李 玲,張春麗,王榮福

(北京大學(xué) 第一醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科,北京 100034)

放射性核素標(biāo)記的腫瘤特異性高表達(dá)受體拮抗劑在腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷中已經(jīng)發(fā)揮出獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),同時(shí)也在腫瘤的靶向治療方面也顯示出一定的應(yīng)用價(jià)值。研究證明,整合素αⅤβ3受體在多種腫瘤表面和新生血管內(nèi)皮細(xì)胞中有高表達(dá),且對(duì)腫瘤血管生成起著重要作用。腫瘤血管生成是腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移過程中不可缺少的生物過程,有研究表明如果沒有新生血管生成,腫瘤的生長(zhǎng)不超過1～2 mm。因此,針對(duì)整合素αⅤβ3拮抗劑的研究對(duì)腫瘤的早期診斷及靶向治療具有重要意義。

1 整合素αⅤβ3及其RGD肽類配體

1.1 整合素αⅤβ3及其在腫瘤血管生成中的作用

整合素是細(xì)胞黏附分子家族的重要成員之一,是由α和β兩條鏈通過非共價(jià)鍵連接而成的異源二聚體跨膜糖蛋白,主要介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular Matrix,ECM)之間的相互黏附,并介導(dǎo)細(xì)胞與ECM之間的雙向信號(hào)傳導(dǎo),在很多重要的生理過程中起重要作用。迄今為止,已發(fā)現(xiàn)18種不同的α亞基和8種β亞基,組成了24種整合素[1-2]。

其中 ,整合素 αⅤβ3是由 αⅤ亞基(CD51,相對(duì)分子質(zhì)量150 000)和β3亞基(CD61,相對(duì)分子質(zhì)量105 000)形成的跨膜異二聚體糖蛋白,能識(shí)別配體分子中的精-甘-天冬序列(A rg-Gly-Asp,RGD),這類配體包括玻璃粘連蛋白(V itronectin,VN)、纖維粘連蛋白(Fibronectin,FN)、血小板反應(yīng)蛋白-1(Throm bospodin,TSP-1)和范德華因子(Von Willibrand's Factor,vWF)等,故又名VN受體。αⅤβ3可以表達(dá)于多種細(xì)胞類型,包括破骨細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等,還可表達(dá)于多種腫瘤細(xì)胞膜表面,如卵巢癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、乳腺癌、黑色素瘤等[3],在多種活動(dòng)過程中與含RGD肽的配體結(jié)合,參與腫瘤的血管生成、侵襲轉(zhuǎn)移,炎癥、傷口愈合和凝血等生理和病理過程。

αⅤβ3在靜止的內(nèi)皮細(xì)胞基本不表達(dá),而在新生血管生成時(shí)的內(nèi)皮細(xì)胞上大量表達(dá),并可能通過參與內(nèi)皮細(xì)胞的激活和遷移、介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、抑制內(nèi)皮細(xì)胞凋亡、參與堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(Basic Fibroblast Grow th Factor,bFGF)及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascu lar endothelial G row th Factor,VEGF)誘導(dǎo)的血管生成、誘導(dǎo)環(huán)加氧酶產(chǎn)生等過程,在腫瘤血管生成中發(fā)揮重要作用[4]。

目前,針對(duì)整合素αⅤβ3的抑制劑有單抗類、解聚素、肽類及非肽類小分子拮抗劑等[2]。

1.2 整合素αⅤβ3的 RGD肽類配體

整合素αⅤβ3在腫瘤血管生成中起到重要作用,因此,為尋找早期發(fā)現(xiàn)腫瘤和抑制腫瘤生長(zhǎng)的新方法,整合素αⅤβ3配體及小分子拮抗劑的研究成為腫瘤研究的熱點(diǎn)之一。目前,研究主要集中于兩個(gè)方面,一方面是對(duì)RGD肽類配體的研究,如線性RGD肽、環(huán)狀RGD肽及 RGD肽的多聚體等多種形式RGD肽類整合素配體。其中已有一些含RGD肽序列的環(huán)肽進(jìn)入臨床試驗(yàn)。此外,通過RGD肽結(jié)構(gòu)的模擬或受體-配體結(jié)合的構(gòu)效關(guān)系等方法設(shè)計(jì)出了一系列非肽類小分子拮抗劑,包括異噁唑啉類、吲哚類、2-苯氮雜類和Azacarba衍生物等[5]。

大多數(shù)線性 RGD肽對(duì)整合素受體親和力較低,且易被蛋白酶降解,體內(nèi)穩(wěn)定性差,其生物活性和顯像結(jié)果并不理想。對(duì)含RGD肽結(jié)構(gòu)的分子進(jìn)行修飾與改造,可提高配體分子的穩(wěn)定性、親和性、特異性及靶向性,增加腫瘤攝取并延長(zhǎng)其在腫瘤組織的滯留時(shí)間,以達(dá)到更好的顯像和治療效果。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),環(huán)形結(jié)構(gòu)的肽較線性肽穩(wěn)定,有更高的親和性、受體特異結(jié)合性。劉紅潔等[6]的研究結(jié)果顯示,放射性核素131I標(biāo)記的cyclo(-Cys-A rg-Gly-Asp-T ry-Cys-)可使小鼠黑色素瘤B16清晰顯像。二硫鍵成環(huán)的NC100692對(duì)αⅤβ3受體有很高的親和力(K d=0.01 nm ol/L),其99Tcm標(biāo)記物已成功應(yīng)用于人體腫瘤血管生成的顯像研究[7-8]。而環(huán)五肽cyclo(-RGDfV-),其 IC50=2.3 nmol/L,已作為抗腫瘤藥物(Cilengitide,EMD 121974)進(jìn)入臨床二期研究[9-10]。此外,在環(huán)形RGD肽結(jié)構(gòu)上引入糖基[11]、親水性四肽、聚乙二醇[12]等進(jìn)行修飾,不僅有利于放射性核素的標(biāo)記,還可改善生物利用度,增加腫瘤組織的攝取。而通過形成多聚體亦可提高RGD肽對(duì)整合素受體的結(jié)合率和選擇性,提高分子成像的靶向親和性。Chen等[13]通過在RGD肽二聚體的谷氨酸氨基上引入4-18F苯合成18F-FB-E[c(RGDyK)]2(y=OH)進(jìn)行膠質(zhì)母細(xì)胞瘤小動(dòng)物PET顯像和放射自顯影,結(jié)果顯示,二聚體具有快速血漿清除率,腫瘤組織攝取亦很快,30 m in后即達(dá)(6.79±0.05)%ID/g。與單體相比,在所有的時(shí)間點(diǎn),二聚體RGD肽都有明顯高的腫瘤攝取(P＜0.001)。Li等[14]應(yīng)用64Cu分別標(biāo)記 DOTARGD四聚體和八聚體,用于人膠質(zhì)瘤大鼠模型的成像。結(jié)果顯示,八聚體探針較四聚體對(duì)αⅤβ3具有更高的親和性和特異性(50%抑制濃度分別為10 nmol/L和35 nmo l/L);八聚體探針的腫瘤攝取率也明顯高于四聚體。

2 整合素αⅤβ3的非肽類小分子拮抗劑的設(shè)計(jì)

根據(jù)受體-配體結(jié)合的X射線晶體衍射、NMR結(jié)構(gòu)研究以及組合化學(xué)、計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)等技術(shù),可設(shè)計(jì)出一系列αⅤβ3受體的小分子拮抗劑。目前主要通過肽類模擬和計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)得到新的小分子拮抗劑。

2.1 肽類模擬

對(duì)RGD肽的結(jié)構(gòu)進(jìn)行模擬設(shè)計(jì)得到的非肽類小分子拮抗劑的主要結(jié)構(gòu)示于圖1。由圖1可知,模擬設(shè)計(jì)得到的非肽類小分子拮抗劑主要由三部分組成:一端為類似精氨酸末端胍基的部分,可為胍基或者類似的堿基,如2-氨基吡啶、四氫-1、8-二氮雜萘等;另一端為類似天冬氨酸殘基部分的羧基,一般為β-取代丙酸;中間為連接羧基與胍基的部分,其距離與RGD肽中的距離相近。另外,在環(huán)五肽4位氨基酸殘基的位置引入環(huán)狀結(jié)構(gòu)有利于與αⅤβ3的結(jié)合[5]。根據(jù)中間連接部分結(jié)構(gòu)的不同,還可將其分為:以哌嗪(閉合的二元胺結(jié)構(gòu))、哌啶(閉合的一元胺結(jié)構(gòu))、γ-內(nèi)酰胺(五元含氮環(huán)結(jié)構(gòu))、苯并多元雜環(huán)(橋環(huán)結(jié)構(gòu))和烷基酰胺等為中間連接部分的化合物[15]。這些非肽分子的結(jié)構(gòu)與電性分布,其活性、選擇性和穩(wěn)定性比RGD肽更好,將成為主要的αⅤβ3受體拮抗劑。

圖1 模擬設(shè)計(jì)得到的RGD肽的結(jié)構(gòu)

2.2 計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)

在計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)廣泛應(yīng)用的基礎(chǔ)上,研究者們主要通過建立藥效團(tuán)和直接分子對(duì)接的方法獲得更多新的高親和力和高選擇性非肽類小分子拮抗劑。

2.2.1 建立藥效團(tuán)的間接藥物設(shè)計(jì)方法

通過對(duì)已知肽類配體及非肽類小分子拮抗劑結(jié)構(gòu)的分析可知,進(jìn)行自動(dòng)分子對(duì)接等方法可建立藥效團(tuán),再根據(jù)藥效團(tuán)各元素及其空間距離對(duì)小分子數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行搜索,獲得具有相似結(jié)構(gòu)的小分子拮抗劑。

Marinelli等[16]應(yīng)用自動(dòng)分子對(duì)接的方法,對(duì)已知結(jié)構(gòu)并具有高的分子多態(tài)性和抑制作用的肽類及非肽類整合素αⅤβ3拮抗劑進(jìn)行對(duì)接實(shí)驗(yàn),探討配體-受體結(jié)合的構(gòu)效關(guān)系,得出了可以反映配-受體結(jié)合的五點(diǎn)藥效團(tuán)模型,其空間構(gòu)型示于圖2,該模型與配-受體識(shí)別結(jié)合過程的5個(gè)因素有關(guān):1)化合物中羧基氧原子與受體金屬離子依賴性粘附位點(diǎn)(Metal Ion-dependent A dhesion Site,MIDAS)區(qū)中的 Ca2+絡(luò)合;2)化合物中胍基或胍基類似集團(tuán)與受體(α)-A sp218或(α)-Asp150形成鹽橋;3)化合物中芳環(huán)結(jié)構(gòu)與受體側(cè)鏈(β)-Ty r122產(chǎn)生T形作用;4)化合物中NH基上的氫原子與受體骨架(β)-A rg216形成氫鍵;5)化合物中羰基與受體(β)-A rg214胍基結(jié)構(gòu)產(chǎn)生氫鍵作用。

Moitessier等[17]通過對(duì)具有較高親和力和選擇性的RGD肽的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析,得出對(duì)配體受體結(jié)合起重要作用的集團(tuán)為含羧酸鹽的負(fù)電區(qū)域(a),胍基類似的正電集團(tuán)(b)以及連接這兩個(gè)帶電集團(tuán)的疏水中心(c),由此得出三點(diǎn)藥效團(tuán)模型,其空間構(gòu)型示于圖3。他們還用該三點(diǎn)藥效團(tuán)模型與X射線晶體衍射得出的受體結(jié)構(gòu)進(jìn)行自動(dòng)對(duì)接和分子動(dòng)力學(xué)研究,證實(shí)了該藥效團(tuán)的有效性。

圖2 Marinelli等設(shè)計(jì)的五點(diǎn)藥效團(tuán)模型的空間構(gòu)型

圖3 Moitessier等設(shè)計(jì)的三點(diǎn)藥效團(tuán)模型的空間構(gòu)型

Dayam等[18]用Catalyst軟件包選擇了3大類小分子化合物作為訓(xùn)練集,得到了10個(gè)藥效團(tuán),用包含638個(gè)已知整合素αⅤβ3受體拮抗劑的數(shù)據(jù)庫(kù)驗(yàn)證所建立的藥效團(tuán)模型,選出具有最佳分辨力的藥效團(tuán)模型,其空間構(gòu)型示于圖4。此后,又用該藥效團(tuán)對(duì)含有600 000個(gè)化合物的小分子庫(kù)進(jìn)行3D搜索,得到 832個(gè)化合物。根據(jù)結(jié)構(gòu)新穎性原則,選擇了29個(gè)化合物進(jìn)行結(jié)合實(shí)驗(yàn),得到4個(gè)顯示高親和力的化合物。對(duì)其中的一種活性化合物進(jìn)行構(gòu)效研究,發(fā)現(xiàn)了兩種高親和力的小分子,這些小分子可被偶聯(lián)于紫杉醇,所形成的化合物可直接作用于αⅤβ3陽(yáng)性的轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞。

圖4 Dayam等設(shè)計(jì)的藥效團(tuán)模型的空間構(gòu)型

程剛英等[19]選擇了對(duì)αⅤβ3受體具有較高抑制活性(IC50＜110 nmol/L)的4個(gè)類型(分別以酰胺、哌嗪、哌啶、γ-戊內(nèi)酰胺為中間連接基)的30個(gè)化合物為訓(xùn)練集,利用Catalyst軟件構(gòu)建了整合素αⅤβ3受體選擇性拮抗劑藥效團(tuán)模型,其空間構(gòu)型示于圖5。他們又在數(shù)據(jù)庫(kù)中尋找具有活性的母體結(jié)構(gòu),對(duì)母體結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾改造及類藥性分析,得到了新的預(yù)測(cè)活性較高且易于合成的先導(dǎo)化合物。

圖5 程剛英等設(shè)計(jì)的藥效團(tuán)模型的空間構(gòu)型

對(duì)比圖2～圖5可以看出,4種用不同方法設(shè)計(jì)出的最佳藥效團(tuán)雖存在一定的不同之處,但均含有疏水中心、芳環(huán)及負(fù)電集團(tuán)等藥效元素,且各藥效元素之間的距離相似。利用藥效團(tuán)進(jìn)行分子篩選可得到較多具有高親和力的小分子,進(jìn)一步的研究仍在進(jìn)行中。

2.2.2 分子對(duì)接法直接藥物設(shè)計(jì)

分子對(duì)接法(Docking)是基于受體結(jié)構(gòu)的直接藥物設(shè)計(jì)最常用的方法,是直接將小分子與受體進(jìn)行模擬結(jié)合,通過計(jì)算,預(yù)測(cè)兩者間的結(jié)合模式和親和力,對(duì)受體-配體結(jié)合進(jìn)行三維構(gòu)效關(guān)系研究,優(yōu)化先導(dǎo)化合物以實(shí)現(xiàn)全新藥物設(shè)計(jì),并獲得結(jié)構(gòu)新穎的靶向藥物,包括DOCK、A utodock、FlexX 等。

Casiraghi[20]和Feuston[21]等分別用DOCK方法研究了RGD三肽中插入氨基環(huán)戊酸結(jié)構(gòu)和非肽類小分子配體與αⅤβ3受體的結(jié)合機(jī)制,以指導(dǎo)新化合物的設(shè)計(jì)與優(yōu)化;Marinelli等[16]用7類9個(gè)已知的αⅤβ3受體配體(包括肽類和非肽類配體、光學(xué)異構(gòu)體)與受體進(jìn)行對(duì)接,研究了配體與受體結(jié)合的構(gòu)效關(guān)系,證明配體與受體的極性基團(tuán)的相互作用和氫鍵作用對(duì)兩者的結(jié)合力起著關(guān)鍵作用,且AutoDock計(jì)算出的結(jié)合能與實(shí)驗(yàn)測(cè)得的IC50或Ki有很好的一致性,并發(fā)現(xiàn)有兩種可能的受體結(jié)合模式,其能量相差約8.4 kJ/mo l。

Raboisson等[22]用 DOCK方法對(duì)吲哚類αⅤβ3受體拮抗劑進(jìn)行了三維構(gòu)效關(guān)系研究,并以此為依據(jù),設(shè)計(jì)出3個(gè)新型化合物,通過生物活性測(cè)定得到親和力和選擇性最高且能通過口服給藥的αⅤβ3受體拮抗劑3(3-吡啶基)-3-[4-[2-(5,6,7,8-四氫[1,8]萘啶-2)乙基]吲哚-1]丙酸。該藥物對(duì)αⅤβ3受體的IC50為0.50 nm ol/L,對(duì)αⅡbβⅢa受體的 IC50＞1 μmol/L。

紀(jì)慶等[23-24]基于整合素αⅤβ3受體的胞外區(qū)及與配體復(fù)合物的三維晶體結(jié)構(gòu)確定結(jié)合位點(diǎn),用DOCK 4.0程序?qū)π》肿訋?kù)進(jìn)行篩選,并進(jìn)行生物活性測(cè)試,得到了一類靶向整合素αⅤβ3的全新的先導(dǎo)化合物。挑選出得分高的前1 000個(gè)化合物,按化學(xué)特性和類藥性的不同將化合物分類,從每一類中挑選出得分高的代表性化合物,最終選擇50個(gè)化合物進(jìn)行生物學(xué)活性測(cè)定。通過活性測(cè)定,得到7個(gè)化合物具有抑制細(xì)胞黏附活性(對(duì) VN的半數(shù)抑制濃度IC50為38.5～180.4 μmol/L),其中3,4-二氯苯基雙胍活性最高(對(duì)VN 的IC50為 38.5μmol/L),此即為靶向整合素αⅤβ3受體的一類新型先導(dǎo)化合物——取代苯基雙胍類化合物。他們?cè)谘芯恐羞€通過分子圖像學(xué)方法分析了取代苯基雙胍類化合物與αⅤβ3受體之間的作用模式以及電荷分布,找到了其作用的關(guān)鍵位置和基團(tuán)。結(jié)果顯示,取代苯基雙胍類化合物的雙胍部分以“舒展”的方式伸入金屬離子依賴性結(jié)合位點(diǎn)中,并能夠與受體Glu220形成穩(wěn)定的氫鍵。

在計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)中,藥效團(tuán)的構(gòu)建和分子對(duì)接法的聯(lián)合使用,可獲得更多高選擇性、高親和力的小分子拮抗劑,再經(jīng)過進(jìn)一步體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)篩選有望獲得新的高效小分子拮抗劑,應(yīng)用于腫瘤的顯像與治療。

3 放射性核素標(biāo)記的整合素αⅤβ3非肽類小分子拮抗劑在腫瘤顯像和治療方面的應(yīng)用

研究表明,18F、64Cu、99Tcm和111In標(biāo)記的環(huán)RGD肽類在各種腫瘤鼠模型中均可表現(xiàn)出選擇性的腫瘤攝取[25-27],且18F-Galacto-RGD已成為第一個(gè)進(jìn)入臨床試驗(yàn)的以整合素αⅤβ3為靶點(diǎn)的腫瘤顯像劑,在惡性黑素瘤的臨床試驗(yàn)中表現(xiàn)出好的生物學(xué)分布及特異性靶點(diǎn)識(shí)別[28];最近亦用于膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的臨床試驗(yàn),且可成功識(shí)別表達(dá)αⅤβ3膠質(zhì)母細(xì)胞瘤[29]。雖然,RGD肽類雖已被證明具有成為腫瘤顯像藥物的潛力,但目前還沒有一種放射性藥物在具有高腫瘤攝取和滯留的特性的同時(shí)在非腫瘤組織攝取很少。而肽類模擬及非肽類拮抗劑對(duì)αⅤβ3具有很高的親和力和選擇性,這就意味著這類分子能在將非腫瘤組織的攝取降到最低的同時(shí)把放射性核素輸至腫瘤組織,從而使其具有應(yīng)用于腫瘤早期診斷顯像和靶向治療的潛力。

H arris TD等[30]的研究證明,給荷瘤小鼠尾靜脈注射111In-TA 120(TA 120為吲哚類RGD肽模擬分子),2 h后表現(xiàn)出高腫瘤攝取(12.9%ID/g),24 h時(shí)的攝取仍高達(dá)9.25%ID/g;內(nèi)臟攝取雖低于二聚體環(huán)肽,但腎臟攝取仍較高,24 h時(shí)為7.5%ID/g。而喹諾酮類RGD肽模擬分子TA 138用111In標(biāo)記后,由尾靜脈注入荷瘤小鼠體內(nèi),2 h后腫瘤攝取可達(dá)9.39%ID/g,腫瘤與非腫瘤的放射性攝取比(T/NT)如下:血液17.5、肌肉 17.1、肝臟 4.83、腎臟 4.04 、骨 6.01。且111In-TA 138表現(xiàn)出腫瘤清除慢,在靜脈注射24 h后降至3.46%ID/g。較RGD肽類分子具有更好的T/NT。

目前,此類研究仍多集中于發(fā)現(xiàn)及設(shè)計(jì)具有更高親和力和特異性的整合素αⅤβ3非肽類小分子拮抗劑,對(duì)于已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的高親和力的小分子尚未進(jìn)行進(jìn)一步的動(dòng)物體內(nèi)顯像及應(yīng)用實(shí)驗(yàn),這將成為今后實(shí)驗(yàn)研究的重點(diǎn)之一。

4 整合素αⅤβ3非肽類小分子拮抗劑在腫瘤顯像和治療方面的應(yīng)用前景

通過 RGD肽類模擬、計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì),可得出大量具有高選擇性、高親和力αⅤβ3小分子拮抗劑,再經(jīng)過進(jìn)一步體內(nèi)外實(shí)驗(yàn),可選擇出適于使用放射性核素標(biāo)記、易于清除的小分子拮抗劑,對(duì)腫瘤組織進(jìn)行顯像。亦可將治療用放射性核素(如131I)或者抗腫瘤藥物結(jié)合于高特異性、高親和力、具有類藥性的小分子拮抗劑上,將具有治療效果的核素或抗腫瘤藥物輸送至靶點(diǎn),用于腫瘤的靶向治療。通過深入研究,整合素αⅤβ3小分子拮抗劑必將在腫瘤的顯像及臨床治療方面發(fā)揮重要作用。

[1] Beer AJ,Schw aiger M.Imaging of integrin alphavbeta3 exp ression[J].Cancer Metastasis Rev,2008,27(4):631-644.

[2] Liu ZF,Wang F,Chen X.IntegrinαⅤβ3-targeted cancer therapy[J].D rug Development Research,69(6):329-339.

[3] Dijkgraaf I,Boerman OC.Radionuclide imaging of tumor angiogenesis[J].Cancer Biother Radiopharm,2009,24(6):637-647.

[4] 黃云鵬.整合素αⅤβ3在腫瘤血管生成中的作用[J].中國(guó)腫瘤,2007,16(1):35-38.

[5] 張春麗,楊銘,王榮福.RGD肽與整合素αⅤβ3受體結(jié)合的構(gòu)效關(guān)系及放射性標(biāo)記配體的設(shè)計(jì)[J].腫瘤學(xué)雜志,15(1):76-81.

[6] 劉紅潔,王榮福,張春麗,等.131-I標(biāo)記RGD環(huán)肽在荷瘤小鼠體內(nèi)分布與顯像研究[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù),2008,24(1):131-133.

[7] Edwards D,Jones P,Haram is H,et al.99mTc-NC100692——a tracer for imaging vitronectin receptors associated w ith angiogenesis:a preclinical investigation[J].Nucl Med Biol,2008,35(3):365-375.

[8] Roed L,Oulie I,McParland BJ,et al.H uman urinary excretion of NC100692,a RGD-pep tide for imaging angiogenesis[J].Eur JPharm Sci,2009,37(3-4):79-83.

[9] Raguse JD,Gath HJ,Bier J,et al.Cilengitide(EMD 121974)arrests the grow th of a heavily pretreated highly vascularised head and neck tumour[J].OralOncol,2004,40(2):228-230.

[10]Ruoslahti E,Pierschbacher MD.A rg-Gly-Asp:a versatile cell recognition signal[J].Cell,1986,44(4):517-518.

[11]Wester HJ,Schottelius M,Scheidhauer K,et al.Comparison o f radioiodinated TOC,TOCA and Mtr-TOCA:the effect of carbohyd ration on the pharmacokinetics[J].Eur J Nucl Med Mol Imaging,2002,29(1):28-38.

[12]Chen X,Hou Y,TohmeM,etal.Pegy lated A rg-Gly-Asp pep tide:64Cu labeling and PET imaging of brain tumor alphavbeta3-integrin expression[J].JNuclMed,2004,45(10):1 776-1 783.

[13]Chen X,Tohme M,Park R,et al.Micro-PET imaging of alphavbeta3-integrin exp ression with18F-labeled dimeric RGD pep tide[J].Mol Imaging,2004,3(2):96-104.

[14]Li ZB,Cai W,Cao Q,et al.64Cu-labeled tetrameric and octameric RGD peptides for small-animal PET of tumor alpha(Ⅴ)beta(3)integrin expression[J].JNucl Med,2007,48(7):1 162-1 171.

[15]倪廣惠,姜鳳超.整合素αⅤβ3拮抗劑的研究進(jìn)展[J].藥學(xué)學(xué)報(bào),2006,41(7):577-582.

[16]Marinelli L,Lavecchia A,Gottschalk KE,et al.Docking studies on alphaⅤbeta3 integrin ligands:pharmacophore refinement and im p lications for d rug design[J].J Med Chem,2003,46(21):4 393-4 404.

[17]Moitessier N,H enry C,Maigret B,et al.Combining pharmacophore search,automated docking,and molecu lar dynam ics simu lations as a novel strategy for flexible docking.Proof of concep t:docking of arginine-g lycine-aspartic acid-like compounds into the alphaⅤbeta3 binding site[J].J Med Chem,2004,47(17):4 178-4 187.

[18]Dayam R,Aiello F,Deng J,et al.Discovery of smallmolecule integrin alphavbeta3 antagonists as novel anticancer agents[J].J Med Chem,2006,49(15):4 526-4 534.

[19]程剛英,倪廣惠,姜鳳超.整合素αⅤβ3受體拮抗劑藥效團(tuán)模型的研究[J].藥學(xué)學(xué)報(bào),2009,44(4):379-385.

[20]Casiraghi G,Rassu G,Auzzas L,et al.G rafting am inocyclopentane carboxy lic acids onto the RGD tripeptide sequence generates low nanomolar alphaⅤbeta3/alphaⅤbeta5 integrin dual binders[J].J Med Chem,2005,48(24):7 675-7 687.

[21]Feuston BP,Culberson JC,Duggan ME,et al.Binding model for nonpep tide antagonists of alpha(Ⅴ)beta(3)integrin[J].JMed Chem,2002,45(26):5 640-5 648.

[22]Raboisson P,Desjarlais RL,Reed R,et al.Identification of novel short chain 4-substituted indoles as potent alphaⅤbeta3 antagonist using structurebased drug design[J].Eur JMed Chem,2007,42(3):334-343.

[23]紀(jì)慶,周圓,彭暉,等.整合素αⅤβ3小分子抑制劑的設(shè)計(jì)及活性測(cè)定[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào),2007,29(3):347-352.

[24]Zhou Y,Peng H,Ji Q,et al.Discovery of small molecu le inhibitors of integrinαⅤβ3through structure-based virtual screening[J].Bioorg Med Chem Lett,2006,16:5 878-5 882.

[25]Chen X,Park R,Tohme M,et al.MicroPET and autoradiographic imaging of breast cancerαⅤ-integrin expression using18F-and64Cu-labeled RGD pep tide[J].Biocon jugate Chem,2004,15(1):41-49.

[26]Janssen ML,Oyen WJ,Dijkgraaf I,et al.Tumor targeting with radio labeled alpha(Ⅴ)beta(3)integrin binding pep tides in a nudemouse model[J].Cancer Res,2002,62(21):6 146-6 151.

[27]Janssen M,Oyen WJ,Massuger LF,et al.Comparison of a monomeric and dimeric radiolabeled RGD-peptide for tumor targeting[J].Cancer Biother Radiopharm,2002,17(6):641-646.

[28]Beer AJ,Haubner R,GoebelM,et al.Biodistribution and pharmacokinetics of the alphaⅤbeta3-selective tracer18F-galacto-RGD in cancer patients[J].JNuclMed,2005,46(8):1 333-1 341.

[29]Schnell O,K rebs B,Carlsen J,et al.Imaging of integrin alpha(v)beta(3)expression in patients withmalignant glioma by[18F]Galacto-RGD positron em ission tomography[J].Neuro Oncol,2009,11(6):861-870.

[30]Harris TD,Kalogeropoulos S,Nguyen T,et al.Design,synthesis,and evaluation of radiolabeled integrin alphaⅤ beta3 receptor antagonists for tumor imaging and radiotherapy[J].Cancer Biother Radiopharm,2003,18(4):627-641.