張凱波 吳松泉

浙江省麗水學(xué)院醫(yī)學(xué)院（323000）

刺五加提取物和刺五加注射液在臨床上廣泛應(yīng)用，具有明顯的抗腦缺血/再灌注損傷作用[1,2]。但同時亦有報道稱刺五加注射液引起各類不良反應(yīng)及過敏反應(yīng)[3,4]。探究其原因除了患者個體差異外，主要是因為刺五加制劑成分復(fù)雜，輸液過程中產(chǎn)生微粒變化。因此解決這一問題的關(guān)鍵是確定刺五加提取物中抗腦缺血/再灌注損傷的有效成分。本實驗以兩種不同的刺五加提取物分別干預(yù)腦缺血/再灌注損傷的大鼠，觀察自由基滅活酶和自由基產(chǎn)物的變化，以推斷刺五加抗腦缺血/再灌注損傷的有效部位。

1 材料與方法

1.1 實驗藥物

刺五加總黃酮和刺五加去總黃酮提取物，原藥材購自寶豐藥業(yè)，刺五加總黃酮和刺五加去總黃酮提取物由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥物研究所提取。

1.2 試劑

SOD臨床檢測試劑盒、MDA檢測試劑。

1.3 動物分組

SD大鼠32只，（300±20）g，雌雄各半，隨機分為4組，每組8只，分別為A組（模型組），B組（刺五加總黃酮組），C組（刺五加去總黃酮提取物組），D組（假手術(shù)組）。

1.4 給藥方法及動物模型制備

A、D兩組給予生理鹽水灌胃，B組C組分別以刺五加總黃酮和去總黃酮提取物灌胃，給藥劑量按體表面積比例計算得18mL/kg。各組均連續(xù)給藥1周后禁食不禁水24h后參考longa[5]方法并加以改進造大腦中動脈閉塞（MCAO）局灶性腦缺血模型，3h后拔出線栓實現(xiàn)再灌注，立即斷頭取腦。以1∶10比例制成腦組織勻漿，－4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5 觀察指標(biāo)與檢測方法

腦組織SOD含量以黃嘌呤氧化酶法測定。腦組織MDA含量以改良八木國夫法[6]測定。

1.6 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié) 果

如表1所示，與D組比較A組大鼠腦組織SOD明顯下降，MDA水平明顯上升（P＜0.05）。與A組相比，B組大鼠腦組織SOD有顯著提高（P＜0.05），MDA水平顯著下降（P＜0.05）；C組大鼠腦組織SOD、MDA水平也有一定變化，但與A組比較無顯著性差異（P＞0.05）。

表1 局造性腦缺血/再灌注后各組SOD和MDA水平（±s）

表1 局造性腦缺血/再灌注后各組SOD和MDA水平（±s）

★與D組比較P＜0.05；* 與A組比較P＜0.05；☆A(yù)組比較P＞0.05

組別 n SOD（NU/mL） MDA（nmol/mol）A組 8 40.32±2.54★ 7.57±1.88★B組 8 56.57±2.83* 5.43±1.54*C組 8 42.13±1.96 ☆ 4.41±1.67☆D組 8 63. 48±3.23 1.79±0.85

3 討 論

腦缺血/再灌注損傷初期使機體爆發(fā)性產(chǎn)生了大量的自由基，清除自由基系統(tǒng)因此受到消耗和抑制，表現(xiàn)為超氧自由基清除劑活力迅速下降。SOD對機體的氧化與抗氧化平衡起著至關(guān)重要的作用，此酶能清除O2·，保護細(xì)胞免受損傷。SOD是體內(nèi)主要的自由基清除劑，MDA是氧自由基與生物膜多聚不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物，其產(chǎn)生量與氧自由基的量相平行，因而測定MDA最可反映氧自由基的水平，間接反映出細(xì)胞損傷的程度。腦缺血/再灌注損傷引起了整個機體氧化抗氧化系統(tǒng)的失衡，SOD和MDA參與了整個機體對腦缺血/再灌注損傷的反應(yīng)，并與損傷的病程發(fā)展密切相關(guān)[7]。SOD活力與MDA含量在理論上是互相牽制，此消彼長的關(guān)系，SOD和MDA水平變化一方面是自由基清除和生成水平的直接體現(xiàn)，另一方面可以較好地反映腦神經(jīng)細(xì)胞的損傷、修復(fù)情況。

本實驗中模型組大鼠腦組織SOD和MDA水平與假手術(shù)組比較有明顯變化驗證了這一理論。同時我們可以看到B組與A組比較，刺五加總黃酮能有效提高腦組織SOD含量，同時降低MDA水平，二者有比較有顯著性差異。而C組與A組比較雖然有數(shù)字的變化，但二者間在統(tǒng)計學(xué)上無顯著性差異。因此我們認(rèn)為從影響自由基代謝的角度看，刺五加總黃酮具有抑制有害自由基產(chǎn)生、誘導(dǎo)自由基滅活酶生成的作用，是刺五加抗腦缺血/再灌注損傷的有效部位。

[1] 路志紅,熊利澤,王強.刺五加注射液對大鼠大腦中動脈栓塞所致腦缺血損傷的保護作用[J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,2002,23(8):698.

[2] 吳錚,邢東明,孫虹等.刺五加對缺血再灌腦自由基產(chǎn)生及神經(jīng)元的保護作用[J].中藥藥理與臨床,2001,17(6):29.

[3] 徐春麗,丁麗萍,鄭志昌等.刺五加注射液致藥物不良反應(yīng)99例文獻分析[J].藥物流行病學(xué)雜志,2004,13(6):323.

[4] 郭玉莉,李海峰,蘇慶梅.刺五加注射液的過敏反應(yīng)[J].實用醫(yī)技雜志,2003,10(3):212.

[5] Longa EZ,Weinstein PR,Carlson S,et al.Reversible midle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats[J].Stroke,1989,20(1):84-91.

[6] 齊風(fēng)菊,周玫,陳媛等.血漿丙二醛含量測定方法改良的八木國夫法[J].第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,1986,6(21):152.

[7] Sakashit A.Role of superoxide dismutase and nitric oxide on the interaction between brain and systemic circulation during brain ischemia[J].Biochem Biophys Acta,1994,12(7):67.