段紅梅 吳志遠(yuǎn) 江黎明

增生性瘢痕的形成是由于皮膚創(chuàng)傷后的愈合過程中，成纖維細(xì)胞過量增殖和膠原纖維過度增生的結(jié)果。增生性瘢痕的防治是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的難題之一，尋找治療和預(yù)防瘢痕增生和藥物具有重要的意義。Morris證實(shí)兔耳腹面皮膚全層缺損后產(chǎn)生瘢痕組織類似人皮膚增生性瘢痕［1］。國內(nèi)李薈元等［2］建立了兔耳瘢痕模型，為瘢痕研究提供了一種很好的實(shí)驗(yàn)工具。隱丹參酮是從中藥丹參中提取的重要活性成分，具有抗氧化，抗動脈粥樣硬化、抗腫瘤作用。本研究旨在探討紫杉醇對兔耳瘢痕組織的影響，為瘢痕防治提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 紫杉醇購于云南柯菲平醫(yī)藥有限公司。

1.2 動物 新西蘭大白兔24只，體重2.3～2.8 kg，雌雄兼用，購自廣東醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 兔適應(yīng)性喂養(yǎng)24 h，用氯胺酮肌注麻醉，用量為1 mg/kg。在兔雙側(cè)腹側(cè)分別做2個邊長為1 cm的正方形切口，完整切除全層皮膚，直至軟骨膜表面。用灼熱鐵絲燒灼創(chuàng)緣四周皮膚，創(chuàng)面貼敷創(chuàng)可貼。觀察疤痕形成情況，21 d時將兔耳疤痕隨機(jī)分為4組，每組n=12。分別于疤痕內(nèi)基底部及疤痕灶內(nèi)注射不同濃度的藥物或生理鹽水，注射用量為40 ml。A組:注射生理鹽水;B組:注射濃度為9 mg/L的紫杉醇;C組:注射濃度為27 mg/L的紫杉醇;D組:注射濃度為81 mg/L的紫杉醇。繼續(xù)喂養(yǎng)，28 d時，同樣在麻醉?xiàng)l件下切取瘢痕組織標(biāo)本，測定瘢痕增生情況。

1.4 觀察指標(biāo) 28 d時，將收取瘢痕組織及周圍正常組織標(biāo)本于低倍鏡下用測微尺測出耳腹側(cè)正常皮膚厚度(a)、耳軟骨厚度(b)、耳背皮膚厚度(c)、耳增生塊全厚度最大徑(d)，按以下公式測算出瘢痕增生指數(shù)(Hypertophic Index，HI):HI=［d-(b+c)］/a。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SAS軟件包(由廣東醫(yī)院統(tǒng)計學(xué)教研室提供)進(jìn)行配對t檢驗(yàn)和方差分析。

2 結(jié)果

2.1 瘢痕形成情況 在兔耳腹側(cè)形成創(chuàng)面后，傷口約13～15 d后愈合，愈合過程中上皮化時即能觸到硬塊，此硬塊不斷高于皮面，淡紅色，增生范圍不超過原創(chuàng)沿，19～22 d時增生到最高峰，厚度約為兔耳腹面皮膚厚度的2.8倍。

2.2 瘢痕增生指數(shù)對比情況 結(jié)果顯示:紫杉醇的濃度分別為 0 mg/L，9 mg/L，27 mg/L，81 mg/L 時，作用于兔耳瘢痕組織7 d后瘢痕增生指數(shù)分別(2.86±0.13)、(2.36±0.23)、(1.98±0.33)、(1.56±0.22)，瘢痕增生指數(shù)隨藥物濃度的增加而減少，與藥物濃度呈負(fù)相關(guān)，P=0.008，劑量組與對照組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。

3 討論

增生性瘢痕的組織特征為成纖維細(xì)胞過度激活增殖同時伴隨大量的膠原合成堆積［3］。膠原的產(chǎn)生在瘢痕形成過程中起著決定性作用［4］。膠原代謝是一個多因素參與的復(fù)雜生物反應(yīng)過程，包括膠原的合成和分解代謝［5］。嚴(yán)重創(chuàng)傷、燒傷及外科手術(shù)后常常遺留增生性瘢痕，影響外觀和功能。其發(fā)病機(jī)理尚未徹底闡明，也缺乏理想的治療方法。傳統(tǒng)的治療如手術(shù)切除、類固醇激素、抗代謝藥、免疫抑制劑和放射療法等，均因術(shù)后易復(fù)發(fā)或嚴(yán)重的全身性副作用而限制了臨床應(yīng)用［6］。篩選出療效確切、副作用小的抗瘢痕纖維化的有效藥物具有重要的臨床意義。但對于藥物防治瘢痕增生的研究手段，主要有三種途徑:一是細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是成纖維細(xì)胞培養(yǎng)，通過藥物對成纖維細(xì)胞的作用來進(jìn)行篩選;二是將人的病理性瘢痕組織移植到裸鼠的皮下，研究藥物對瘢痕組織作用產(chǎn)生的變化;三是通過藥物臨床實(shí)踐來總結(jié)有關(guān)藥物防治和瘢痕的經(jīng)驗(yàn)。這些方法已經(jīng)取得了一定的成績。本實(shí)驗(yàn)采用了兔耳瘢痕動物模型，使藥物對于瘢痕防治的研究手段有了進(jìn)一步的發(fā)展。通過對兔耳增生塊瘢痕增生指數(shù)的測定，結(jié)果顯示，紫杉醇明顯抑制兔耳瘢痕增生，瘢痕增生指數(shù)隨藥物濃度的增加而減少，與藥物濃度呈負(fù)相關(guān)，與生理鹽水對照組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。我們認(rèn)為紫杉醇可能通過兩個途徑抑制瘢痕的增生:(1)直接抑制成纖維細(xì)胞的生長增殖，從而減少膠原的合成和分泌;(2)增加膠原酶產(chǎn)生、增強(qiáng)膠原酶活性，促使已形成的膠原纖維降解和纖維重吸收。紫杉醇具有藥性作用強(qiáng)，副作用小，有望成為預(yù)防和治療人皮膚增生性瘢痕的有效藥物，但尚需體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和臨床進(jìn)一步研究證明。

［1］Morris DE，Wu Zhao LL，et al.Acute and chronic animal models fof excessive dermal scaring:quantitative studies.Plastic Recon-str Surg，1997，100(3);674-681.

［2］李薈元，劉建波，夏煒，等.增生性瘢痕動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕⑴c應(yīng)用.中華整形外科雜志，2001，17(5):276-278.

［3］胡大海，陳壁，朱雄翔，等.P物質(zhì)上調(diào)正常人真皮成纖維細(xì)胞TGF-β1的 mRNA 表達(dá).中華整形外科雜志，2002，18(4):234-236.

［4］李高峰，羅成群.低氧對瘢痕形成的影響.中華整形外科雜志，2003，19(5):238-386.

［5］吳志遠(yuǎn)，羅少軍，江黎明.諾新康對人皮膚瘢痕基因表達(dá)的影響.廣州醫(yī)藥，2007，6(38):22-23.

［6］商慶新，張滌生.丹參和川芎嗪對成纖維細(xì)胞生長的體外抑制實(shí)驗(yàn).中國修復(fù)重建外科，1998，12(6):321-323.