王保社，王俊剛，張樹珍*，楊本鵬，蔡文偉，王文治，楊志才

(1 海南大學(xué)農(nóng)學(xué)院，海口570228 ;2中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所農(nóng)業(yè)部熱帶作物生物技術(shù)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，?？?71101 .)

前言

甘蔗是無性繁殖作物，常規(guī)育種利用種莖繁殖，繁殖系數(shù)低，用種量大。應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以大大提高甘蔗的繁殖系數(shù)。對加速繁殖甘蔗良種，具有重要的意義。而甘蔗莖尖脫毒組培苗在繁殖過程中受影響的因素很多，其中生根階段又是甘蔗組培苗繁殖生長的最后一關(guān)，生根質(zhì)量的好壞直接影響甘蔗組培苗的假根成活率，也就影響到甘蔗良種的繁殖數(shù)量，因此，本文主要探討幾種重要物質(zhì)對甘蔗生根效果的影響，另外對甘蔗的保綠質(zhì)量的好壞，對甘蔗的良種繁殖也有很重要的影響：延長種苗種植時(shí)間；提高種苗成活率；使其生命力增強(qiáng)；抗逆性增高，著手探討其對甘蔗組培苗保綠效果的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：其對甘蔗組培苗確實(shí)有保綠效果。

1 . 材料與方法

1.1 參考材料：云蔗99-601

1.2 甘蔗莖尖脫毒組培苗生根實(shí)驗(yàn)

取生長整齊，均勻，繼代數(shù)一致，每瓶苗數(shù)一致的云蔗99-601莖尖脫毒苗在MS培養(yǎng)基中進(jìn)行生根實(shí)驗(yàn)。方案如下：

①：不同NAA濃度對云蔗99-601莖尖脫毒苗生根的影響，共設(shè)6個(gè)濃度，分別為0，1，1.5，2，3，3.5，mg/L，每濃度30瓶。

②：不同的IAA對云蔗99-601莖尖脫毒苗生根的影響，共設(shè)6個(gè)濃度分別為0，0.5，2，3，4，5，mg/L，每濃度30瓶。

③:不同的濃度的硅對云蔗99-601莖尖脫毒苗生根及保綠的影響，共設(shè)11個(gè)濃度，分別為0，0.05，0.1，0.2，0.3，0.5，1，1.5，1.8，2.3，3mg/L，每濃度30瓶。

④：NAA和硅配合對云蔗99-601生根和NAA和保綠的實(shí)驗(yàn)，共設(shè)6個(gè)濃度分別為：0，0.3，0.5，1，1.5，2mg/L的硅，各加上MS+NAA2mg/L，每濃度30瓶。

⑤：沙床種植試驗(yàn)：取上述1.2中各濃度的NAA,IAA,硅的組培甘蔗苗，各取10瓶進(jìn)行沙床種植。每對照2行，共42行。

2 . 結(jié)果分析

2.1.1.不同NAA濃度對云蔗99-601莖尖脫毒苗生根的影響列在表1。

表1.接種33天后不同NAA濃度對云蔗99-601莖尖脫毒苗生根

從表1可以看出：NAA濃度不同，其對甘蔗莖尖組培苗生根的影響也不同，以2mg/L的NAA對云蔗99-601的生根影響效果最好。

2.1.2.不同濃度的IAA對云蔗99-601莖尖脫毒苗生根的影響列在表2

從表2可以看出IAA對甘蔗生根有一定的影響，隨著IAA濃度的增加，甘蔗的生根效果越來越好,到2mg/L時(shí)生根最好：根濃而密，較粗壯；苗墨綠；黃葉基本沒有。以后隨著IAA濃度的增加，甘蔗的生根效果越來越差。

2.1.3.不同濃度〔1-3mg/L〕的硅在不同時(shí)間對云蔗99-601生根的影響列在表3

表2不同濃度的IAA對云蔗99-601莖尖脫毒苗生根的影響

表3不同濃度〔1-3mg/L〕的硅在不同時(shí)間對云蔗99-601生根的影響

從表3可知：30天之內(nèi)，各濃度的硅促進(jìn)生根的差別不明顯，但較長時(shí)間（如40天），各濃度的硅促進(jìn)生根的差別較明顯，以1mg/L的促進(jìn)生根的效果最好。

另外，在各時(shí)間段，不同濃度的低濃度硅〔濃度分別為0，0.05，0.1，0.2，0.3，0.5mg/L 〕對云蔗99-601生根差別也不明顯。生根率都在40%-60%之間，其中以0.5mg/L的促進(jìn)生根相對較好，達(dá)到59%。

比較硅和NAA的甘蔗苗，發(fā)現(xiàn)各濃度的硅都對甘蔗苗的保綠效果明顯，明顯高于各濃度NAA的培養(yǎng)基的甘蔗苗，在培養(yǎng)基中加入硅的甘蔗苗明顯地黃花少，長勢好，而其中只加入NAA的明顯地黃花多，長勢弱，差別非常明顯。其中以加入0.4-0.5mg/L的硅保綠效果最好；比較各濃度的IAA和NAA甘蔗苗，發(fā)現(xiàn)IAA仍有部分的保綠效果，但沒硅明顯。

左為IAA，由左至右的濃度分別為:0.52345mg/L，右為NAA由左至右的濃度分別為:11.5233.5 mg/L

2.1.4.NAA和硅配合對甘蔗生根及保綠的影響試驗(yàn)：

按保綠來看：接種80后天以MS+ Si0.5mg/L的效果最好，苗綠少，明顯地苗壯，與其它濃度對照差異非常明顯；

按生根情況來看，以MS+NAA 2mg/L+Si1mg/L的生根最好，具體情況如下表

表4：.NAA和硅配合對甘蔗生根的影響

2.1.5.各濃度的NAA,IAA,硅培養(yǎng)的云蔗99-601莖尖脫毒苗組培，組培苗的沙床種植試驗(yàn)，由NAA 3.5，3，2，1.5，1.0，mg/L各取10瓶，IAA 5,4.3,2,0.5,mg/L各10瓶。硅3，2.3，1.8，1.5，1，0.5，0.4，0.3，0.2，0.05，mg/L各取10瓶，沙床種植，每種對照種兩行，共42行，沙床種植30天后，統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：

從長勢方面看：培養(yǎng)基中加硅0.2-3mg/L甘蔗苗的長勢明顯高于加人IAA和NAA的，培養(yǎng)基中加NAA的長勢最差，加IAA的次之，加硅的最好。但培養(yǎng)基中加NAA 3mg/L和NAA 2mg/L的甘蔗苗明顯莖粗。在所有沙床種植甘蔗苗中，以MS培養(yǎng)基（不加其它物質(zhì)）長勢最差，苗細(xì)而弱，倒伏多，死亡率高，以加NAA3mg/L的莖最粗，培養(yǎng)基中加NAA 3mg/L，和NAA 2mg/L的沙床種植甘蔗苗長勢不明顯，在培養(yǎng)基中加硅0.4，0.5，1，1.8，2.3mg/L的沙床種植甘蔗苗的長勢差別不明顯，其中以培養(yǎng)基中加入硅1mg/L 和硅1.5mg/L的株莖最高，長勢也最好，在MS培養(yǎng)基中加入IAA 的長勢僅次于硅，MS中加入IAA 3mg/L和IAA 2mg/L的變化不明顯，但它們?nèi)绾图覫AA 4mg/L和IAA 5mg/L的相比變化卻很明顯。長勢明顯高于后者。

3 .小結(jié)與討論

目前，甘蔗的良種繁殖除了采用常規(guī)的種莖繁殖以外，就是采用組織培養(yǎng)生物技術(shù)進(jìn)行良種快繁，組織培養(yǎng)生物技術(shù)繁殖速度快，能保持良種的種性，可以克服常規(guī)的種莖繁殖率低的缺點(diǎn)，而且還可以生產(chǎn)出無病蟲害的健康種苗。在甘蔗組織培養(yǎng)的整個(gè)過程中，甘蔗組培苗沙床生根階段的生根質(zhì)量的好壞，和種苗的保綠狀況，直接影響到甘蔗組培苗假植成活率。本文主要探討NAA,IAA,Si對甘蔗組培苗的生根，以及沙床種植后甘蔗苗長勢的影響，也對硅的促進(jìn)生根及保綠作用作了一些探討。較高濃度（﹥0.0001mg/L）的NAA能促進(jìn)生根[2]，在MS培養(yǎng)基中加入2 mg/L的NAA對云蔗99-601的生根效果最好；低濃度（﹤50mg/L）的IAA具有降低木質(zhì)素，增加纖維素含量的作用[3]，對甘蔗的莖尖脫毒苗的生根有一定的效果，并且，它對甘蔗的保綠也有一定作用，但它在促進(jìn)生根方面不如NAA;在保綠方面不如硅；研究中還發(fā)現(xiàn)：6-BA可有效地誘導(dǎo)芽的萌發(fā)，對甘蔗莖尖脫毒組培苗的生根有抑制作用，因凡是MS中加入6-BA的，都沒有生根，而對照組（MS培養(yǎng)基）部分生根，生根率44%；硅對甘蔗莖尖脫毒組培苗的生根有促進(jìn)作用，以1mg/L的效果最好。雖效果稍遜于NAA，但它能使葉綠體，基粒片層增大增多，使線粒體數(shù)增多，對組培苗的保綠有較好的效果[1]，關(guān)于硅對甘蔗保綠的影響，是本實(shí)驗(yàn)的一個(gè)亮點(diǎn)，國內(nèi)外還沒有類似的報(bào)道；在2 mg/L NAA和各濃度的硅的配合實(shí)驗(yàn)時(shí)，也是以0.5 mg/L的硅保綠效果最好；因NAA可使根活力下降，所以沙床種植時(shí)苗的長勢并不很好。

因此，甘蔗莖尖脫毒組培苗在生根和繁殖過程中，要嚴(yán)格按照以上的要求進(jìn)行，才有利于提高組培苗的成活率。

[1]鄭愛珍，任雪平，硅在水稻生理中的作用， [J]，農(nóng)業(yè)與技術(shù)，2004，24，（1），50-52

[2]江金蘭，周輝明等，6-BA,NAA不同配比對大花蕙蘭叢生芽增殖的影響[J]，浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009（1） 85-86

[3]盧學(xué)琴，胡對尚連等，IAA對慈竹木質(zhì)素和綜纖維動態(tài)積累的調(diào)控相應(yīng)，[J]，林業(yè)科技，2009，34 （1）16-18