張琳 王春燕

類風濕關節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)是常見的以關節(jié)滑膜慢性炎癥病變?yōu)橹饕憩F(xiàn)的自身免疫性疾病，發(fā)病兩年內(nèi)出現(xiàn)不可逆的骨關節(jié)破壞，嚴重危害患者健康及降低生活質(zhì)量。近年來，在RA患者中發(fā)現(xiàn)了多種新的抗體，特別是環(huán)瓜氨酸肽(CCP)的自身抗體，因其在RA中的高度敏感性和特異性而倍受關注［1］。筆者應用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELl-SA)，檢測53例RA患者血清中的抗環(huán)瓜氨酸肽(抗CCP)抗體，旨在探討其對RA的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 RA組53例，來自我院2007年6月至2008年3月風濕病科門診、住院患者，以上患者符合美國風濕病學會1987年修訂的RA診斷分類標準。其中男17例，女33例，年齡14～65歲，平均48.3歲。對照組42例，其中男13例，女29例，年齡14～70歲，平均51.2歲。包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)10例，原發(fā)性干燥綜合征7例，強直性脊柱炎8例，結締組織病8例，系統(tǒng)性硬化病3例，痛風性關節(jié)炎2例，多發(fā)性皮肌炎2例，骨關節(jié)炎l例，反應性關節(jié)炎1例，診斷符合各自的診斷標準。

1.2 檢測方法 采集空腹靜脈血3 ml，分離血清，-20℃保存待測。抗CCP抗體檢測采用ELISA，試劑由歐蒙(德國)醫(yī)學實驗診斷有限公司提供，檢測結果＞5 U/ml為陽性。抽取靜脈血2 ml，離心分離血清，將待測血清用樣本緩沖液按1:100稀釋，加入已包被的微孔中，每孔100 μl，室溫孵育30 min，洗板3次后加人辣根過氧化物酶標記的鼠抗人IgG單克隆抗體100 μl，室溫孵育 30 min，洗板 3 次后加入底物 100 μl 30 min，最后加入終止液100 μl，酶標儀上檢測，設定波長為450 mn，每份樣本設立空白對照、陽性對照、陰性對76照及正常對照。類風濕因子(rheumatoid factor，RF)采用Beckman Coulter公司的Immage特定蛋白分析儀及其配套試劑，使用免疫比濁法檢測RF水平，檢測結果＞20 U/ml判為陽性。同時檢測RA患者血沉(ESR)、免疫球蛋白(Ig)、C反應蛋白(CRP)、血小板(PLT)等指標。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 12.0統(tǒng)計軟件處理，多組樣本均數(shù)比較采用方差分析，兩變量之間的相關性采用Spearman相關性分析。

2 結果

RA組血清抗CCP抗體陽性率對RA診斷敏感性為56.6%，RF陽性率對RA診斷敏感性為61.4%，兩者間差異無顯著性(P＞0.05);抗CCP抗體和RF對RA診斷的特異性分別為95.1%、71.4%，差異有顯著性(P＜0.05)。RA組血清抗CCP抗體陽性率陽性率56.6%明顯高于對照組2.1%，差異有顯著性(P＜0.05)。經(jīng)Spearman相關性分析發(fā)現(xiàn)抗CCP抗體與 ESR、CRP、RF間呈正相關(r=0.531、0.524、0.574，均 P ＜0.05)。

3 討論

類風濕關節(jié)炎(RA)是一種自身免疫性疾病，以滑膜的炎癥為基礎，呈慢性、進行性、侵蝕性關節(jié)破壞，最終導致關節(jié)畸形和功能喪失。RA為常見風濕免疫性疾病，可發(fā)生于任何年齡，在我國的發(fā)病率達0.32% ～0.36%。目前對于RA的診斷仍延用美國風濕病協(xié)會(ACR)1987年修訂的RA分類標準，但該標準要求病程長，關節(jié)X線損害明顯，血清學指標僅有特異性相對較低的類風濕因子(RF)，對于X線關節(jié)損害不典型及RF陰性RA患者早期診斷困難，失去最佳診治時機，如何早期及時診斷RA成為研究的重點。

研究發(fā)現(xiàn)瓜氨酸是RA血清抗聚絲蛋白相關抗體識別的主要抗原決定簇，并建立了以人T合成CCP為抗原的ELISA檢測法，也證明抗CCP抗體在診斷RA中有著較高的特異度?？笴CP抗體存在于早期的RA患者，且特異性高，與RF相比有較高的特異性［3］。對于 RF陰性的患者，抗CCP抗體也可以提供可靠的早期診斷依據(jù)。文獻報道抗CCP抗體與RA患者病情嚴重程度有關［4］。本研究顯示，RA患者的抗CCP抗體濃度明顯高于其他結締組織病和正常對照組，并且與某些炎癥指標有相關性，如將抗CCP抗體與RF及抗角蛋白抗體等指標結合起來將大大提高診斷RA的特異性，有助于RA的早期診斷，早期治療，最大程度的緩解病情，促進康復，改善生活質(zhì)量。由于ELISA方法成熟、方便，可能在臨床上有廣泛的應用前景。

本研究結果顯示，抗CCP抗體對RA的敏感性與RF相比較，其對RA診斷的敏感性差異無顯著性，而特異性明顯高于RF。提示在RA血清中存在特異性識別CCP的抗體，對RF診斷是一個非常有價值的臨床檢測指標。抗CCP抗體除了對RA的診斷具有一定的價值外，其對于RA的早期診斷、病情活動性及預后也有一定的價值。有研究表明，抗CCP抗體的出現(xiàn)先于RF，可用于對極早期滑膜炎的診斷研究。進一步的研究表明:在RA患者，抗CCP抗體陽性組和陰性組在晨僵時間、受累關節(jié)夜間痛發(fā)生率、關節(jié)腫脹指數(shù)、X線病情分期、醫(yī)師和患者對病情活動性的評分、IgG、ESR和CRP水平差異均有顯著性［5］。有研究人員對RA患者的影像學評分進行連續(xù)觀察，發(fā)現(xiàn)抗CCP抗體陽性者的骨破壞較抗體陰性者嚴重，提示抗CCP與RA病情嚴重程度及其發(fā)展有關。

［1］姜東林，孫鈞銘，姜升陽，等.類風濕關節(jié)炎患者抗MCV、抗CCP抗體與RF診斷價值比較.臨床檢驗雜志，2009，27(2):137-138.

［2］Habib HM，Mosaad YM.Youssef HM.Anti.cyclic citrullinated peptide antibodies in patients with juvenile idiopathic arthritis.Immunol Invest.2008，37(8):849-857.

［3］彭曉冬.李夔新，白楊娟，等.抗CCP抗體、AKA及RF對類風濕性關節(jié)炎的診斷價值.四川大學學報，2006，37(2):317-318.

［4］Fabien N.Goetz J，Sordet C，et al.New autoanti-bodiesinrheumstoid arthritis:anti-citmllinated protein or peptide autoanti-bodies and the others.Pressc Med，2008，1(1):20.

［5］Mortia Y，Muro Y，Sugiura K，et al.Anti-cyclic citrullinated peptide antibody in systemic sclerosis.Clin Exp Rheumatol，2008，26(4):542-547.