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偽狂犬病(PR)是由偽狂犬病病毒(PRV)引起的一種急性傳染病,它臨床表現(xiàn)以發(fā)熱、奇癢(豬很少發(fā)生)、腦脊髓炎及生產(chǎn)母豬嚴(yán)重的繁殖障礙為特征。本病初期曾與狂犬病相混淆,1902年,甸牙利學(xué)者奧葉茲基第一次較為詳細(xì)地描述了該病,故命名為奧葉茲基病,我國和亞洲其他國家稱之為偽狂犬病,美國還稱之為“狂癢癥”。
偽狂犬病毒屬于皰疹病毒科甲型皰疹病毒亞科,豬皰疹病毒Ⅰ型,DNA病毒。該病的感染譜極廣,可使許多家畜、野生動(dòng)物、伴侶動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)病,目前已有44種動(dòng)物發(fā)生感染的報(bào)道。豬是該病毒最重要的儲(chǔ)存宿主和帶毒者,因而對該病的傳播起著重要作用。
本病最早發(fā)生于歐美一些國家,近半個(gè)世紀(jì),尤其近20年來,在我國也迅速傳播蔓延,致使本病成為一種遍及全球、廣泛流行的疫病。目前本病主要危害豬,給養(yǎng)豬生產(chǎn)帶來嚴(yán)重問題。國外一些專家認(rèn)為,偽狂犬病所造成的經(jīng)濟(jì)損失僅低于口蹄疫和豬瘟,全世界因該病所造成的損失每年可達(dá)幾十億美元。本病在我國的豬群發(fā)生較晚,所以對它了解較少,對其危害認(rèn)識(shí)不足,缺乏應(yīng)有的警惕和恰當(dāng)?shù)姆乐茖Σ撸率贡静×餍胁?,危害日益?yán)重。
根據(jù)臨床表現(xiàn),病程長短及不同豬群,可將它分為4種類型。
(一)繁殖障礙型表現(xiàn)為妊娠母豬產(chǎn)死胎兒、木乃伊胎兒和流產(chǎn),以及母豬長期不發(fā)情或?qū)遗洳辉械确敝痴系K綜合征。在分娩豬,以產(chǎn)死胎兒形式為主,大多是按正常懷孕日期分娩,但產(chǎn)出外觀發(fā)育正常己死亡的胎兒;其中也有活胎兒或生活力弱不會(huì)吮乳的胎兒。少數(shù)延遲分娩的母豬,大多超過預(yù)產(chǎn)期5~7 d,甚至更久。此種母豬的精神、食欲、體溫正常,于懷孕后期已增大的腹圍收縮,乳房縮小,原已在腹壁可見的胎動(dòng)消失。對此類母豬,經(jīng)注射前列腺素后才能分娩出、所分娩出的均為死胎兒,并有的胎兒發(fā)生不同程度的浸漬或輕度腐敗,也有的全部是黑褐色木乃伊胎兒。感染PRV的母豬群,還可長期不發(fā)情、屢配不孕、假孕等,有時(shí)返情率可達(dá)60%以上,往往耽誤幾個(gè)配種周期甚至永久性不孕。種公豬則出現(xiàn)睪丸炎、附睪炎、鞘膜炎等,致使睪丸、附睪萎縮硬化、失去種用價(jià)值。上述病型所造成的直接和間接經(jīng)濟(jì)損失極為巨大。
(二)仔豬腦脊髓炎—腹瀉型出生仔豬正常,從第2、3天開始發(fā)病,第3~6天是死亡高峰,死亡率近于100%,多為整窩死光,仔豬于20日齡后發(fā)生此種類型減少,但如發(fā)病仍有較高的致死率。此病型發(fā)病突然,部分體溫升高到40.0℃~41.5℃、有的體溫正?;蚵缘?。最初出現(xiàn)被毛逆立、精神沉郁、呆立等一般癥狀,繼之肌肉震顫,行走不穩(wěn)或困難,或運(yùn)動(dòng)失調(diào)、無目的移動(dòng)、盲目行走或轉(zhuǎn)圈。很快不能站立,倒地側(cè)臥或做游泳劃水狀,有的仰頭歪頸,抽搐,角弓反張,并間歇發(fā)作,在聲光及觸摸等外界刺激時(shí),常引起抽搐發(fā)作和鳴叫。倒地側(cè)臥著地多固定一側(cè),偶有左、右側(cè)交替著地,著地側(cè)的眼瞼、肩、腕等關(guān)節(jié)突出部分的皮膚,因磨擦而致脫毛、腫脹、滲出,以至淤血、出血,呈紫紅或紫黑色破潰創(chuàng)面。多數(shù)病仔豬口腔流泡沫性涎液,有的嘔吐。常流濃稠黃色鼻汁,呼吸困難。本病型患豬,病初以神經(jīng)紊亂為主,后期以麻痹為特征。還有少數(shù)病豬不表現(xiàn)抽搐等癥狀,呈現(xiàn)精神高度沉郁、衰弱無力,麻痹死亡。有些病豬伴發(fā)腹瀉,排黃綠色有腥味稀糞,從而更加劇了病況,加速了死亡。腦脊髓炎—腹瀉型的病仔豬,日齡越小,死亡率越高,病程短者僅數(shù)小時(shí),一般病程1~3 d死亡。
(三)呼吸道綜合征型多發(fā)生于斷奶后仔豬及育成豬,少數(shù)育肥豬也有發(fā)生,有時(shí)與其它型PR同時(shí)發(fā)生或相繼發(fā)生。患病豬食欲不振,精神沉郁,體溫升高,流鼻涕,打噴嚏和咳嗽,重者呼吸困難,有時(shí)呈“犬坐姿式”。剖檢可見鼻腔、喉頭、氣管等處炎癥和水腫,肺部水腫或小葉性、大葉性肺炎,并常發(fā)生便秘,偶有少數(shù)出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。此類型病豬經(jīng)對癥治療或不經(jīng)治療,可在7~10 d癥狀消失,但仍有5%~10%的死亡率。
(四)生長發(fā)育受阻型發(fā)病在15日齡以上的仔豬,部分表現(xiàn)腦脊髓炎—腹瀉而死亡,但有的癥狀輕微或無癥狀,得以存活。此部分仔豬食欲不佳,生長緩慢,還有的并發(fā)咳嗽及慢性腹瀉,抗病力下降,易感染其它疾病,而且接種豬瘟等疫苗免疫時(shí),所產(chǎn)生抗體不高。其中部分豬生長發(fā)育明顯落后,形成“僵豬”,被迫淘汰。還有部分同窩仔豬,雖沒有明顯的上述癥狀,采食量正常,但生長速度減慢,往往到8~9個(gè)月齡時(shí),體重才達(dá)到80~90 kg,飼料報(bào)酬顯著降低。
該病通常缺乏典型的大體病變,但經(jīng)??梢姖{液性到纖維素性壞死性鼻炎、壞死性扁桃體炎及口腔和上呼吸道局部淋巴結(jié)腫脹或出血。有時(shí)可見肺水腫以及肺臟散在有小壞死灶、出血點(diǎn)或肺炎灶。另外,也常發(fā)現(xiàn)有卡他性結(jié)膜炎、胃炎、腸炎和腎臟表面的針尖狀出血等變化。仔豬及流產(chǎn)胎兒的肝、脾表面可見到黃白色壞死灶,肺和扁桃體有出血性壞死灶。流產(chǎn)母豬可能有輕度子宮內(nèi)膜炎。公豬可能表現(xiàn)為陰囊水腫和滲出性鞘膜炎。
常用的診斷方法:
(一)乳膠凝集實(shí)驗(yàn)乳膠凝集實(shí)驗(yàn)利用偽狂犬病毒致敏乳膠抗原來檢測動(dòng)物血清、全血或乳汁中的抗體,將抗原先用乳膠包被,然后再與相應(yīng)血清反應(yīng), 如果幾分鐘內(nèi)凝集反應(yīng)呈現(xiàn)陽性,則判為偽狂犬病感染。該方法簡便、快速、特異、敏感。
(二)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)
美國IDEXX等公司已經(jīng)開發(fā)出鑒別診斷ELISA診斷試劑盒,并已商品化。該鑒別診斷ELISA試劑盒可以將自然感染和基因缺失疫苗免疫動(dòng)物抗體加以區(qū)別,可以用于豬偽狂犬病毒野毒感染的診斷。
(三)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)該技術(shù)是上世紀(jì)80年代建立起來的一項(xiàng)體外酶促擴(kuò)增DNA新技術(shù),可用于PRV DNA的擴(kuò)增,也適用于檢測PRV潛伏感染豬,并且能快速鑒別PR疫苗毒與野毒。該法靈敏度高,特異性強(qiáng),采取病料方便。
主要措施是合理免疫疫苗,健全防疫制度。
豬偽狂犬病疫苗主要有以下幾種:
1.滅活疫苗在偽狂犬病控制過程中,首先被應(yīng)用于生產(chǎn),安全性好,免疫豬后不存在排毒,但免疫效果不及弱毒疫苗,而且由于佐劑的應(yīng)用對免疫動(dòng)物產(chǎn)生局部和系統(tǒng)的影響。每頭豬肌肉注射2 ml,均需免疫2次。仔豬首免(生后7~10日齡)后2~3周產(chǎn)生免疫,二免(斷乳后)后1周產(chǎn)生高效價(jià)抗體,保護(hù)期可達(dá)1年。滅活疫苗雖然安全, 但它具有免疫效力不佳, 接種劑量大的缺點(diǎn),而且在接種后24 h偶爾出現(xiàn)過敏反應(yīng)等缺陷。一次接種的免疫保護(hù)期短, 給防疫工作帶來麻煩。因此有一個(gè)趨勢是發(fā)展弱毒疫苗。
2.弱毒疫苗株都是通過非豬源細(xì)胞的反復(fù)傳代,或雞胚接種傳代,或在某些突變劑的作用下,高于通常的培養(yǎng)溫度下在細(xì)胞培養(yǎng)物上反復(fù)繼代獲得。其中以Bartha-K61株和Buk株廣為應(yīng)用,效果較好。目前應(yīng)用較為廣泛的主要有Bartha-K61株、布加勒斯特株、BUK株等疫苗。其中Bartha-K61株為目前應(yīng)用最廣泛、歷史最悠久的疫苗株,采用分子生物學(xué)技術(shù)對該苗株進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)Bartha-K61株基因株中存在多個(gè)突變,在Us區(qū)存在涉及gI,gE基因、11k,28k的一個(gè)大缺失,在UL區(qū)gC基因信號(hào)序列存在點(diǎn)突變。成功用于歐盟和美國的PR凈化計(jì)劃,也是我國政府指定應(yīng)用的疫苗毒株之一。眾多的國外以及國內(nèi)大動(dòng)物保健品公司使用的疫苗毒株,該毒株自然缺失gE/gI基因,安全穩(wěn)定,毒力不返強(qiáng),具有減少臨床發(fā)病、死亡的能力,能明顯減低免疫豬的野毒排毒量,縮短排毒時(shí)間,可用于任何日齡、任何階段的豬只。對于PR的免疫,健康母豬和后備豬每次產(chǎn)前2~4周免疫1次,或采用全群免疫程序,每年免疫3~4次;公豬每半年免疫1次;無母源抗體仔豬可在7日齡內(nèi)免疫,有母源抗體仔豬于5~6周齡免疫1次,高污染區(qū)可在11~12周齡加強(qiáng)免疫1次,效果均較好,在生產(chǎn)實(shí)踐中取得較好的保護(hù)效果。
3.基因工程缺失疫苗。世界上第一個(gè)偽狂犬病病毒基因工程缺失疫苗誕生在美國,由Baylor醫(yī)學(xué)院和Taxas大學(xué)聯(lián)合研制成功,并命名為OMNIVAC-PRV疫苗,在1986年獲得美國政府頒發(fā)的生產(chǎn)許可證,這一疫苗為具有TK-,gC-,gE-表型,在生產(chǎn)上應(yīng)用具有良好的免疫原性,同時(shí)經(jīng)實(shí)驗(yàn)室和田間實(shí)驗(yàn)表明,該疫苗不水平傳播,且免疫動(dòng)物經(jīng)強(qiáng)毒攻擊后,減少了強(qiáng)毒的復(fù)制和潛伏傳染的機(jī)會(huì)。目前,不少國家都研制出了不同的基因工程缺失疫苗,主要存在于世界上的基因工程疫苗的表型有:正如前面所述基因是偽狂犬病病毒的重要毒力基因,因此許多基因缺失苗都表現(xiàn)在MS缺失上,同時(shí)缺失也能降低對豬的神經(jīng)入侵能力。近年來科研工作者對必需基因缺失又取得了一定的進(jìn)展,已構(gòu)建成功的缺失株,為基因缺失苗的研究開辟了一個(gè)新的方向。到目前為止,所構(gòu)建的這些缺失弱毒株用于免疫動(dòng)物都表現(xiàn)出以下優(yōu)點(diǎn):有明確的缺失區(qū)域,返祖的可能性少;毒力降低,大多數(shù)保持了良好的免疫原性;易于建立檢測疫苗免疫和野毒感染的方法。目前有較易區(qū)分免疫動(dòng)物和野毒感染動(dòng)物。為大規(guī)模檢疫和淘汰野毒感染豬提供了較為簡便易行的方法,國內(nèi)在研究偽狂犬病基因缺失苗上已構(gòu)建成功PRV和Fa株的TK和gE_/gI_兩個(gè)缺失株,為大規(guī)模應(yīng)用打下了一定的基礎(chǔ)。
4.亞單位疫苗是病毒的結(jié)構(gòu)蛋白,不含有核酸物質(zhì),在生產(chǎn)中應(yīng)用較為完全。在目前發(fā)現(xiàn)的偽狂犬病病毒的幾種糖蛋白中g(shù)B,gC,gD均能使機(jī)體產(chǎn)生中和抗體,且這些抗體在體外無論是有補(bǔ)體存在還是無補(bǔ)體存在的情況下,均有中和PRV毒力的作用,因此在應(yīng)用前景上較為廣闊。
5.活載體疫苗。所謂活載體疫苗,指以活病毒為載體,表達(dá)疫苗特點(diǎn)的一類新型疫苗。目前研究和應(yīng)用偽狂犬病毒活載體苗可分為兩類:一是將PRV的一個(gè)或多個(gè)保護(hù)性抗原的基因克隆到其它活病毒載體上,另一類是將PRV弱毒株作為載體克隆上其它病原的保護(hù)性抗原基因,此疫苗也成為豬偽狂犬疫苗研究的一個(gè)方向。
根除措施:美國與歐洲許多國家實(shí)施偽狂犬病的根除計(jì)劃以來,已經(jīng)取得顯著成效。這種根除計(jì)劃是建立在合適的基因缺失苗及相應(yīng)的鑒別診斷方法基礎(chǔ)上的,一定地區(qū)對該病的根除計(jì)劃成功與否取決于從感染群中剔除陽性感染者的力度。根據(jù)不同的國情,通??蛇x擇的方法有全群撲殺—重新建群法,即撲殺感染豬群的所有豬只,重新引入無PRV感染的豬群;檢測與剔除法,即通過抗體檢測剔除豬群中所有野毒感染陽性的豬只,因?yàn)樗鼈兪菨摲腥矩i并可能向外界排毒,這種措施應(yīng)經(jīng)一定的時(shí)間間隔重復(fù)實(shí)施,直到豬群中再無PRV野毒存在為止。具體措施包括以下幾條。
(一)全場清群對感染豬場的所有豬進(jìn)行宰殺,在徹底清空豬舍后,進(jìn)行嚴(yán)格的清洗消毒, 并進(jìn)行滅鼠,以防再次感染。消毒過后30 d再引進(jìn)檢測沒有PRV感染的豬重新建群。這種方式最大的優(yōu)勢是有機(jī)會(huì)重建成一個(gè)健康狀況好的、遺傳潛力更高的種豬群,成功率較高,但耗時(shí)長,代價(jià)高,不適合我國現(xiàn)階段國情。
(二)后代隔離在懷孕母豬產(chǎn)前4周齡注射滅活疫苗,以保證所有的仔豬都有足夠母源抗體的保護(hù)。母豬在3~4周斷奶, 將可以作種用的斷奶仔豬移到無PRV病毒的地區(qū)。在110日齡,母源抗體已經(jīng)完全消失,對這些后備豬進(jìn)行檢測,檢測陽性的豬應(yīng)立即淘汰。30 d后再整欄檢測,如再發(fā)現(xiàn)陽性豬,全欄淘汰,檢測后整欄陰性的后備豬作為建立新的種豬群的后備豬。在后備母豬達(dá)6月齡時(shí),斷奶母豬及全部公豬都要淘汰,清空配種懷孕豬舍并徹底清洗消毒,再空置30 d 以后,后備公母豬才可進(jìn)入,開始正常的配種懷孕。在產(chǎn)仔完全結(jié)束后,開始產(chǎn)房的清洗消毒。空置至少30 d。后備母豬在進(jìn)入產(chǎn)房前再檢測1次,以確保無陽性豬進(jìn)入。第一批后備母豬所產(chǎn)仔豬在斷奶前,保育舍應(yīng)該已經(jīng)清空、清洗、消毒,并至少空置30 d以上。保育舍必須完全與生長育肥舍隔離,否則生長育肥豬也要全部出售、清空。在保育豬進(jìn)入生長育肥舍前,這些豬舍必須已經(jīng)清洗消毒好,并且空置30 d以上。在第一批生長育肥豬達(dá)出售前,抽樣進(jìn)行檢測。如未發(fā)現(xiàn)陽性豬,豬偽狂犬病的凈化才算完成。
(三)檢測淘汰豬場在常規(guī)的免疫程序下,所有豬全部用弱毒疫苗(自然缺失株)或者基因缺失疫苗進(jìn)行免疫接種,6個(gè)月后檢測所有的種豬和抽樣測試110日齡的生長豬。發(fā)現(xiàn)有野毒感染的公豬立即淘汰,母豬在斷奶后淘汰,用無野毒感染的后備公母豬來替換。發(fā)現(xiàn)有野毒感染的育肥豬,在首免后間隔4~6周進(jìn)行二免。每半年檢測1次,直到所有種豬都無野毒感染,抽樣檢測的110日齡育肥豬也測不出野毒感染的情況,凈化才算完成。