周建科 楊冬霞 徐鵬 耿向飛

（河北大學(xué)理化分析中心河北省分析科學(xué)技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，保定071002）

固相分散萃?。合嗌V法測(cè)定豆沙中的富馬酸二甲酯

周建科*楊冬霞 徐鵬 耿向飛

（河北大學(xué)理化分析中心河北省分析科學(xué)技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，保定071002）

采用固相分散萃取技術(shù)對(duì)豆沙樣品進(jìn)行預(yù)處理，用高效液相色譜法測(cè)定其中的富馬酸二甲酯。Diamonsil C18色譜柱，柱溫25℃，甲醇－水（體積比為55∶45）作流動(dòng)相，流速1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)220 nm。富馬酸二甲酯在0.136 μg/mL～33.5 μg/mL范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)為0.9998，方法檢出限0.82 μg/g，平均回收率82.5%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.3%。市售豆沙餡中未檢出富馬酸二甲酯。

固相分散萃?。桓咝б合嗌V；富馬酸二甲酯

AbstractA solid phase dispersion extraction-high performance liquid chromatography was used for the determination of dimethyl fumarate（DMF）in bean paste. Anhydrous sodium sulfate was used as dispersant and dehydrant.DMF was analyzed by Diamonsil C18column using UV detector at 220 nm.The mobile phase composed of a mixture of methanol and water（55∶45，V/V），with the flow rate of 1.0 mL/min.The column temperature was 25℃.The linear range was 0.136 μg/ mL～33.5 μg/mLwith correlation coefficient of0.999 8. The detection limit was 0.82 μg/g.The average recovery rate was 82.5%，and relative standard deviation was 3.3%.Dimethyl Fumarate wasn't detected in bean paste sold in the market.

Keywordssolid phase dispersion extractin；liquid chromatography；dimethyl fumarate

隨著人們生活水平的提高，食品中添加劑的濫用等食品安全問題越來越受到關(guān)注。食品添加劑中的防腐劑是一類保持食品原有品質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的物質(zhì)。富馬酸二甲酯（DMF）是20世紀(jì)80年代開發(fā)的一種防腐劑，其防霉效果好，抗菌活性受pH影響小，曾被廣泛用于餅干、面粉、熟食等食品中。后經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，富馬酸二甲酯易水解生成甲醇，對(duì)人體的眼睛、皮膚等有刺激作用，對(duì)肝、腎毒副作用很大，目前我國(guó)已禁止在食品中使用。為防止不法企業(yè)的繼續(xù)濫用，建立快速、高效檢測(cè)富馬酸二甲酯的方法對(duì)食品行業(yè)的監(jiān)管具有重要意義。

目前，測(cè)定食品中的富馬酸二甲酯大多采用氣相色譜（GC）、薄層色譜、紫外分光光度法和高效液相色譜（HPLC）等方法，高效液相色譜是分析食品中防腐劑的常用方法。對(duì)于食品檢測(cè)，常用的前處理技術(shù)主要包括溶劑萃取法（SE）、固相萃取法（SPE）、固相微萃取技術(shù)（SPME）和基質(zhì)固相分散技術(shù)（MSPD）等。本文采用一種新的樣品前處理技術(shù)-固相分散萃取，該方法與MSPD相比，省略了裝填柱子、選擇適當(dāng)分散劑、洗脫劑等步驟，方法操作簡(jiǎn)單，結(jié)合高效液相色譜對(duì)豆沙餡中的富馬酸二甲酯進(jìn)行了測(cè)定。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器和試劑

島津LC～6A高壓輸液泵；7125型手動(dòng)進(jìn)樣閥；LINEAR200紫外檢測(cè)器；N2000色譜工作站（浙江大學(xué)智能信息工程研究所）；旋渦混合器。

富馬酸二甲酯（Alfa Aesar）；甲醇為色譜純；無水硫酸鈉為分析純（300℃馬弗爐烘烤）；二次水；豆沙餡購(gòu)自超市。

1.2 色譜條件

色譜柱：Diamonsil C18色譜柱（250×4.6 mm，5 μm）；柱溫25℃；流動(dòng)相：甲醇－水（體積比55∶45）；流速1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)220 nm；進(jìn)樣量10 μL。采用色譜峰的保留時(shí)間定性，外標(biāo)法峰面積定量。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取富馬酸二甲酯標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶解定容，配成質(zhì)量濃度為1.36 mg/mL的儲(chǔ)備液，4℃冰箱存放。工作溶液：準(zhǔn)確量取適量?jī)?chǔ)備液，甲醇為溶劑逐級(jí)稀釋，配制系列工作溶液。

1.4 樣品預(yù)處理

準(zhǔn)確稱取2.0 g豆沙和5.0 g無水硫酸鈉，于研缽中混合研磨至豆沙分散、脫水后變?yōu)榧?xì)小顆粒。將研磨好的混合物轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加入6 mL甲醇，旋渦震蕩2 min，靜置片刻，傾析上清液至15 mL刻度試管中。殘?jiān)貜?fù)萃取兩次，每次加入甲醇的量為5 mL，合并萃取液至試管。漏斗過濾，調(diào)整濾液總體積為12 mL。移取適量濾液經(jīng)0.45 um濾膜過濾，取10 μL進(jìn)樣分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件優(yōu)化

實(shí)驗(yàn)考察了不同體積比的甲醇－水做流動(dòng)相時(shí)富馬酸二甲酯的出峰情況。結(jié)果表明，當(dāng)甲醇與水的體積比為55∶45時(shí)，保留時(shí)間短且峰形較好。故本實(shí)驗(yàn)采用體積比為55∶45的甲醇－水作為流動(dòng)相。

取一定濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液從200 nm～320 nm進(jìn)行光譜掃描，結(jié)果顯示在220 nm處富馬酸二甲酯紫外吸收較強(qiáng)且干擾少，故選220 nm為最佳檢測(cè)波長(zhǎng)。標(biāo)準(zhǔn)物色譜圖見圖1。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)物色譜圖

2.2 分散劑用量

樣品預(yù)處理時(shí)，選擇無水Na2SO4作為分散劑和脫水劑，可以起到破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)、分散樣品以及脫水的作用。本實(shí)驗(yàn)考察了無水Na2SO4與豆沙質(zhì)量比分別為1∶1、2∶1、2.5∶1和3∶1時(shí)的分散、脫水情況。結(jié)果表明，質(zhì)量比為1∶1和2∶1時(shí)，豆沙分散、脫水不充分；當(dāng)質(zhì)量比為3∶1時(shí)，分散、脫水效果好，但消耗萃取溶劑體積過大。從處理效果和溶劑用量?jī)煞矫婵紤]，本試驗(yàn)選擇分散劑與樣品質(zhì)量的最佳比例為2.5∶1。

2.3 萃取劑體積

富馬酸二甲酯在甲醇中有較大的溶解度且雜質(zhì)干擾少，因此本實(shí)驗(yàn)采用甲醇作為萃取劑?？疾炝?0 mL～18 mL的一系列萃取劑體積對(duì)回收率的影響。如圖2所示，當(dāng)甲醇體積為16 mL時(shí)，回收率最高，故選擇16 mL作為最佳萃取劑體積。

圖2 甲醇體積對(duì)回收率的影響

2.4 萃取次數(shù)

本實(shí)驗(yàn)考察了萃取次數(shù)對(duì)回收率的影響。結(jié)果表明，萃取一次和兩次時(shí)，回收率低于70%。萃取三次時(shí)，回收率顯著提高，可達(dá)到80%～90%。再增加萃取次數(shù)，會(huì)導(dǎo)致操作繁雜，分析時(shí)間過長(zhǎng)，故選擇最佳萃取次數(shù)為三次。

2.5 線性方程及檢出限

移取系列標(biāo)準(zhǔn)工作液，在所選的色譜條件下，以峰面積對(duì)質(zhì)量濃度繪制工作曲線。在0.136 μg/mL～33.5 μg/mL范圍內(nèi)富馬酸二甲酯線性良好，DMF的線性相關(guān)系數(shù)及儀器檢出限見表1。

表1 線性方程

2.6 回收率和精密度

取2.0 g豆沙，加入適量富馬酸二甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，在選定的色譜條件下，測(cè)定樣品加標(biāo)后富馬酸二甲酯的含量，平行測(cè)定六次，計(jì)算相應(yīng)的回收率和精密度。結(jié)果見表2。

表2 平均回收率及RSD(n=6)

2.7 樣品測(cè)定

在優(yōu)化的色譜條件下我們對(duì)超市購(gòu)買的豆沙餡進(jìn)行了測(cè)定,平行測(cè)定三次，未檢出富馬酸二甲酯。實(shí)際樣品色譜圖見圖3。

圖3 實(shí)際樣品色譜圖

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)建立了固相分散萃取-高效液相色譜法測(cè)定豆沙中富馬酸二甲酯的方法。固相分散萃取技術(shù)處理豆沙樣品，設(shè)備簡(jiǎn)單，操作容易，萃取時(shí)間短，所用試劑成本低，是一種簡(jiǎn)便、快捷、經(jīng)濟(jì)的方法。市售豆沙中未檢出富馬酸二甲酯。

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Determination ofdimethylfumarate in bean paste by liquid chromatography after solid phase dispersion extraction

ZHOUJian-ke*YANGDong-xiaXUPengGENGXiang-fei
（Research center ofphysics and chemistryanalysis，keylaboratoryofanalytical science and technologyofHebei Province，Hebei University，Baoding 071002，China）

*周建科，男，1956年出生，1982年畢業(yè)于河北大學(xué)，研究員。

2010-07-14