周 慶 ,黃 強 ,石 卿 ,楊 偉
(1.四川阿壩州科學(xué)技術(shù)研究院,四川 汶川 623000;2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué),四川 雅安 625000)
近年來,大量文獻報道了硒(Se)與谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活力的關(guān)系。硒作為一種必需的微量元素,具有多方面的保健功能。目前,廣泛使用的補硒方法是以亞硒酸鈉作為硒源,但此方法存在許多弊病,因為超過一定濃度的亞硒酸鈉就是劇毒物質(zhì),生物也很難利用,生產(chǎn)實踐中稍有過量就有引起中毒的危險,特別是幼齡動物更為敏感?,F(xiàn)在許多國家在進行食用昆蟲的研究和開發(fā),食用昆蟲富集硒將成為一種重要的補硒方法。硒作為食用昆蟲飼料添加劑不僅可以促進食用昆蟲的生產(chǎn),而且對人的健康有利。本文以黃粉蟲為試驗對象,觀察亞硒酸鈉(NaSeO3)對其GSH-PX活性的影響。
1.1 試驗動物 試驗動物選用生長發(fā)育良好的中齡黃粉蟲幼蟲360 g,隨機分成6組,每組6個重復(fù),每個重復(fù) 10 g。分別給予含亞硒酸鈉 0、0.5、10、20、40、80mg/kg的麥麩飼料喂養(yǎng)。
1.2 血液樣品的制取 黃粉蟲在用亞硒酸鈉處理后,分別于第 1、2、4、8、12、16 d 測定其 GSH-PX 活性。用大頭針刺黃粉蟲的第二腹節(jié),待血液流出用吸管吸取黃粉蟲血液20μL,加入到1mL雙蒸水中,微波冰水振搖20 s左右,溶血成1∶50的溶血液,將制取好的樣品置于冰水中備用。
1.3 GSH-PX活力的測定 參照榮征星、黃愛纓等的方法。
2.1 飼喂同一濃度的亞硒酸鈉對黃粉蟲血淋巴GSHPX的影響 從圖1可以看出,飼喂同一濃度的亞硒酸鈉組和對照組相比,其黃粉蟲血淋巴GSH-PX活性均比對照組高。
添加亞硒酸鈉濃度為0.5mg/kg時,黃粉蟲血淋巴GSH-PX活性在第2 d上升,在第4 d開始下降,并在第8~16 d達到較穩(wěn)定的狀態(tài);加硒濃度為10mg/kg時,第1 d黃粉蟲血淋巴GSH-PX活性就升至最高,且是各濃度處理中最高的,第2~16 d其活性均比第1d低,但在第12 d后達穩(wěn)定狀態(tài);加硒濃度為20mg/kg時,黃粉蟲血淋巴的GSH-PX活性在第2 d升高,在第4~8 d降低,第16 d其活性顯著升高;加硒濃度為40mg/kg、80mg/kg時,黃粉蟲血淋巴GSH-PX活性在第2~4 d升高,第8d下降,第12~16d達到較穩(wěn)定的狀態(tài),究其原因可能是所添加的亞硒酸鈉已達到一定的毒性濃度,在初期由于黃粉蟲不能適應(yīng)添硒的飼料而拒食,導(dǎo)致黃粉蟲的血淋巴GSH-PX活性上升緩慢,隨著飼養(yǎng)時間的不斷延長,到后期黃粉蟲慢慢適應(yīng)了加硒飼料后,其血淋巴的GSH-PX活性才顯著上升。
2.2 飼喂不同濃度的亞硒酸鈉對黃粉蟲血淋巴GSHPX的影響 從圖2可以看出,在同一時間與對照組相比,不同亞硒酸鈉濃度處理組的黃粉蟲血淋巴的GSH-PX活性都顯著上升。
在第 1、2、12、16 d,飼料中亞硒酸鈉濃度為0.5 mg/kg、10mg/kg時,黃粉蟲血淋巴的GSH-PX活性隨著飼料中亞硒酸鈉濃度的增加顯著上升,并在硒濃度為10mg/kg時達到最高值;飼料中亞硒酸鈉濃度為20mg/kg時,黃粉蟲血淋巴的GSH-PX活性開始下降,并在硒濃度為40mg/kg、80mg/kg時達到較穩(wěn)定的狀態(tài)。在第4、8 d,飼料中亞硒酸鈉濃度為0.5mg/kg、10mg/kg時,黃粉蟲血淋巴的GSH-PX活性隨著飼料中硒濃度的增加而顯著上升;在硒濃度為20mg/kg時黃粉蟲血淋巴的GSH-PX活性開始下降,在硒濃度為40mg/kg時又開始上升并達到最高值,在硒濃度為80mg/kg時黃粉蟲血淋巴的GSH-PX活性又下降。
本試驗結(jié)果表明,黃粉蟲血淋巴存在一定水平的GSH-PX活性,并且增加亞硒酸鈉的攝入量可以提高黃粉蟲血淋巴的GSH-PX活性。飼喂同一濃度的亞硒酸鈉,黃粉蟲血淋巴的GSH-PX活性不隨飼養(yǎng)時間的延長而不斷升高,由此可見延長飼喂時間不能提高黃粉蟲血淋巴的GSH-PX活性。飼喂不同濃度的亞硒酸鈉,黃粉蟲血淋巴GSH-PX活性沒有隨著硒濃度的不斷增加而持續(xù)升高,當硒濃度達到一定水平時,黃粉蟲血淋巴GSH-PX活性開始下降。由于GSH-PX活性是硒的功能性標志,當GSH-PX活性降低時,說明硒的生物功能的發(fā)揮已受到限制,本試驗中硒的生物功能得以最佳發(fā)揮的濃度是10mg/kg。由此我們認為,確定硒的添加量時,應(yīng)該以硒的生物功能得到最佳發(fā)揮為基礎(chǔ)。另外,硒在黃粉蟲血淋巴中有一定的富集,但GSH-PX不是最主要的形式,硒還可能以其他形式富集于黃粉蟲體內(nèi)。
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