何國堅(jiān) 李程 劉雄偉

臨床上，診斷腎臟及尿道疾病的主要方法之一是對尿中有形成分的檢測，能為臨床提供診斷及預(yù)后的依據(jù)。血尿是泌尿系統(tǒng)疾病常見的臨床癥狀之一，因此，明確血尿的來源和性質(zhì)對臨床診斷和治療有重要意義［1］。UF-1000i作為目前較為先進(jìn)的尿有形成分分析系統(tǒng)，用紅色半導(dǎo)體激光束照射經(jīng)過核酸染色后在鞘流貫流分析池中形成的鞘流標(biāo)本，并通過對從各粒子產(chǎn)生的前方散射光、側(cè)向散射光以及側(cè)向熒光信號轉(zhuǎn)換的光電信號進(jìn)行分析，從而對各個(gè)粒子進(jìn)行識別。同時(shí)還可以提供如:70%紅細(xì)胞前向散射光(RBCP70FSC)，紅細(xì)胞前向散射光分布寬度(RBC-FCS-DW)，大紅細(xì)胞(Large-RBC)，小紅細(xì)胞(Small-RBC)等紅細(xì)胞信息(RBC-Info)。為探討UF-1000i對明確血尿來源和性質(zhì)的準(zhǔn)確性，收集2009年我院收治的住院及門診患者的尿樣標(biāo)本，對其中檢測有紅細(xì)胞的240例進(jìn)行分析。應(yīng)用UF-1000i檢測該標(biāo)本，并以顯微鏡檢測結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)［2］，計(jì)算UF-1000i符合率，同時(shí)比較腎源性血尿與非腎源性血尿的紅細(xì)胞差異，為臨床診斷及鑒別診斷腎臟疾病提供客觀依據(jù)。先將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2009年我院住院及門診患者的血尿標(biāo)本240例，標(biāo)本的確定符合血尿的診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中男124例，女116例，年齡14～68歲，平均42.6歲。根據(jù)病史、血、尿生化檢查，B超、CT等影像學(xué)檢查，膀胱鏡及必要的免疫學(xué)檢查，確診為腎小球疾病患者156例，非腎小球疾病84例。所有患者均用一次性清潔尿杯留取新鮮晨尿或隨機(jī)尿(女性患者避開月經(jīng)期)，分別經(jīng)UF-1000 i尿沉渣分析儀和顯微鏡進(jìn)行檢測。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 日本SYSMEX公司生產(chǎn)的 UF-1000 i尿沉渣分析儀，其使用試劑全部為原裝配套試劑及質(zhì)控品。批號如下:UFII SHEATH(鞘液)G0005;UFII SEARCH-SED(染色液)A9004;UFII PACK-SED(稀釋液)A9006;UFII SEARCH--SED(染色液)A9006;UFII PACK-BAC(稀釋液)A9003。質(zhì)控品YS9016。

1.2.2 日本奧林巴斯光學(xué)顯微鏡，離心機(jī)、離心管等。

1.3 檢測方法

1.3.1 UF-1000i檢測取患者尿液10 ml于專用測定管內(nèi)。應(yīng)用UF-1000i檢測，嚴(yán)格按照使用說明進(jìn)行操作。檢測前，UF-1000i各項(xiàng)參數(shù)均應(yīng)經(jīng)校準(zhǔn)，每天用質(zhì)控品做室內(nèi)質(zhì)量控質(zhì)，儀器性能符合要求。

1.3.2 顯微鏡檢測方法 嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》［3］進(jìn)行操作。吸取10 ml尿液置于離心管中，用離心機(jī)以1300 r/min，離心5 min，棄去上層清液，取0.2 ml尿沉渣充分搖勻滴入定量計(jì)數(shù)板中。滴入計(jì)數(shù)板1 min后，計(jì)數(shù)10個(gè)大方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)目及畸形紅細(xì)胞數(shù)目，計(jì)算畸形率，檢測應(yīng)在2 h內(nèi)完成。所有標(biāo)本均由一人完成其顯微鏡下檢測，盡量避免由于觀察者主觀差異帶來的變異性。

1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn)

1.4.1 UF-1000 i檢測結(jié)果 ①非腎小球性血尿:Rbc Fsc-P70≥100且 Fsc-P70-DW≤50 ch，提示可能為均一性RBC;②腎小球性血尿:Rbc Fsc-P70≤70 ch，提示可能為非均一性RBC，即為多形性紅細(xì)胞;③混合性紅細(xì)胞:Rbc Fsc-P70≥100且 Fsc-P70-DW≥50 ch。

1.4.2 顯微鏡檢測的判斷標(biāo)準(zhǔn) 尿中紅細(xì)胞＞8000/ml即診斷為血尿。①腎小球性血尿:畸形紅細(xì)胞＞80%;②非腎小球性血尿:畸形紅細(xì)胞＜20%;③混合性血尿:畸形紅細(xì)胞介于上述兩者之間。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù) 據(jù)處理應(yīng)用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，兩樣本的比較應(yīng)用t檢驗(yàn)及χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

應(yīng)用UF-1000 i尿沉渣分析儀和顯微鏡進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表1。

表1 兩種檢測方法對紅細(xì)胞的檢測結(jié)果及符合情況(例，%)

以顯微鏡檢測結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，由表1可知，UF-1000 i尿沉渣分析儀提示紅細(xì)胞信息與顯微鏡檢查的符合率，非腎源性血尿、腎源性血尿、混合性血尿分別為 91.0%、90.5%、81.3%。

3 討論

尿液檢查是診斷及鑒別診斷泌尿系統(tǒng)疾病的必要檢查之一。而腎臟及泌尿系統(tǒng)疾病常常出現(xiàn)血尿這一臨床表現(xiàn)。因此，明確血尿的來源對疾病的診斷及鑒別診斷均有重要意義。一方面，紅細(xì)胞通過病變的腎小球?yàn)V膜時(shí)，受到物理機(jī)械損傷引起尿液紅細(xì)胞形態(tài)改變;另一方面，紅細(xì)胞在腎小管中由于受到不同的pH值環(huán)境、滲透壓、尿激酶、尿素等化學(xué)因素的影響，也可以導(dǎo)致形態(tài)的改變［4］。因此，通過對尿液中紅細(xì)胞形態(tài)及數(shù)量的檢測可以初步判斷血尿的來源。傳統(tǒng)的應(yīng)用顯微鏡檢測的方法準(zhǔn)確性較高，但進(jìn)行計(jì)數(shù)前需要對標(biāo)本進(jìn)行離心，在離心的過程中可能會導(dǎo)致紅細(xì)胞的變形和破壞［5］，計(jì)數(shù)結(jié)果容易受到觀察者主觀的影響且檢測速度較慢，難以滿足臨床需要。

UF-1000i尿沉渣分析儀是目前檢測、分析尿液有形成分的較為先進(jìn)的系統(tǒng)，對尿中有形成分直接進(jìn)行熒光染色。其應(yīng)用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)原理和電阻抗原理，利用尿液中各種有形成分的熒光強(qiáng)度和熒光脈沖寬度、前向散射光強(qiáng)度和前向散射光脈沖寬度以及電阻抗大小的不同來區(qū)別尿液中各種有形成分。但當(dāng)紅細(xì)胞在尿液中大量出現(xiàn)時(shí)，要注意草酸鈣等結(jié)晶、酵母樣細(xì)胞、白色念珠菌、其他細(xì)菌的數(shù)量以及白細(xì)胞的數(shù)量，這些都會使沉渣分析儀出現(xiàn)假陽性結(jié)果。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，UF-1000i尿沉渣分析儀提示紅細(xì)胞信息與顯微鏡檢查的符合率，非腎源性血尿、腎源性血尿、混合性血尿分別為91.0%、90.5%、81.3%，在一定程度上可以替代顯微鏡鏡檢。且該方法檢測時(shí)尿液無須離心，無主觀因素干擾，結(jié)果客觀，操作簡單，快速，具有一定的可重復(fù)性，值得在臨床上推廣應(yīng)用。

［1］Nguyen GK．Urine cytology in renal glomerular disease and value of G1 cell in the diagnosis of glomerular bleeding．Diagn Cytopathol，2003，29(2):67-73．

［2］范秀玲，劉大偉．普通光鏡觀察尿紅細(xì)胞形態(tài)鑒別血尿來源．實(shí)用醫(yī)技雜志，2005，12(10):2755．

［3］葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜．全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程．東南大學(xué)出版社，2006:293．

［4］Fischereder M．Hematuria and nephritic sediment．MMW Fortschr Med，2004，146(43):35-36，38．

［5］牟君成，童瑞強(qiáng)．尿隱血試驗(yàn)與鏡檢紅細(xì)胞的比較．第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，21(6):140．