董莉妮 屈曉冰 徐 靜

1 中南大學湘雅二醫(yī)院老年病科（410011）

2 湖南省人民醫(yī)院急診科（410005）

研究證實，脂肪組織不僅僅是儲存脂質(zhì)的“倉庫”，也是重要的內(nèi)分泌器官?？煞置谌缡菟兀↙eptin，LP）、脂聯(lián)素（Adiponectin，APN）、抵抗素（Resistin）、胰島素樣生長因子（IGF-1）等多種生物活性物質(zhì)[1,2]。羅格列酮（Rosiglitazone，RSG）為高度選擇性過氧化物酶體增殖激活受體（peroxisone prolife activated receptor-γ，PPARγ）激動劑，有增加組織對胰島素的敏感性、降低血糖、糾正血脂紊亂、抗炎、減少動脈內(nèi)膜厚度等多種藥理作用。為此，我們通過體外培養(yǎng)觀察人體腹部皮下脂肪組織及內(nèi)臟脂肪組織LP及Resistin的分泌情況，并用不同濃度羅格列酮作為干預因素作用于脂肪組織，了解其對脂肪組織LP及Resistin分泌的影響，旨在為研究與脂肪組織相關(guān)如胰島素抵抗、肥胖和動脈粥樣硬化等疾病的預防和治療提供新的思路。

1 對象與方法

1.1 標本采集及分組培養(yǎng)

脂肪組織樣本（n=90）來源于15例于2009年11月至2010年6月于泌尿外科行擇期腎結(jié)石手術(shù)的男性住院患者，術(shù)前簽署知情同意書。術(shù)中嚴格按無菌原則分別切取腹部皮下及腎臟周圍脂肪組織，浸泡于裝有DMEM/F12培養(yǎng)基的無菌培養(yǎng)皿中，試驗分為干預組與對照組（生理鹽水），每組均包括腹部皮下脂肪組和內(nèi)臟脂肪組，干預組以不同濃度羅格列酮（10、50μmol/L）干預，分別培養(yǎng)6h。

1.2 LP及Resistin檢測

用夾心酶聯(lián)免疫吸附測定法（Enzyme Linked-Immuno Sorbent Assay，ELISA），試劑盒（人Leptin試劑盒、人Resistin試劑盒）購買于深圳晶美生物制劑公司。

1.3 統(tǒng)計方法

統(tǒng)計學處理使用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行分析。各計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，計量資料的組間比較采用獨立樣本t檢驗。多個樣本間比較采用Oneway ANOVA 檢驗，LSD方法進行。以α=0.05為檢驗水準（雙側(cè)）。

2 結(jié) 果

2.1 基礎(chǔ)狀態(tài)脂肪組織LP及Resistin分泌的情況

基礎(chǔ)狀態(tài)下，體外培養(yǎng)6h后，腹部皮下脂肪組織LP分泌濃度為（80.27±7.47）pg/g組織，明顯高于內(nèi)臟脂肪組織（59.16±3.59pg/g組織，P＜0.05）；內(nèi)臟脂肪組織Resistin分泌濃度為（85.50±6.13）pg/g組織，明顯高于腹部皮下脂肪組織（53.92±4.91 pg/g組織，P＜0.05）。結(jié)果見表1。

表1 基礎(chǔ)狀態(tài)下人腹部皮下和內(nèi)臟脂肪組織分泌LP及Resistin的水平

2.2 不同濃度羅格列酮干預對人脂肪組織LP及Resistin分泌的影響

體外培養(yǎng)6h后，羅格列酮低濃度干預組腹部皮下及內(nèi)臟脂肪組織分泌LP濃度各為（61.08±5.06）和（43.21±3.45）pg/g組織，Resistin濃度各為（35.97±8.32）和（60.65±4.35）pg/g組織，分別較對照組的降低（P＜0.05）；羅格列酮高濃度干預組腹部皮下及內(nèi)臟脂肪組織分泌LP濃度為（52.39±3.57）和（37.56±2.30）pg/g組織，Resistin濃度為（19.58±9.62）和（26.84±1.92）pg/g組織，分別較對照組及低濃度干預組的明顯降低（P＜0.05）。結(jié)果見表2。

3 討 論

3.1 脂肪組織LP及Resistin分泌的特征

本實驗觀察到腹部皮下脂肪組織LP的分泌活性高于內(nèi)臟脂肪組織，與Fain等[3]及Wajchenberg[4]研究結(jié)果相符。有研究表明，皮下脂肪組織LP的mRNA 表達水平明顯高于大網(wǎng)膜脂肪組織，是LP的最主要來源。另外，本實驗還觀察到內(nèi)臟脂肪組織分泌Resistin活性高于皮下脂肪組織。Banerjee等[5]指出內(nèi)臟脂肪組織分泌Resistin水平為皮下脂肪組織的4～5倍。不同部位脂肪組織分泌LP及Resistin的活性存在差異，原因尚不十分明確，推測與不同脂肪庫之間功能上的異質(zhì)性有關(guān)。經(jīng)研究證實，LP的分泌與脂肪細胞的數(shù)量及大小呈正相關(guān)，而皮下脂肪細胞體積比網(wǎng)膜脂肪細胞大50%左右。此外，皮下及內(nèi)臟脂肪組織之間仍存在代謝方面的差異，可能對其分泌活性產(chǎn)生影響。內(nèi)臟脂肪組織與皮下脂肪組織相比，對胰島素不敏感，糖利用率較低。不同部位脂肪組織分泌功能差異性，提示脂肪組織可能不單單是一個內(nèi)分泌器官，而是一組相似但各有特征的內(nèi)分泌器官，可更好的解釋代謝綜合征的發(fā)病機制。

表2 不同濃度羅格列酮干預對人脂肪組織LP及Resistin分泌的影響

3.2 羅格列酮對脂肪組織分泌LP及Resistin的影響

羅格列酮為高度選擇性PPARγ激動劑，具有增加組織對胰島素的敏感性，改善β細胞產(chǎn)生胰島素的能力，糾正血脂紊亂、抗炎、減少動脈內(nèi)膜厚度等多種作用。本實驗結(jié)果顯示以羅格列酮干預腹部皮下和內(nèi)臟脂肪組織后，脂肪組織LP及Resistin的分泌水平均降低，且呈明顯的劑量－效應(yīng)關(guān)系。郭曉珍等[6]研究發(fā)現(xiàn)，羅格列酮可降低2型糖尿病患者血漿LP水平，另有學者證實羅格列酮可降低胰島素抵抗大鼠抵抗素的血漿水平及其表達。

羅格列酮降低脂肪組織LP及Resistin的分泌水平，機制尚不完全明確，可能的機制有以下幾個方面：①通過激活PPARγ來調(diào)節(jié)脂肪組織分化及蛋白基因表達。PPARγ被譽為脂肪細胞分化和分泌蛋白基因表達的內(nèi)在調(diào)定點。Wiesenberg等在體外實驗中證實，羅格列酮BRL249653能夠誘導PPARγ介導的基因激活。Rieusset進行的體外試驗發(fā)現(xiàn)羅格列酮激活 PPARγ后，增強p85磷脂酰肌醇 3-激酶（p85alphaPI-3K）水平，并降低LP的表達，而p85alphaPI-3K是胰島素的主要組成部分之一。Resistin基因表達的正調(diào)控機制是由于C/EBPa激活p300和CBP，提高了抵抗素啟動子的組蛋白乙?；?。羅格列酮在成熟脂肪細胞內(nèi)減少組蛋白乙?；虲/ EBPα的結(jié)合[7]。②羅格列酮的抗炎作用。研究發(fā)現(xiàn)炎癥狀態(tài)下LP及Resistin水平明顯增高，由此，我們可推測羅格列酮通過其抗炎作用能降低LP、Resistin水平。③脂肪源性細胞因子分泌的相互調(diào)節(jié)。Bruun等發(fā)現(xiàn)TNF-α等能通過旁分泌或自分泌的方式增強LP及Resistin基因啟動子的活性從而提高脂肪細胞LP及Resistin分泌，而羅格列酮已證實可降低TNF-α水平。

由此可見，羅格列酮可降低脂肪組織LP及Resistin的分泌，而后二者又與代謝綜合征及動脈粥樣硬化性疾病密切相關(guān)，由此可推測羅格列酮可通過此途徑起到改善胰島素抵抗和動脈粥樣硬化的作用，具有降糖以外的更廣泛的臨床應(yīng)用價值。

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