方海偉，程躍，蔣軍輝，沈志久，王國耀，李和明

p53、Ki67腫瘤標志物在不同分型腺性膀胱炎中的表達及臨床意義

方海偉，程躍，蔣軍輝，沈志久，王國耀，李和明

目的：探討p53、Ki67在不同分型腺性膀胱炎中的表達及臨床意義。方法：將40例患者按膀胱鏡檢及組織病理學類型進行分組，采用免疫組織化學SABC法，檢查p53、Ki67在各分型腺性膀胱炎中的表達，并與10例正常膀胱黏膜組進行比較。結果：乳頭狀瘤型、腸腺瘤型腺性膀胱炎有較高的p53、Ki67表達率，并與正常膀胱黏膜比較有顯著性差異。慢性炎癥型、濾泡水腫型則p53、Ki67表達率較低，與正常膀胱黏膜無差異。腸上皮型、前列腺型腺性膀胱炎p53表達率較高，并且與正常膀胱黏膜組比較有顯著性差異。腸上皮型、前列腺型腺性膀胱炎Ki67表達率較高，與膀胱正常黏膜組比較，前列腺型組有顯著性差異，腸上皮型無顯著性差異。結論：對于乳頭狀瘤型、腸腺瘤型、腸上皮型及前列腺型腺性膀胱炎應進行積極的手術治療及抗癌藥物膀胱灌注，并嚴密術后隨訪。對于慢性炎癥型、濾泡水腫型及無化生型腺性膀胱炎，在去除慢性刺激因素下進行臨床觀察即可。

腫瘤標志物；腺性膀胱炎；免疫組化

腺性膀胱炎是膀胱黏膜上皮增生性病變，隨著腔內技術的發(fā)展和對疾病認識的提高，其發(fā)病率有逐年上升的趨勢，但其發(fā)病機制至今仍未完全明了。自1958年Shaw提出腺性膀胱炎可能發(fā)展為腺癌以來，許多學者傾向于認為腺性膀胱炎為膀胱癌的癌前病變，主張采用積極的治療手段。但近年來有關腺性膀胱炎的報告明顯增多，與膀胱腺癌的低發(fā)病率不相一致。在對腺性膀胱炎病因和生物學行為不甚明了的情況下，過多的外科治療和抗癌藥膀胱灌注成為目前腺性膀胱癌治療的普遍現(xiàn)象。2007年1月—2008年7月，我們通過對不同分型腺性膀胱炎與腫瘤標志物（p53、Ki67）相關性研究，期望達到簡單的臨床分型預測各種腺性膀胱炎的預后，為臨床上腺性膀胱炎的治療提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標本來源 手術切除標本蠟塊40例，根據(jù)膀胱鏡檢查及組織病理學類型分別進行分組。膀胱鏡所見分組：慢性炎癥型10例，濾泡水腫型8例，乳頭狀瘤型15例，腸腺瘤樣型7例。組織病理學分組：無化生型24例，腸化生型9例，前列腺型7例。同時取正常膀胱黏膜組織10例。全部標本行免疫組織化學檢查。

1.2 主要試劑 免疫組織化學SABC試劑盒及p53、Ki67等單克隆抗體均購自武漢博士德生物公司。

1.3 方法 采用免疫組織化學SABC法：切片常規(guī)脫蠟，逐級水化，用0.3%H2O2阻斷內源性過氧化物酶30 min，置于微波爐45℃中溫化20 min，小牛血清封閉30 min。按1∶30比例加入抗p53抗體，置于4℃水箱中過夜，再加入二抗（羊抗鼠IgG）及SABC復合物，置室溫中復溫60 min。上述各步驟間均以PBS緩沖液振洗15 min，DAB顯色，逐級脫水、透明、封片。以試劑盒提供的陽性石蠟切片作為陽性對照，用PBS緩沖液替代一抗，作為陰性對照。Ki67與p53免疫組織化學方法基本相同。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計學分析 采用SPSS 11.5軟件包進行統(tǒng)計學處理，應用四格表Fisher確切概率法比較p53、Ki67在不同分型腺性膀胱炎與正常膀胱黏膜間差異。P＜0.05認為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 p53 40例膀胱鏡下分組p53陽性表達率詳見表1。乳頭瘤型組、腸腺瘤型組與正常黏膜組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；慢性炎癥型組、濾泡水腫型組與正常黏膜組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；腸上皮型組、前列腺型組與正常黏膜組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；無化生型組與正常黏膜組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。腸腺瘤型腺性膀胱炎p53染色見圖1。

表1 p53在各分型腺性膀胱炎中的表達（n，%）

圖1 腸腺瘤型腺性膀胱炎p53染色

2.2 Ki67 40例膀胱鏡下分組p53陽性表達率詳見表2。乳頭瘤型組、腸腺瘤型組與正常黏膜組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；慢性炎癥型組、濾泡水腫型組與正常黏膜組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；前列腺型組與正常黏膜組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；無化生型組、腸上皮型組與正常黏膜組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。腸腺瘤型腺性膀胱炎Ki67染色見圖2。

表2 Ki67在各分型腺性膀胱炎中的表達（n，%）

圖2 腸腺瘤型腺性膀胱炎ki67染色

3 討論

腺性膀胱炎是一種原因不明的膀胱黏膜慢性增生性病變，1887年Vol Limberk首先報告，多數(shù)學者傾向于認為是膀胱慢性感染、梗阻、結石、異物及留置導尿管等慢性刺激引起[1-2]。臨床上主要表現(xiàn)為尿頻、尿急、尿痛膀胱刺激癥狀及血尿和排尿困難等。其發(fā)病機制目前較為被接受的是移行上皮化生學說：正常的膀胱黏膜在慢性刺激下基底層細胞呈灶性增生形成細胞巢，并向固有層生長，進而巢中心部退化而形成囊腔，最后腔內柱狀上皮形成，即腺性膀胱炎。腺性膀胱炎的發(fā)生和發(fā)展是一個漸變的過程：移行上皮單純增生－Brunn芽－Brunn巢－囊性膀胱炎－腺性膀胱炎。

對于腺性膀胱炎的生物學行為，目前存在兩種觀點[3]，部分學者認為腺性膀胱炎為尿路上皮正常變異現(xiàn)象，是尿路上皮形態(tài)學多變性的表現(xiàn)，無大的臨床意義，更多學者認為其為癌前病變[4-5]，主張采用積極的治療手段并嚴密隨訪。目前國內外文獻尚無確切的證據(jù)表明腺性膀胱炎與癌前病變有直接的聯(lián)系，且臨床上腺性膀胱炎轉變?yōu)榘螂紫侔┑膱蟾孑^少。過多的外科手術治療和抗癌藥膀胱灌注有“過度治療”之嫌。本研究通過將腺性膀胱炎進行臨床和病理分組，研究p53、Ki67腫瘤標志物在各分型中的表達，并與正常膀胱黏膜作比較，以期對腺性膀胱炎簡單分型來指導臨床治療。

p53、Ki67是目前被公認的膀胱癌的腫瘤標志物，并與膀胱癌的發(fā)展、復發(fā)、轉移，腫瘤的分級、分期有關[6-7]。本研究中40腺性膀胱炎中以慢性炎癥型、濾泡水腫型及無化生型為主，這與目前文獻報告及臨床觀察較為符合。研究中發(fā)現(xiàn)膀胱鏡下乳頭狀瘤型、腸腺瘤型腺性膀胱炎有較高的p53、Ki67表達率，并與正常膀胱黏膜比較有顯著性差異。而慢性炎癥型、濾泡水腫型則p53、Ki67表達率較低，與正常膀胱黏膜無差異。腸上皮型、前列腺型腺性膀胱炎p53表達率較高，并且與正常膀胱黏膜組比較有顯著性差異。有文獻報道廣泛的腸上皮化生現(xiàn)象是腺性膀胱炎不確定的惡變因素[8]，這一結論也與本研究結果相符。腸上皮型、前列腺型腺性膀胱炎Ki67表達率較高，與膀胱正常黏膜組比較，前列腺型組有顯著性差異，腸上皮型無顯著性差異，這可能與標本例數(shù)較少有關。這一結果似乎可解釋臨床上腺性膀胱炎轉變?yōu)榘螂紫侔┑牡桶l(fā)病率現(xiàn)象。

因此，對臨床上腺性膀胱炎患者，我們主張進行臨床及病理分型，對于乳頭狀瘤型、腸腺瘤型、腸上皮型及前列腺型腺性膀胱炎進行積極的手術治療及抗癌藥物膀胱灌注，并嚴密術后隨訪。對于慢性炎癥型、濾泡水腫型及無化生型腺性膀胱炎，在去除慢性刺激因素下進行臨床觀察即可。當然這一結果有待進一步的循證醫(yī)學證實。

[1]曾偉，陳志強，葉章群.下尿路感染與腺性膀胱炎關系的臨床研究[J].臨床泌尿外科雜志，2004，16（6）：350

[2]Semins MJ,Schoenberg MP.A case of florid cystitis glandularis[J]. Nat Clin Pract Urol,2007,4:341.

[3]佟威利，宮大鑫，劉屹立，等.腺性膀胱炎治療方法的探討[J].中華外科雜志，2003，41(5):365.

[4]Kastan MB,Zambetti GP.Parc-ing p53 in the cytoplasm[J].Cell, 2003,112(1):29.

[5]閔立貴，牛宏偉.腺性膀胱炎（附172例報告）[J].中華泌尿外科雜志，2003，170(50):308.

[6]Fechner G,Perabo G,Schmidt DH,et al.Preclinical evaluation of a radiosensitizing effect of gemcitabine in p53 mutant and p53 wild type bladder cancer cells[J].Urology,2003,61(2):468.

[7]Malmstrom PU,Ren ZP,Sheriff A,et al.Early metastatic progres?sion of bladder carcinoma:molecular profile of primary tumor and sentinel lymph node[J].J Urol,2002,168(5):2240.

[8]Rau AR,Kini H,Pai RR.Morphological evaluation of cystitis glan?dularis[J].Indian J Pathol Microbiol.2009,52(2):203.

（收稿：2009-08-06 修回：2009-10-26）

（責任編輯 張亞強）

Expression and Clinical Significance of p53,Ki67 in Different Types of Cystitis Glandularis

Fang Haiwei,Cheng Yue,Jiang Junhui,et al. Department of Urology,Affiliated Hospital of Ninbo University,Ningbo（315010）,China

Objective To evaluate the expression of p53 and Ki67in different type of cystitis glandularis and its clinical significance. Methods Immunohistochemical method was used to demonstrate the expression of p53 and Ki67 in 40 cases of cyctitis glandularis and 10 cases of normal bladder tissue. Results The expression of p53 and Ki67 in papilloma subtype and adenoma subtype were higher in the normal bladder tissue (P＜0.05).The expression of p53 in intestinal subtype and prostatic subtype were higher than that in the normal bladder(P＜0.05).The expression of Ki67 in prostatic subtype were higher than that in the normal bladder tissue (P＜0.05). Conclusion Active surgical treatment sand anti-cancer drugs with close follow-up are indicated for papilloma subtype,adenoma subtype,intestinal subtype and prostatic subtype of cystitis glandularis.

p53,Ki67,cystitis glandularis

R694+.3

A

1007-6948(2010)02-0183-03

浙江省醫(yī)學會臨床科研基金（2007zyc40)

寧波大學附屬寧波第一醫(yī)院泌尿中心(寧波315010)

方海偉，Tel：13566037907，E－mail：fhwei8054@sohu. com