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        冠心寧片中隱丹參酮和丹參酮ⅡA的含量測定

        2010-07-29 13:45:50卞艷晶
        中國藥業(yè) 2010年10期
        關鍵詞:丹參酮丹參供試

        卞艷晶,馬 濤,王 建

        (山東省濟寧市藥品檢驗所,山東 濟寧 272025)

        冠心寧片是由丹參、三七等制成的復方制劑,具有活血化瘀、行氣止痛之功效,用于治療冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、心絞痛和冠狀動脈供血不足等癥,丹參是方中主藥。為進一步提高制劑質量,確保臨床療效,筆者建立了可同時測定丹參中兩種主要有效成分含量的方法,報道如下。

        1 儀器與試藥

        Agilent 1100型高效液相色譜儀(美國安捷倫科技公司)。隱丹參酮對照品(批號為852-993),丹參酮ⅡA對照品(批號為110766-200416),均由中國藥品生物制品檢定所提供;冠心寧片(濟寧市脈管炎醫(yī)院);甲醇(色譜純,天津市科密歐化學試劑開發(fā)中心),其他試劑(分析純)。

        2 方法與結果

        2.1 色譜條件

        色譜柱:Thermo BDS Hypesil C18柱(250 mm ×4.6 mm,5"m);流動相:甲醇 -水(78 ∶22);流速:1.0 mL/min;檢測波長:270 nm;柱溫:20 ℃;進樣體積:10"L。

        2.2 溶液制備

        按制劑的處方工藝制備不含丹參的樣品,并按供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液。分別精密稱取經減壓干燥24 h后的隱丹參酮對照品12.4 mg、丹參酮ⅡA對照品12.0 mg,置50 mL棕色量瓶中,加甲醇5 mL使溶解,加甲醇至刻度,搖勻后作為對照品儲貯備液,精密吸取3 mL,置25 mL棕色量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻后作為對照品溶液。取樣品20片,精密稱定質量,研細,取樣品約1.0 g,精密稱定,置磨口錐形瓶中,精密加入甲醇50 mL,密塞,稱定質量,加熱回流1 h,放冷后密塞,稱定質量,用甲醇補足減損的質量,搖勻,濾過,續(xù)濾液作為供試品溶液。

        2.3 方法學考察

        專屬性考察:2.2項下3種溶液,按上述色譜條件測定。結果陰性對照品對隱丹參酮和丹參酮ⅡA的含量測定無干擾(圖1)。

        線性關系考察:取隱丹參酮、丹參酮ⅡA混合對照品溶液,分別進樣 4.0,8.0,12.0,16.0,20.0,24.0"L,測定峰面積。以進樣量為橫坐標 (X)、峰面積值為縱坐標(Y)繪制標準曲線,并進行線性回歸。結果隱丹參酮回歸方程為Y=5590.8 X+4.60,r=1.0000(n=6);線性范圍為 0.119~0.714"g;丹參酮ⅡA回歸方程為Y=5122.2 X+6.54,r=1.0000(n=6),線性范圍為 0.115~0.691"g。

        精密度試驗:精密吸取對照品溶液10"L,連續(xù)進樣5次。結果隱丹參酮、丹參酮ⅡA的平均峰面積分別為1671.31(RSD=0.11%)和2510.38(RSD=0.26%),表明精密度符合要求。

        穩(wěn)定性試驗:取同一樣品,照2.2項下方法制備供試品溶液,分別在0,2,4,6,8 h時測定。結果隱丹參酮、丹參酮ⅡA的平均含量分別為 1.60 mg/g(RSD=0.46% )和 2.63 mg/g(RSD=1.39% ),表明供試品溶液在8 h內穩(wěn)定。

        重現(xiàn)性試驗:取同一批樣品5份,按2.2項下上述方法制備供試品溶液并測定含量。結果隱丹參酮、丹參酮ⅡA含量分別為1.600% (RSD=1.18% )和 2.639% (RSD=1.00% ),表明方法重現(xiàn)性好。

        圖1 高效液相色譜圖

        加樣回收試驗:取已知含量的樣品5份,每份約0.5 g,精密稱定,置具塞三角瓶中,精密加入隱丹參酮對照品0.82 mg、丹參酮ⅡA對照品1.40 mg,按2.2項供試品溶液制備方法制備溶液并依法測定,結果見表1。

        表1 加樣回收試驗結果

        2.4 樣品含量測定

        取不同批號的樣品約1.0 g,精密稱定,按2.2項方法制備供試品溶液,分別測定并計算含量。結果見表2。

        表2 樣品含量測定結果(mg/粒)

        3 討論

        采用2005年版《中國藥典(一部)》中丹參酮ⅡA的測定波長測定,隱丹參酮、丹參酮ⅡA的色譜分離度和靈敏度能滿足檢測要求,故選擇270 nm為檢測波長。

        丹參脂溶性成分是丹參的主要有效成分之一,具有較強的生理活性[1],其中丹參酮ⅡA、隱丹參酮含量較高,故以隱丹參酮和丹參酮ⅡA為指標,控制活血脈動膠囊中丹參的質量。

        山東產丹參的丹參脂溶性成分的含量較其他地區(qū)高,不同產區(qū)的丹參含量存在差異,為確保產品質量的穩(wěn)定,建立了上述簡便、快捷的含量測定方法。

        [1]代云桃,秦雪梅,郭小青,等.不同產地不同品種丹參藥材內在質量評價[J]. 山西醫(yī)科大學學報,2006,37(7):717-719.

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