常 靖, 崔 巍, 張蕾萍, 邸玉敏, 楊 俊

(1.公安部物證鑒定中心,北京 100038;2.中國人民公安大學(xué),北京 100038;3.貴州省畢節(jié)市公安局,貴州畢節(jié) 551700)

0 引言

甲基異柳磷(isofenphos-methyl),化學(xué)名稱:O-甲基-O-(2-異丙氧基羰基苯基)-N-異丙基柳代磷酸酯,分子式 C14H22NO4PS,結(jié)構(gòu)式如圖1所示。甲基異柳磷純品為淡黃色油狀液體,易溶于苯、甲苯、二甲苯、乙醚等有機(jī)溶劑,難溶于水,常溫下穩(wěn)定,遇強(qiáng)酸和堿易分解,光和熱也能使其加速分解。

圖1 甲基異柳磷結(jié)構(gòu)式

甲基異柳磷雖然對(duì)地下害蟲的防治效果與辛硫磷相近,是防治害蟲的優(yōu)良藥劑,但它是一種新型高毒有機(jī)磷土壤殺蟲劑,被國家列為禁用農(nóng)藥。但在一些地區(qū)仍在使用。文獻(xiàn)報(bào)道,薄層色譜法[1](HPTLC)、紫外-可見分光光度法[2]、氣相色譜法[3-5](GC-FPD)、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法[3,6](GC/MS)是分析甲基異柳磷普遍應(yīng)用的方法。雖然農(nóng)殘檢測(cè)部門已對(duì)蔬菜、水果、肉類、蛋類中建立起標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)方法,這些檢測(cè)方法在檢材新鮮的情況下,方法快速、靈敏、簡(jiǎn)便,而在法庭科學(xué)領(lǐng)域,檢材高度腐敗,如果采用該方法,油脂、色素、腐敗蛋白質(zhì)難以去除,容易造成干擾或漏檢。因此,本文介紹一例因甲基異柳磷中毒死亡,尸體臟器組織已高度腐敗,檢測(cè)臟器組織中的甲基異柳磷的方法,供同行參考。

1 案例

2007年 7月 4日,吳 ××被人發(fā)現(xiàn)時(shí)口吐白沫,送醫(yī)院搶救無效死亡。2個(gè)月后當(dāng)?shù)毓矙C(jī)關(guān)將提取到的死者胃內(nèi)容 4 g與肝組織 50 g(均已高度腐敗)、現(xiàn)場(chǎng)玻璃瓶碎片送至公安部物證鑒定中心檢測(cè),要求檢驗(yàn)常見有機(jī)磷農(nóng)藥。公安部物證鑒定中心遂對(duì)該案例進(jìn)行檢驗(yàn),將腐敗胃內(nèi)容 4 g與肝組織 15g混合經(jīng)丙酮水浸泡,揮去丙酮去除雜質(zhì)后,液-液萃取、中性三氧化二鋁二次凈化,GC/MS分析。結(jié)果從死者胃內(nèi)容及肝組織、現(xiàn)場(chǎng)的玻璃瓶碎片中均檢出甲基異柳磷。

2 試驗(yàn)部分

2.1 儀器

島津公司 GC/MS-5050A氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,配 GC-2010工作站。

SORVAU Biofuge Primeore離心機(jī)、EYELA CUTE MIXER CM100振蕩器。

2.2 試劑

乙酸乙酯、丙酮,均為分析純?cè)噭?/p>

2.3 色譜條件

色譜柱:DB-5/30m×0.25mm×0.25μm石英毛細(xì)管柱;柱溫:100℃恒溫 3min后以 40℃/min速率程序升溫至 280℃恒溫 17.5 min,柱流速 1 mL/min;EI源 70 eV,離子源溫度 250℃,全掃描,分流比 1∶20。

2.4 檢材的提取及凈化

玻璃瓶碎片直接用乙酸乙酯提取后經(jīng) GC/MS分析。

取死者的肝組織 15g,絞碎與死者胃內(nèi)容 4 g混合,加丙酮水 30 mL浸泡,離心,取上清液濃縮揮去丙酮至 2mL左右,用乙酸乙酯 6mL×2提取,收集乙酸乙酯液并濃縮至 0.1mL,供 GC/MS分析。

3 結(jié)果與討論

(1)死者的胃內(nèi)容和肝組織混合提取后經(jīng)GC/MS分析,所得的總離子流色譜圖如圖2所示。圖2中,分析時(shí)間為 8.542min的色譜峰所對(duì)應(yīng)的質(zhì)譜碎片特征離子及豐度比如圖3所示,與 NIST譜庫中檢索到得甲基異柳磷一致。同時(shí)將現(xiàn)場(chǎng)玻璃碎片經(jīng)有機(jī)溶劑提取后供 GC/MS分析,結(jié)果所得總離子流圖中色譜峰保留時(shí)間及其對(duì)應(yīng)的質(zhì)譜特征碎片離子與死者臟器組織中分析檢測(cè)結(jié)果一致。

圖2 胃內(nèi)容及肝組織混合提取液GC/MS總離子流色譜圖

圖3 胃內(nèi)容及肝組織混合提取液(Rt:8.542m in)GC/MS質(zhì)譜圖

(2)甲基異柳磷屬高毒有機(jī)磷殺蟲劑,在生物體內(nèi)易代謝、分解,在生物臟器組織中分析檢測(cè)困難。在本案例中由于尸體及生物檢材的保存不當(dāng),造成生物檢材高度腐敗,致使毒物在體內(nèi)再分布、降解以及在腐敗檢材中的進(jìn)一步代謝分解,致使檢測(cè)更加困難,極易漏檢。現(xiàn)場(chǎng)物證材料玻璃碎片中檢出甲基異柳磷為生物檢材的檢測(cè)提供了一定的檢驗(yàn)方向。因此,現(xiàn)場(chǎng)的物證材料對(duì)生物檢材中毒物檢測(cè)至關(guān)重要,在很大程度上能夠?yàn)槎疚锓治鎏峁┮欢ǖ姆较颉?/p>

(3)甲基異柳磷易溶于苯、甲苯、二甲苯、乙醚等有機(jī)溶劑,筆者曾采用苯、甲苯、二甲苯對(duì)肝組織進(jìn)行提取,由于肝組織已高度腐敗,采用有機(jī)溶劑直接提取,雜質(zhì)干擾嚴(yán)重,無法進(jìn)行儀器分析;而采用丙酮水提取,一方面將待測(cè)物溶解在丙酮水液中,另一方面丙酮可沉淀檢材中腐敗蛋白質(zhì),同時(shí)在揮去丙酮的過程中去除部分油脂及雜質(zhì),在此過程中也起到凈化的目的,但是由于高度腐敗,儀器分析無法去除基質(zhì)干擾,將提取液又經(jīng)中性三氧化二鋁柱凈化后分析,雜質(zhì)干擾去除卻仍未檢出甲基異柳磷。但將死者的胃內(nèi)容及肝組織混合經(jīng)上述提取過程提取,結(jié)果檢出甲基異柳磷。由此可見,對(duì)于高度腐敗的生物檢材,提取凈化是關(guān)鍵,需謹(jǐn)慎處理,否則極易漏檢。

(4)本案例中胃內(nèi)容量?jī)H僅 4 g,且已高度腐敗,單從胃內(nèi)容或肝組織中提取有機(jī)磷農(nóng)藥分析相當(dāng)困難,完全有可能漏檢,筆者將二者合在一起提取,便于檢測(cè),最終得到滿意結(jié)果。

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