趙小明,謝長栓,盧坤隴,張延恒,黃怡弘
(1.浙江發(fā)展園林實業(yè)有限公司,浙江 杭州 310029;2.杭州市農(nóng)業(yè)科學研究院,浙江杭州 310024)
隨著人們環(huán)保意識的增強,觀賞植物已越來越受到人們的青睞,各類觀賞植物以其婀娜多姿的形態(tài)、豐富多彩的花色深受人們喜愛,成為花卉園藝超市和居家百姓生活中不可或缺的物品之一。合果芋體態(tài)優(yōu)美,色澤淡雅,生命力強,容易栽培[1-2],深受消費者的喜愛,對它的需求量很大,但因分株繁殖數(shù)量少、速度慢,且成品觀賞價值大大降低而影響其快速發(fā)展。我們采用組織培養(yǎng)的技術對合果芋進行規(guī)模化生產(chǎn),以滿足消費者的需求。
研究材料為大棚盆栽的合果芋,篩選出生長健壯、葉子規(guī)整的植株,從基部切下,剝?nèi)ト~苞,切成1個節(jié),用作組培誘導材料。
1.2.1 外植體消毒
切好的芽用水沖洗干凈,在無菌操作臺上,用75%酒精和0.1% 升汞組合進行處理。嫩的芽酒精20 s,升汞10 min;老的芽酒精30 s,升汞15 min。升汞消毒后,為減少升汞對外植體生長的影響,需用高溫高壓消毒過的水,清洗5~6次。
1.2.2 啟動、繼代和生根培養(yǎng)基
在無菌操作臺上,把處理好的外植體基部和頂部都切去一部分,插入啟動培養(yǎng)基中。基本培養(yǎng)基為MS,配好的培養(yǎng)基都經(jīng)過121℃,0.1 MPa壓力的高壓鍋中消毒20 min。啟動和繼代培養(yǎng)基:(1)MS+6-BA 2.5 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1;(2)MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1;(3)MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1;(4)MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1。生根培養(yǎng)基:(1)MS+NAA 1.0 mg·L-1; (2)1/2MS+NAA 0.7 mg·L-1; (3)1/2MS+NAA 1.0 mg·L-1;(4)1/2MS+NAA 1.5 mg·L-1。
1.2.3 移栽
生根苗需經(jīng)過20~30 d的煉苗,再移栽到裝好基質(zhì)的穴盤中。各種基質(zhì)間的組合見表1,把配比好的基質(zhì)裝入72孔的穴盤中,用小木塊推平,每個組合重復3次,每個穴種1株苗,種時先用工具挖開穴,把組培苗放入,再用基質(zhì)輕輕蓋好,以免傷根,最后澆足定根水。等苗穩(wěn)定后,進入正常的管理,最后成活率以移栽后30 d統(tǒng)計,按3盤總和計算。
表1 不同基質(zhì)組合移栽成活率
通過對4種啟動和繼代培養(yǎng)基的篩選,發(fā)現(xiàn)組合 (2) 即 MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1為適合合果芋的啟動培養(yǎng)基。組合 (1)愈傷組織太大,可能是激素太高了,以愈傷組織為主,芽分化較少;組合 (4)啟動太慢,可能是激素太低了,生長較慢;組合 (3)啟動時間較 (2)稍慢,芽相對少點,可能與6-BA和NAA的配比有一定的關系。繼代培養(yǎng)最適為組合 (3),(3)相對 (1)和 (2)愈傷組織少,比 (4)叢生芽數(shù)多,主要與6-BA和NAA的配比有一定的關系,同時可能與合果芋自身激素水平也有一定的關系,要求相對啟動激素低點;組合 (4)激素太低,也會造成萌發(fā)的芽數(shù)少,增殖倍數(shù)降低,所以最適組合為 (3)。繼代相對啟動,激素水平要求較低,這還需要進一步的研究。
從實驗結果看,NAA濃度對合果芋生根的影響較大,這與蔣亞蓮等[3]的研究相同。其中最適的為組合 (3)。組合 (2)生根根數(shù)少,組合(4)根雖多,但根太細。組合 (1)無機鹽的量是其它組合的2倍,影響其發(fā)根。這可能是較多的無機鹽對組培植物生根有一定的影響,大多數(shù)植物生根對無機鹽的要求較低,一般都對繼代培養(yǎng)基的大量元素減半。組合 (4)NAA含量較高,結果生根的根數(shù)較多、較細弱,根多不便于移栽,對移栽的成活率也會有較大的影響。
從表1中可發(fā)現(xiàn),基質(zhì)A單獨用泥炭,苗成活率不高,可能透水能力不強,水分也難控制,造成苗或干或濕,容易死苗。基質(zhì)B和C泥炭的比例降低,但蛭石和珍珠巖比例較高,蛭石和珍珠巖透水性好,比例高了,基質(zhì)容易干,也造成了移栽的合果芋干枯死亡?;|(zhì)D、E和F成活率都較接近,但珍珠巖較貴,比例高了造成成本增加,為了降低成本,同時也為了有個較高的移栽成活率,組合F為移栽合果芋組培苗的最適移栽基質(zhì)。
從合果芋的誘導,繼代增殖到生根,最后移栽成活,整個試驗結果為生產(chǎn)提供了大量的數(shù)據(jù),得到了較好的結果。合果芋的適合啟動培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1,相對愈傷組織較少,萌發(fā)的芽數(shù)也多;最適繼代培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1,相對增殖效果好。合果芋的生根,適應規(guī)?;a(chǎn)的培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 1.0 mg·L-1,生發(fā)的根數(shù)和根的質(zhì)量較利于其移栽成活。合果芋移栽最為經(jīng)濟、效果較好的基質(zhì)配方是泥炭∶珍珠巖∶蛭石為7∶2∶1。
[1]徐安輝,劉奕清,陳澤雄,等.銀葉合果芋離體培養(yǎng)與快繁研究 [J].西南大學學報:自然科學版,2007,29(10):134-138.
[2]劉奕清.黃金合果芋水培營養(yǎng)液的優(yōu)化體系研究 [J].西南農(nóng)業(yè)大學學報:自然科學版,2006,28(3):447-449,453.
[3]蔣亞蓮,桂敏,黎霞,等.合果芋組織培養(yǎng)快繁技術研究[J].北方園藝,2009(3):62-65.