(zhǎng)，鮑魚(yú)菇的較粗。結(jié)合不同方向切片觀察，可見(jiàn)3種真菌擔(dān)孢子梗皆為4個(gè)。姬菇菌褶內(nèi)部的菌髓全由絲狀菌絲構(gòu)成，菌髓中的菌絲交錯(cuò)排列，較疏松，榆黃蘑和鮑魚(yú)菇的菌髓也由絲狀菌絲構(gòu)成，排列較緊密。

3.2.3 菌柄解剖學(xué)性狀比較

菌柄解剖學(xué)性狀比較情況見(jiàn)圖13～圖18。

由圖13、圖14、圖16、圖17可見(jiàn)，姬菇和榆黃蘑菌柄由較粗的絲狀菌絲沿菌柄方向松散排列，菌絲束中間有較大的孔隙。圖15、圖18顯示，鮑魚(yú)菇菌柄由較細(xì)短的菌絲交錯(cuò)緊密排列，菌絲間縫隙較小。

圖13 姬菇菌柄橫切（100×）

圖14 榆黃蘑菌柄橫切（100×）

圖15 鮑魚(yú)菇菌柄橫切（100×）

圖16 姬菇菌柄縱切（400×）

圖17 榆黃蘑菌柄縱切（400×）

圖18 鮑魚(yú)菇菌柄縱切（400×）

3.3 孢子解剖學(xué)比較

3.3.1 孢子印比較

3種食用菌孢子印比較見(jiàn)圖19～圖21。

圖19 姬菇孢子印

圖20 榆黃蘑孢子印

圖21 鮑魚(yú)菇孢子印

圖19～圖21顯示，姬菇、榆黃蘑和鮑魚(yú)菇的孢子印均為白色，扇形，菌柄側(cè)生，姬菇和榆黃蘑的孢子顆粒較細(xì)小，鮑魚(yú)菇孢子顆粒較粗，姬菇菌褶密，輪廓不十分清晰，榆黃蘑和鮑魚(yú)菇菌褶間距寬，輪廓清楚。

3.3.2 擔(dān)孢子形態(tài)比較

3種食用菌擔(dān)孢子形態(tài)比較見(jiàn)圖22～圖24。

圖22 姬菇孢子（1 000×）

圖23 榆黃蘑孢子（1 000×）

圖24 鮑魚(yú)菇孢子（1 000×）

由圖 22可見(jiàn)，姬菇孢子（7～11）μm×（3～4）μm，長(zhǎng)橢圓形，一端具有尖突，表面光滑，可見(jiàn)內(nèi)有多個(gè)小油滴。 由圖23可見(jiàn)，榆黃蘑孢子（8～12）μm×（3～4）μm，長(zhǎng)橢圓形，一端有尖突，表面光滑，內(nèi)有多個(gè)小油滴。由圖 24可見(jiàn)，鮑魚(yú)菇孢子（18～24）μm×（5～7）μm，長(zhǎng)卵圓形，表面光滑無(wú)明顯尖突，內(nèi)有2到3個(gè)大油滴。

4 討論

姬菇、榆黃蘑、鮑魚(yú)菇均為側(cè)耳屬真菌，它們相同點(diǎn)是菌絲均具有鎖狀聯(lián)合和隔膜，子實(shí)體菌柄都側(cè)生，菌蓋形狀相似，子實(shí)體可由1個(gè)擔(dān)子產(chǎn)生4個(gè)擔(dān)孢子，孢子形狀接近并皆含油滴，孢子印都為白色，這些特征與同屬的其他種一致[5，6]。3種真菌結(jié)構(gòu)也存在著較多差異，姬菇和榆黃蘑菌絲生長(zhǎng)較快而鮑魚(yú)菇生長(zhǎng)較慢，姬菇菌絲較濃密而鮑魚(yú)菇和榆黃蘑較疏松。鮑魚(yú)菇菌絲的最顯著特點(diǎn)是生長(zhǎng)到一定時(shí)期會(huì)形成分生孢子并分泌黑色液滴。姬菇和鮑魚(yú)菇菌蓋顏色為灰黑色，榆黃蘑為黃色。姬菇和榆黃蘑出菇早、產(chǎn)量高、轉(zhuǎn)潮快，它們子實(shí)體小而多，鮑魚(yú)菇大而少。姬菇和榆黃蘑子實(shí)體生長(zhǎng)快，鮑魚(yú)菇子實(shí)體生長(zhǎng)慢，因此導(dǎo)致姬菇和榆黃蘑菌柄內(nèi)部菌絲結(jié)構(gòu)比鮑魚(yú)菇疏松。鮑魚(yú)菇的擔(dān)子、擔(dān)孢子梗都比姬菇和榆黃蘑的粗壯，因此其產(chǎn)生的孢子較大且油滴多。

[1]王燦琴，何鐵光，陳振妮，等.姬菇二號(hào)的生物學(xué)特性及栽培技術(shù)[J].北方園藝，2005(6)：98.

[2]楊鳳苓，賈樂(lè)，任軒.姬菇原生質(zhì)體制備與再生條件初探[J].生物技術(shù)，2007，17(6)：37－40.

[3]李娟，倪新江，樊守金，等.金頂側(cè)耳不同生長(zhǎng)期幾種胞外酶活性變化[J].吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，28(6)：619－622.

[4]吳建坤.鮑魚(yú)菇高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)栽培技術(shù)要點(diǎn)[J].食用菌，2007(1)：51.

[5]陳再鳴，江家余.側(cè)耳屬菌株的菌絲生長(zhǎng)特征與其種性相關(guān)性研究[J].食用菌學(xué)報(bào)，1998，5(1)：18－24.

[6]王少先，林曉民.平菇金針菇子實(shí)體解剖學(xué)研究[J].中國(guó)食用菌，1999(2)：9－10.